歐柏生，魏 飛，馮 杲，覃芳芳

白癜風(fēng)（Vitiligo）是一種常見的獲得性色素脫失性皮膚病，屬中醫(yī)學(xué)“白癜”、“白駁風(fēng)”、“白駁”或“白處”等范疇，是臨床上難治性皮膚病之一。有關(guān)白癜風(fēng)的病因及發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明，隨著近年來細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)等的發(fā)展，中醫(yī)藥對(duì)于白癜風(fēng)的實(shí)驗(yàn)研究也越來越深入，并取得了較大進(jìn)展?，F(xiàn)將近年與白癜風(fēng)相關(guān)的中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)研究概述如下。

1 實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型豚鼠的研究概況

彭英等[1]觀察驅(qū)白巴布期膠囊對(duì)豚鼠實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)的療效，采用氫醌化學(xué)脫色法制造豚鼠實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型，將模型豚鼠給予不同劑量的驅(qū)白巴布期膠囊，治療結(jié)束后，采用多巴和鐵染色觀察黑素細(xì)胞及黑色顆粒的變化，免疫組織化學(xué)切片法觀察Tyr含量變化，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)后各劑量驅(qū)白巴布期膠囊給藥組及預(yù)防組黑素細(xì)胞計(jì)數(shù)較模型組比較明顯升高，基底含黑素顆粒細(xì)胞計(jì)數(shù)較模型組比較也顯著提高;酪氨酸酶（Tyr）表達(dá)較模型組也顯著升高。江濤等[2]觀察白癜風(fēng)凝膠對(duì)豚鼠實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)的療效，應(yīng)用化學(xué)脫色法制備實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)動(dòng)物模型，用白癜風(fēng)凝膠進(jìn)行治療，并與白癜風(fēng)酊的療效進(jìn)行比較，以表皮毛囊黑素生成、膽堿酯酶（CHE）和Tyr活性為考察指標(biāo)，結(jié)果白癜風(fēng)凝膠比白癜風(fēng)酊對(duì)白癜風(fēng)豚鼠的黑素生成、膽堿酯酶和Tyr的活性影響更顯著。梁毅等[3]研究加味愈白丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型豚鼠的治療作用，采用氫醌脫色法制備實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)豚鼠模型，觀察加味愈白丸低、中、高劑量組及陽性對(duì)照組對(duì)實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型豚鼠血液中 Tyr、單胺氧化酶（MA0）、CHE 和丙二醛（MDA）、免疫器官臟器系數(shù)、血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)以及皮膚黑素的影響，結(jié)果表明加味愈白丸能夠使模型豚鼠血漿中Tyr含量明顯增多，MA0值降低，CHE活力降低，MDA含量減少，免疫功能增強(qiáng)，血液粘稠度降低以及皮膚黑素的生成增加。

2 中藥的作用機(jī)制

2.1 中藥對(duì)黑素細(xì)胞的影響

2.1.1 直接干預(yù)黑素細(xì)胞 崔玲等[4]通過測(cè)定中藥白凈沖劑（當(dāng)歸、桃仁、生地黃、川芎、赤芍藥、女貞子、黃芩、郁金、刺蒺藜、旱蓮草、菟絲子等）含藥血清對(duì)黑素細(xì)胞增殖和合成黑素量有明顯促進(jìn)作用。馬慧群等[5]用包被纖維粘連蛋白的48孔培養(yǎng)板檢測(cè)黑素細(xì)胞黏附，用微孔膜研究黑素細(xì)胞遷移，結(jié)果表明補(bǔ)骨脂、白芷可同時(shí)促進(jìn)黑素細(xì)胞黏附和遷移，提示兩者的促黑素細(xì)胞黏附作用無顯著性差異，而促黑素細(xì)胞遷移作用有顯著性差異，補(bǔ)骨脂、白芷均可通過增加黑素細(xì)胞黏附和/或遷移對(duì)白癜風(fēng)產(chǎn)生治療作用。馬景昕等[6]選擇在離體實(shí)驗(yàn)中對(duì)Tyr有激活作用的旱蓮草等7種中藥，以棕色豚鼠為動(dòng)物模型，采用mRNA原位雜交觀察中藥外涂對(duì)豚鼠皮膚TyrmRNA水平的影響，并schmorl法染色和多巴—氧化酶染色觀察中藥促色素生成及黑素細(xì)胞增殖的作用，結(jié)果表明原位雜交顯示中藥處理組的Tyr陽性細(xì)胞數(shù)和雜交信號(hào)明顯高于對(duì)照組，尤其以旱蓮草、夏枯草、刺蒺藜等顯著。schmorl法染色和多巴—氧化酶染色示7種中藥能使豚鼠表皮基底層內(nèi)含有黑素顆粒的細(xì)胞數(shù)和多巴陽性細(xì)胞的數(shù)量增多，但7種中藥的兩種作用并不完全平行，旱蓮草等7種中藥均具有上調(diào)豚鼠皮膚Tyr的基因表達(dá)、促進(jìn)黑素生成和黑素細(xì)胞增殖的作用，提示中藥的作用不僅限于轉(zhuǎn)錄水平，有可能影響黑素細(xì)胞的增殖和黑素顆粒的生成。薛文輝等[7]用MTT法測(cè)定中藥消白靈湯（當(dāng)歸、赤芍藥、川芎、補(bǔ)骨脂、白芷、防風(fēng)、熟地黃、菟絲子、刺蒺藜）及其主要成分不同濃度對(duì)體外培養(yǎng)的鼠B16FIO黑素瘤細(xì)胞系黑素細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的情況；用NaOH裂解法測(cè)定中藥消白靈湯及其主要成分不同濃度對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的影響，結(jié)果表明中藥消白靈湯能促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖和黑素合成，并提示補(bǔ)腎陽藥和養(yǎng)血活血藥在治療白癜風(fēng)的組方用藥中的重要作用。譚城等[8]選取7種中藥單體，采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法體外測(cè)定Tyr活性。結(jié)果表明柚皮素、愈創(chuàng)木酚、濱蒿內(nèi)酯、7-甲氧基香豆素對(duì)Tyr具有輕度的激活作用，而山柰素對(duì)Tyr有明顯的激活作用。

2.1.2 影響內(nèi)皮素（ET-1） 張煥梅等[9]研究表明ET-1在白癜風(fēng)的發(fā)病中起著較為重要的作用，能促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖，還能誘導(dǎo)毛囊處毛根鞘黑素細(xì)胞向表皮移動(dòng)。馬慧軍等[10]體外研究ET-1對(duì)毛囊外根鞘無色素黑素細(xì)胞（AMMC）黏附和移行的作用，采用免疫熒光雙重染色法對(duì)AMMC分別進(jìn)行羅丹明（紅色）和異硫氰酸（綠色）標(biāo)記纖維型-肌動(dòng)蛋白（F-actin）、β微管蛋白，激光共聚焦顯微鏡觀察3種濃度ET-1處理前后AMMC纖維型-肌動(dòng)蛋白、β微管蛋白形態(tài)的變化。結(jié)果表明ET-1在體外可以促進(jìn)AMMC的黏附和移行,其作用可能與誘導(dǎo)束狀應(yīng)力纖維形成和促進(jìn)其向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)分布有關(guān)。管曉春等[11]采用角質(zhì)形成細(xì)胞體外培養(yǎng)的方法，將白芷、補(bǔ)骨脂等15味單方和其復(fù)方中藥處理后，放射免疫方法測(cè)定培養(yǎng)的上清液中ET-1的含量，結(jié)果表明白芷和補(bǔ)骨脂有顯著的上調(diào)角質(zhì)形成細(xì)胞分泌ET-1的作用，因此增加ET-1的分泌是其治療白癜風(fēng)的機(jī)制之一。

2.2 中藥與Tyr Tyr是皮膚黑素合成的關(guān)鍵酶，已經(jīng)證實(shí)8-甲氧補(bǔ)骨脂素（8-MOP）對(duì)Tyr有激活作用，一些體外實(shí)驗(yàn)表明某些中藥的作用強(qiáng)度與8-MOP基本相同甚至更強(qiáng)，為臨床篩選治療白癜風(fēng)的中藥提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。李曉捷等[12]觀察中藥菟絲子水提取物對(duì)AMMC分化的誘導(dǎo)作用，以8-MOP為陽性對(duì)照，菟絲子水提取物以濃度依賴方式促進(jìn)黑素的生成，50.0 mg/ml的作用與8-MOP作用相當(dāng)。而且發(fā)現(xiàn)AMMC細(xì)胞內(nèi)線粒體明顯增多，并且線粒體擴(kuò)張，說明其功能活躍，進(jìn)一步研究AMMC分化的機(jī)制發(fā)現(xiàn)菟絲子的提取物可以直接增強(qiáng)Tyr的活性，且有很強(qiáng)的促進(jìn)作用，因此推斷菟絲子促進(jìn)AMMC的分化作用與其激活Tyr活性有關(guān)。李洪武等[13]采用蘑菇Tyr多巴速率氧化法體外測(cè)定白癜風(fēng)丸（補(bǔ)骨脂、當(dāng)歸、地膚子、刺蒺藜）及其組方中中藥對(duì)Tyr的活性的影響，白癜風(fēng)丸和各組方中藥的乙醇提取液對(duì)Tyr的活性有顯著性提高，說明白癜風(fēng)丸能夠通過提高Tyr的活性達(dá)到治療白癜風(fēng)的目的。劉利平等[14]通過實(shí)驗(yàn)比較白癜風(fēng)系列丸劑與白癜風(fēng)顆粒劑對(duì)Tyr活性影響，結(jié)果表明這些制劑中均含有激活Tyr促進(jìn)黑素合成的成分。劉之力等[15]通過六種中藥復(fù)方乙醇提取物對(duì)Tyr激活作用及動(dòng)物致色素作用的研究，結(jié)果表明6種中藥復(fù)方均使豚鼠表皮基底層中含黑素顆粒細(xì)胞增多，對(duì)Tyr具有激活作用的中藥組成復(fù)方后并不一定對(duì)Tyr有激活作用，中藥復(fù)方在離體和活體上的作用并不完全平行，提示中藥對(duì)黑素生成的機(jī)理，不僅限于對(duì)Tyr的激活作用，提示對(duì)白癜風(fēng)病的治療應(yīng)該遵循辨證論治的原則。涂彩霞等[16]通過體外實(shí)驗(yàn)觀察47種中藥乙醇提取物對(duì)Tyr的激活作用及對(duì)酶動(dòng)力學(xué)的影響，結(jié)果表明19種中藥的乙醇提取物能顯著激活Tyr的活性，其中雞血藤、夏枯草、女貞子、薄荷、潼蒺藜、申姜、旱蓮草、黃芩、澤蘭、甘草和山（毛）慈姑對(duì)Tyr的激活作用均明顯高于補(bǔ)骨脂素；中藥對(duì)Tyr的激活作用表現(xiàn)為競(jìng)爭(zhēng)性、非競(jìng)爭(zhēng)性和混合性激活作用，說明部分中藥治療白癜風(fēng)有效與其激活Tyr有關(guān)，具有混合性激活作用的中藥對(duì)Tyr活性影響較大。

2.3 對(duì)免疫功能的影響 吳蓓玲等[17]觀察白癜風(fēng)顆粒劑、白癜風(fēng)搽劑聯(lián)合UVA光療治療前后白癜風(fēng)患者外周血T細(xì)胞亞群及Fas/FasL表達(dá)量的改變，探討其與白癜風(fēng)發(fā)生的關(guān)系及臨床意義，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行T細(xì)胞亞群檢測(cè)及外周血淋巴細(xì)胞及Fas/FasL定量檢測(cè)，結(jié)果白癜風(fēng)的發(fā)病與T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫功能紊亂有關(guān)，白癜風(fēng)顆粒荊、白癜風(fēng)搽劑聯(lián)合合UVA光療可通過有效逆轉(zhuǎn)外周血淋巴細(xì)胞的Fas/FasL表達(dá)異常，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的正常凋亡，調(diào)整機(jī)體的免疫功能發(fā)揮療效。李振魯?shù)萚18]報(bào)道白癜丸對(duì)免疫抑制小鼠的免疫器官胸腺有明顯的增重作用，可顯著提高地塞米松致免疫低下小鼠溶血素含量。提示白癜丸是通過免疫力、調(diào)節(jié)免疫功能紊亂而達(dá)到臨床治療的目的。成愛華等[19]研究黑素再生中藥對(duì)白癜風(fēng)患者免疫功能的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者治療后的免疫球蛋白IgA、IgG水平較治療前有非常顯著的改善（P<0.01），表明黑素再生中藥能提高機(jī)體免疫水平,具有降低體液免疫及增強(qiáng)細(xì)胞免疫等功能。

綜上所述，中醫(yī)藥治療白癜風(fēng)的實(shí)驗(yàn)研究主要體現(xiàn)在對(duì)中藥單體、單味中藥、復(fù)方中藥對(duì)黑素細(xì)胞增殖、Tyr含量及活性、內(nèi)皮素和機(jī)體免疫力的影響的研究，從動(dòng)物模型、細(xì)胞分子水平層面來闡明中藥治療白癜風(fēng)的作用靶點(diǎn)和機(jī)理。研究證明,養(yǎng)血活血、滋補(bǔ)肝腎、含光敏感物質(zhì)中藥可能對(duì)白癜風(fēng)治療有效。但以上實(shí)驗(yàn)研究也有不足之處：①缺乏對(duì)中藥治療白癜風(fēng)的藥動(dòng)學(xué)研究；②缺乏中醫(yī)理法方藥理論的指導(dǎo)，多采用西醫(yī)的觀點(diǎn)指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)；③多為低水平重復(fù)實(shí)驗(yàn),有效藥物間的橫向比較實(shí)驗(yàn)較少；④現(xiàn)行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)造模方式并不完全符合白癜風(fēng)的病理變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往并不完全符合臨床。今后中藥治療白癜風(fēng)的實(shí)驗(yàn)室研究應(yīng)該充分考慮中醫(yī)藥的辨證論治和個(gè)體化治療思想，結(jié)合現(xiàn)代皮膚病學(xué)的研究成果，應(yīng)用臨床療效可靠的中藥復(fù)方研究對(duì)黑素細(xì)胞增殖、內(nèi)皮素、Tyr和免疫學(xué)等指標(biāo)的影響，以及加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型科學(xué)化的構(gòu)建應(yīng)該是中醫(yī)藥治療白癜風(fēng)實(shí)驗(yàn)室研究的方向之一。另外，白癜風(fēng)對(duì)患者的心理造成較大的傷害，越來越多的臨床證據(jù)表明白癜風(fēng)發(fā)病與神經(jīng)免疫因素相關(guān)，神經(jīng)肽（NPY）作為一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)在各型白癜風(fēng)尤其是與神經(jīng)關(guān)系更為密切的節(jié)段型白癜風(fēng)的發(fā)病中可能起到重要的作用[20，21]。目前人們對(duì)于該領(lǐng)域的認(rèn)識(shí)尚未完全明確，主要的研究也只停留在細(xì)胞水平，還有許多分子生物學(xué)的機(jī)制需要科學(xué)工作者不斷地深入研究。這也符合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展模式，即生物一心理一社會(huì)醫(yī)學(xué)模式對(duì)疾病治療的認(rèn)識(shí)，值得醫(yī)家從神經(jīng)免疫學(xué)的角度進(jìn)一步探討。

[1]彭 英，霍仕霞，康雨彤，等.驅(qū)白巴布期膠囊治療豚鼠實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)作用研究[J]. 醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，30（7）:19-21，861-864.

[2]江 濤，葛 勤，張恩娟，等.白癜風(fēng)凝膠對(duì)豚鼠實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)治療作用[J]. 醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，19（1）:19-21.

[3]梁 毅，程越清，龍子江.加味愈白丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型豚鼠的治療作用[J]. 中國(guó)藥師，2010，13（10）:19-21，1457-1460.

[4]崔 玲，高天文.含中藥血清對(duì)體外黑素細(xì)胞增殖及黑素合成量的影響[J]. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2005，19（l）:l9-20.

[5]馬慧群，馮 捷，張憲旗，等.補(bǔ)骨脂、白芷對(duì)黑素細(xì)胞遷移和黏附影響的比較[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，14（7）:850-851.

[6]馬景昕，涂彩霞.中藥對(duì)豚鼠皮膚酪氨酸酶mRNA水平的影響及致色素作用[J]. 中華皮膚科雜志，2005，,38（2）：92-94.

[7]薛文輝，瞿 幸.中藥消白靈湯對(duì)黑素細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2005，21（8）:613-615.

[8]譚 城，朱文元，魯 嚴(yán).山柰素等7種中藥單體對(duì)酪氨酸酶的激活作用[J]. 臨床皮膚病雜志，2006，35（5）:275-276.

[9]張煥梅，劉志軍.內(nèi)皮素1和細(xì)胞間黏附分子1與白癜風(fēng)相關(guān)性的研究[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2008,24（5）:379-380.

[10]馬慧軍，朱文元，王大廣，等.內(nèi)皮素-1對(duì)毛囊外毛根鞘無色素黑素細(xì)胞黏附和移行及其細(xì)胞骨架形態(tài)的影響[J].臨床皮膚科雜志，2005，34（10）:643-646.

[11]管曉春，段逸群，吳紀(jì)圓，等.中草藥對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞分泌ET-1影響的研究[J]. 皮膚病與性病，2007，29（1）3-5.

[12]李曉捷，尤海燕，楊 晶，等.中藥菟絲子水提取物促毛囊無色素黑素細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2008，22（1）:4-13.

[13]李洪武，朱文元.白癜風(fēng)丸及其組方中藥對(duì)酪氨酸酶活性的影響[J]. 中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2007，23（1）:39-40.

[14]劉利平，朱全紅，殷永冠，等.白癜風(fēng)系列丸劑與白癜風(fēng)顆粒劑對(duì)酪氨酸酶活性影響的比較研究[J].中國(guó)中醫(yī)科技，2005，12（3）:136.

[15]劉之力，李雅莉，劉 俐，等.六種中藥復(fù)方乙醇提取物對(duì)酪氨酸酶激活作用及動(dòng)物致色素作用的研究[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2005，19（10）:588-591.

[16]涂彩霞，劉之力.47種中藥對(duì)酪氨酸酶活性的影響及酶動(dòng)力學(xué)的研究[J]. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2006，22（6）:455-458.

[17]吳蓓玲，孫 潔，余土根，等.白癜風(fēng)顆粒劑對(duì)白癜風(fēng)患者外周血T細(xì)胞亞群及Fas／FasL系統(tǒng)表達(dá)調(diào)節(jié)作用的臨床研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，2010，17（1）:14-16.

[18]李振魯，白慧玲，趙粵萍，等.白癜丸治療白癜風(fēng)臨床療效及其對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2002，36（10）:34-36.

[19]成愛華，韓梅海.黑素再生中藥對(duì)白癜風(fēng)患者免疫功能的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2002，9（1）：24-27.

[20]馬慧軍，朱文元.神經(jīng)肽Y與白癜風(fēng)相關(guān)的研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè)，2003，29（5）：276-278.

[21]歐柏生，馮 杲，黃 彥，等.“從肝論治”法治療白癜風(fēng)80例療效觀察[J]. 遼寧中醫(yī)雜志，2011，38（3）：493-494.