姜燕，鮑慧娟，張海悅

（長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春 130012）

花生紅衣白藜蘆醇的研究進(jìn)展

姜燕，鮑慧娟，張海悅

（長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春 130012）

摘 要：介紹花生紅衣中白藜蘆醇的性質(zhì)、提取和鑒定方法及應(yīng)用，并對(duì)其今后的發(fā)展做了概述。

關(guān)鍵詞：花生紅衣；白藜蘆醇；提??；鑒定；應(yīng)用

花生又稱落花生、番果、長(zhǎng)壽果等，屬豆科，一年生草本植物。花生紅衣為花生的種皮，具有抗氧化作用，但在花生產(chǎn)品加工中通常被除去，我國(guó)對(duì)花生紅衣的綜合利用水平較低，有必要充分開(kāi)發(fā)花生紅衣中的活性成分，并將其用于食品、醫(yī)藥和保健品等行業(yè)。

1 花生紅衣的活性成分

花生紅衣又稱長(zhǎng)果衣、落花生衣、紅薄衣。主要成分包括：碳水化合物（12%～28%）、脂肪（10%～14%）、蛋白質(zhì)（11%～18%）、水分（5%～9%）、灰分（8%～12%）、粗纖維（37%～42%）、當(dāng)寧（7%）和多種色素等[1-2]。花生紅衣中含有豐富的多酚類(lèi)物質(zhì)，如阿魏酸、原花色素、兒茶素等，還含有一些生物堿，這些物質(zhì)都具有很強(qiáng)的抗氧化活性[1-2]。

另外，花生紅衣還有一定的藥理作用，它對(duì)多種出血具有良好的療效，如能治血友病、類(lèi)血友病、術(shù)后出血、肝病出血癥、原發(fā)性及繼發(fā)性血小板減少性紫癜、胃、腸、肺、子宮等出血，它含有豐富的甘油酯和甾醇酯，具有抑制纖維蛋白的溶解，促進(jìn)骨髓制造血小板從而縮短出血時(shí)間，并且有提高血小板的質(zhì)量，加強(qiáng)毛細(xì)血管的吸收性，調(diào)節(jié)凝血因子缺陷等功能[1-3]。

2 白藜蘆醇

白藜蘆醇是花生紅衣中的非黃酮類(lèi)多酚化合物，它是一種天然抗氧化劑，又稱芪三酚，逆轉(zhuǎn)醇，（E）-5-[2-（4-羥苯基）-乙烯基]-1，3-苯二酚，3，5，4-三羥基芪，化學(xué)式為C14H12O3。1939年，日本人從植物白藜蘆的根中提取，直至上世紀(jì)90年代才備受關(guān)注。目前已在21科，31屬，72種植物中被發(fā)現(xiàn)，如豆科的落花生屬，決明屬，槐屬，百合科的蘆醇屬，桃金娘科的桉屬，葡萄科的葡萄屬等[4]。它廣泛存在于虎杖、葡萄、花生和桑葚等植物中。不同植物中白藜蘆醇的含量不同，且在一種植物中因品種的不同含量也有差異，如葡萄中葡萄皮是主要合成部位，白藜蘆醇的含量高，花生皮中白藜蘆醇的含量多于花生仁[5]。Sanders等[6]報(bào)道了成熟的可食用花生種子中白藜蘆醇含量?jī)H為0.03 mg/g～0.14 mg/g，而花生紅衣中的含量0.65 mg/g。用反相高效液相色譜法測(cè)定4個(gè)品種（珠江1號(hào)、花育20、花育22、花育31）花生中白藜蘆醇的含量，得到珠江1號(hào)花生根、種皮、殼、莖、葉和仁中的白藜蘆醇平均含量分別是 90.37、86.20、78.01、58.56、38.21 μg/g 和 11.10 μg/g，其他各品種中均以根部最高，仁部最低，與花育20，花育22和花育31號(hào)相比，珠江1號(hào)的白藜蘆醇含量最高，花育31號(hào)白藜蘆醇含量最低[7]。

2.1 白藜蘆醇的性質(zhì)

2.1.1 藥用價(jià)值

已有研究證明限制熱量攝取（caloric restriction，CR）能夠延長(zhǎng)壽命，CR引起的壽命延長(zhǎng)與上調(diào)去乙酰化酶Sir2（silence information regulator2）分不開(kāi)。在哺乳動(dòng)物中Sir2的類(lèi)似物是SIRT1，CR是SIRT1強(qiáng)誘導(dǎo)劑，CR能增加SIRT1在這些哺乳動(dòng)物的腦、心、腎等器官和組織中表達(dá)，增加SIRT1的基因表達(dá)則可模擬CR所引起的生理變化，包括延長(zhǎng)壽命，這表明CR所引起的壽命改變是通過(guò)SIRT1起作用的，而白藜蘆醇可以作為SIRT1的激活劑，因而具有延長(zhǎng)壽命的作用[8]。

姚煜等[9]通過(guò)建立小鼠的衰老模型，加入白藜蘆醇干預(yù)，觀測(cè)小鼠的抗衰老情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是白藜蘆醇干預(yù)組中小鼠的血清超氧化物歧化酶（SOD）含量升高；血清的丙二醛（MDA）含量降低；CD4+細(xì)胞數(shù)量不變，CD8+細(xì)胞數(shù)量升高；血清中IL-6，IL-8含量降低。SOD是清除體內(nèi)自由基的關(guān)鍵酶，而自由基及代謝產(chǎn)物引起的脂質(zhì)過(guò)氧化可導(dǎo)致老化和老年性疾??；MDA是自由基攻擊生物體降解的產(chǎn)物，MAD的多少可以間接反映組織損傷程度；隨著年齡的增長(zhǎng)，胸腺細(xì)胞減少，分化出的T細(xì)胞數(shù)目也減少，吞噬和分泌干擾素能力下降，免疫功能也下下降，CD4+與CD8+比值降低說(shuō)明白藜蘆醇可以延緩胸腺萎縮；血清中的IL-6和IL-8也可反映組織損傷程度。這些結(jié)果均表明白藜蘆醇具有一定的抗衰老作用。

另外，白藜蘆醇還有抗癌和抗腫瘤的作用，白藜蘆醇不僅可以抑制細(xì)胞腫瘤的活性，還能通過(guò)抑制細(xì)胞的分泌物質(zhì)來(lái)抑制細(xì)胞增殖，從某種意義上來(lái)講是通過(guò)加速細(xì)胞分化來(lái)控制細(xì)胞增殖和癌變[10-11]。另有研究報(bào)道，白藜蘆醇對(duì)卵巢癌，結(jié)腸癌，乳腺癌，前列腺癌，胃癌，鼠肝細(xì)胞癌，白血病等多種癌細(xì)胞均有顯著的抑制作用[12-18]。但目前為止，尚未對(duì)抗腫瘤活性的機(jī)制達(dá)成一致，從眾多結(jié)果來(lái)看，白藜蘆醇主要是通過(guò)抑制環(huán)氧合酶、細(xì)胞色素酶，誘導(dǎo)解毒酶，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分化、凋亡等途徑來(lái)達(dá)到抗腫瘤效果[19]。

2.1.2 熱穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性

用分光光度計(jì)和高效液相色譜法分別對(duì)不同條件下的白藜蘆醇穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)量，結(jié)果為反式白藜蘆醇具有熱不穩(wěn)定性和光不穩(wěn)定性，對(duì)光照非常敏感，在加熱或光照下有一部分轉(zhuǎn)化成順式白藜蘆醇，但加熱并不影響白藜蘆醇的清除自由基的能力，反而清除自由基能力增強(qiáng)，所以可以利用白藜蘆醇這種性質(zhì)，將其添加到化妝品中[20]。

2.1.3 其他作用

白藜蘆醇還有抗炎癥、抗過(guò)敏、調(diào)節(jié)新陳代謝、保肝、利肝等功效。在皮膚彈性和厚度的維持方面，有促進(jìn)膠原蛋白分泌的功效[4]?？梢詫⑵渥鳛樘砑觿┯糜诨瘖y品和保健品中，成為一種新型的美容保健品，以延緩人的衰老，保持肌膚水分[21-22]。作為植物性雌性激素添加劑，可以防止女性在絕經(jīng)后由于體內(nèi)雌激素分泌不足而引起的一系列疾病，如骨質(zhì)疏松，乳腺癌，子宮癌等[21]。

3 花生紅衣中白藜蘆醇的提取和鑒定

3.1 提取方法

提取花生紅衣中白藜蘆醇的方法很多，目前常用的提取方法有纖維素酶提取法、堿提取法、溶劑提取法、微波和超聲波輔助提取法。

3.1.1 纖維素酶法提取

纖維素酶能夠水解纖維，促使植物細(xì)胞壁破裂，細(xì)胞的內(nèi)含物充分釋放出，有利于提取有效成分[23]。用纖維素酶法提取花生紅衣中的白藜蘆醇，最佳工藝條件是纖維素酶與紅衣粗粉的比例1∶500，酶解溫度50℃，pH為5.0，時(shí)間90 min，提取溶劑所用乙醇的體積分?jǐn)?shù)為60%，與傳統(tǒng)提取工藝相比，提取率提高4.43 倍[24]。

纖維素酶結(jié)合超聲波輔助有機(jī)溶劑提取白藜蘆醇，測(cè)得山葡萄渣中白藜蘆醇含量為1.187 mg/g，最佳工藝條件是酶解溫度55℃，超聲處理時(shí)間5 min，料液比 1∶30，提取時(shí)間 4 h[25]。

3.1.2 堿法提取

楊偉強(qiáng)等[26]首次研究堿法提取花生紅衣中白藜蘆醇的工藝條件，其提取工藝為：花生紅衣粉碎→稱量→堿液→浸泡→勻速攪拌→過(guò)濾→反復(fù)浸提→合并濾液→紫外分光光度法測(cè)定吸光值→計(jì)算白藜蘆醇得率。得出最佳的提取工藝條件為：pH為10，溫度40℃，提取時(shí)間2 h，提取4次，在此條件下白藜蘆醇的得率為0.196%。

3.1.3 溶劑提取法

溶劑提取法是一種最廣泛的提取方法，常用的溶劑有乙醇、乙醚、水、甲醇和乙酸乙酯等。常用的方法有浸漬法、滲漉法、煎煮法和回流提取法。目前，用溶劑法從虎杖、葡萄等中提取白藜蘆醇的研究較多，用80%乙醇和丙酮溶液按照1∶1的體積提取桑葚中白藜蘆醇，而從花生紅衣中用溶劑法提取白藜蘆醇的研究較少[27]。用乙醇溶液作為提取劑，對(duì)葡萄中白藜蘆醇進(jìn)行提取，得到最佳提取提取工藝為溫度70℃，料液比 1∶20，提取時(shí)間 5 h，溶劑的濃度 80%[28]。

3.1.4 微波和超聲波輔助法提取

Ballard等[29]用微波輔助法提取花生紅衣中的多酚類(lèi)物質(zhì)，提取最佳工藝條件為微波功率855 W、輻照時(shí)間30 s、花生紅衣1.5 g，最佳料液比1∶25，以沒(méi)食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)，得到多酚的最大量為143.6 mg/g花生皮。與傳統(tǒng)方法相比，微波輔助法具有節(jié)時(shí)、效率高、提取率高等優(yōu)點(diǎn)。

采用超聲波輔助乙醇提取花生紅衣中的多酚類(lèi)物質(zhì)，最佳料液比1∶16（g/mL），乙醇溶液體積分?jǐn)?shù)80%，提取時(shí)間10 min，提取功率240 W?；ㄉt衣中多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)豬油的抗氧化活性最優(yōu)質(zhì)量濃度為150 mg/L，在同等條件下，配制相同質(zhì)量濃度的VC、沒(méi)食子酸，對(duì)豬油的抗氧化性進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果是花生紅衣中多酚類(lèi)物質(zhì)的還原性大于相同濃度下VC和沒(méi)食子酸的還原性[30]。通過(guò)超聲波輔助提取花生紅衣中白藜蘆醇，乙醇作為提取劑，在最佳工藝條件下白藜蘆醇的得率為0.036%，與傳統(tǒng)熱浸提取相比具有較高的效率，20 min就可以將有效成分提取完全[31]。

3.2 鑒定方法

常用的鑒定方法有熒光光度法、紫外分光光度法、高效液相色譜法、反相高效液相色譜法、氣相色譜法和顏色反應(yīng)等。

3.2.1 熒光光度法、紫外分光光度法

熒光光度法檢測(cè)白藜蘆醇含量的最佳條件為：激發(fā)波長(zhǎng)324.06 nm，發(fā)射波長(zhǎng)400.00 nm，白藜蘆醇在0～1.68×10-5mol/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，此法的檢出限為8.14×10-10mol/L[32]。該方法成本低、操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確率高，檢測(cè)結(jié)果可靠，可用于生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)研究中白藜蘆醇的測(cè)定。

紫外分光光度法測(cè)定虎杖中白藜蘆醇的含量，在波長(zhǎng)305 nm下，結(jié)果檢測(cè)濃度在3 μg/mL～16 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好（r2=0.999 0）[33]。

3.2.2 液相色譜法

采用反相高效液相色譜法，色譜柱為Ultimate-C18，流動(dòng)相為乙晴∶水（0∶70），流速為 1 mL/min，在 306 nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，并用外標(biāo)法定量。測(cè)得白藜蘆醇在 1.22×10-5g/L～0.1 g/L范圍內(nèi)的檢出限為 3.6×10-7g/L。這種方法具有靈敏度高、分析速度快、線性范圍寬和重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)[34]。用同種方法測(cè)定4種花生（珍珠紅1號(hào)、花育20、花育22、花育31號(hào)）中白藜蘆醇含量，流動(dòng)相為乙晴∶水（20∶80），在303 nm波長(zhǎng)、30℃柱溫、1 mL/min流速下進(jìn)行色譜分析[7]。

朱祥瑞等[27]用高效液相色譜法測(cè)得桑葚果皮、桑葚的韌皮和木質(zhì)部中白藜蘆醇的含量，結(jié)果顯示新鮮的桑樹(shù)果皮中白藜蘆醇的含量（0.128 mg/g）低于干燥的桑葚果皮中白藜蘆醇的含量（0.144 mg/g），而在木質(zhì)部中未檢測(cè)到白藜蘆醇。

3.2.3 薄層掃描法

利用熒光光譜層板上暗斑的熒光淬滅程度或者利用薄層色譜斑點(diǎn)（組分）發(fā)出的熒光強(qiáng)度進(jìn)行定量分析[35]。陳敏等[36]用薄層掃描法測(cè)定了葡萄酒中順、反白藜蘆醇，樣品用C18固相柱提取，固體相是聚酰胺薄膜，展開(kāi)劑用苯-甲酸-苯（體積比為 10∶5∶1），先進(jìn)行分離；再用熒光掃描法進(jìn)行定量，所得的4組分呈較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.997 2～0.999 6，平均回收率為97.1%～98.5%，白藜蘆醇測(cè)得率為2.0%～3.2%。

3.2.4 氣相色譜法

氣相色譜法對(duì)葡萄酒中的反式白藜蘆醇進(jìn)行分析測(cè)定，該法簡(jiǎn)便、樣品用量少、損失小，適合實(shí)際樣品的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)測(cè)得市售的7種葡萄酒中白藜蘆醇的含量，其中4種干紅葡萄酒中的反式白藜蘆醇的含量分別是 1.262、1.815、0.676、0.733 mg/L，而另外 3 種未檢測(cè)到反式白藜蘆醇的是紅葡萄酒。由于干紅葡萄酒是以紅葡萄為原料直接發(fā)酵完全后制得的，而紅葡萄酒是以干紅葡萄酒為原料直接稀釋得到的，所以干紅葡萄酒中的白藜蘆醇多于紅葡萄酒中的白藜蘆醇[37]。

3.2.5 顏色反應(yīng)

白藜蘆醇等黃酮類(lèi)有些特征的顏色反應(yīng)，將白藜蘆醇用不同的試劑或者進(jìn)行光照實(shí)驗(yàn)結(jié)果所得的顏色反應(yīng)也不同，它的紅外圖譜在3 250 cm-1處有酚羥基吸收峰，在 1 620 cm-1、1 540 cm-1、1 500 cm-1處有苯環(huán)吸收峰，在965 cm-1處有反式—C C—的特征吸收，700 cm-1處是順式—C C—的特征吸收[38]。

4 應(yīng)用前景

白藜蘆醇具有抗炎、抗過(guò)敏、保肝、利肝等多種有益于人體的生理功能，所以在保健食品中得以應(yīng)用，在國(guó)外已有白藜蘆醇相關(guān)的保健品上市，有膠囊、片劑和口服液等類(lèi)型。白藜蘆醇是一種多酚類(lèi)的抗氧化劑，將其用于化妝品中，可使皮膚延緩衰老且防止紫外線從而保護(hù)皮膚。無(wú)論是在食品、醫(yī)藥，還是在保健品行業(yè)，白藜蘆醇都有著廣闊的應(yīng)用前景。而從通常會(huì)被廢棄的副產(chǎn)品資源——花生紅衣中提取，不僅可以充分利用資源，還能節(jié)約成本，為今后白藜蘆醇的提供一種可靠的來(lái)源。另外，開(kāi)發(fā)花生紅衣中的白藜蘆醇，不會(huì)像“藥食同源”的虎杖那樣，造成“與藥爭(zhēng)源”的矛盾。

5 結(jié)語(yǔ)

目前，我國(guó)生產(chǎn)白藜蘆醇主要從虎杖、葡萄皮等中提取進(jìn)行研究，對(duì)花生紅衣中白藜蘆醇的研究較少，而從虎杖中提取的白藜蘆醇受到工藝水平的限制，大多是使用粗產(chǎn)品，所以開(kāi)發(fā)高純度的白藜蘆醇需要進(jìn)一步的研究?；ㄉt衣中白藜蘆醇的提取方式較多，檢測(cè)方法也較為成熟，但是真正純化和分離出白藜蘆醇低聚物的報(bào)道卻較少，這有待于進(jìn)一步的研究。大力開(kāi)發(fā)白藜蘆醇及含白藜蘆醇的天然植物資源，可以促進(jìn)種植業(yè)的發(fā)展并使資源得以充分利用，還可以促動(dòng)農(nóng)業(yè)發(fā)展，提高當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)水平，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。未來(lái)在低成本的花生紅衣中提取出高含量的白藜蘆醇，將在食品、保健品和醫(yī)藥等行業(yè)中得到更加廣泛的應(yīng)用。

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Review on Resveratrol from Peanut Skin

JIANG Yan，BAO Hui-juan，ZHANG Hai-yue
（SchoolofChemicalandLifeScience，ChangchunUniversityofTechnology，Changchun130012，Jilin，China）

Abstract：The extraction methods， identification， and applications of resveratrol from peanut skin were summarized.Research trends were also predicted.

Key words：peanut skin；resveratrol；extraction；identification；applications

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.18.032

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（YYZX201130-1）

姜燕（1981—），女（漢），講師，博士，研究方向：食品包裝材料，果蔬貯藏保鮮技術(shù)，天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)。

2012-12-04