馮 金，孟慶艷，胡宏波 (廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545007)

D－二聚體(D－dimer，D－D)是交聯(lián)纖維蛋白在纖溶酶水解后所形成的特異性降解產(chǎn)物，是體內(nèi)高凝狀態(tài)和繼發(fā)纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物。隨著研究的進(jìn)展，D－二聚體已經(jīng)逐漸被認(rèn)為是確診深靜脈血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)等疾病的關(guān)鍵指標(biāo)［1－3］;此外，D二聚體還被認(rèn)為是評(píng)估惡性腫瘤、心腦血管疾病和肝臟疾病等多種疾病的病情，療效及預(yù)后的可靠指標(biāo)［4－6］。D－二聚體的測(cè)定應(yīng)用于臨床，對(duì)多種疾病的診斷、療效觀察、預(yù)后判斷具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。目前檢測(cè)的方法很多，主要有膠乳凝集法、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附法和免疫滲濾法等。近年來(lái)，筆者對(duì)免疫比濁法和膠乳凝集法兩種D－二聚體的檢測(cè)方法進(jìn)行了比較，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:標(biāo)本均來(lái)自2012年在我院住院患者和健康體檢者，其中患病組150例，男89例，女61例，平均年齡(57±10.9)歲，為在我院神經(jīng)內(nèi)科住院的患者。健康體檢組50例，其中男35例，女15例，平均年齡(55±6.24)歲，均證實(shí)無(wú)創(chuàng)傷、血栓性疾病、肝病、無(wú)心腦血管疾病和腫瘤等。

1.2 方法:真空采血管(含枸櫞酸鈉溶液抗凝劑)采集患者清晨空腹靜脈血。3 000 r/min離心15 min，分離乏血小板血漿待測(cè)。并在2 h內(nèi)完成檢測(cè)。免疫比濁法測(cè)定D－二聚體含量時(shí)采用SYSMEX CA7000全自動(dòng)凝血儀，所使用試劑質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)品均為siemens Dade(德靈)血凝試劑。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行操作，測(cè)定的正常參考值為0～500 mg/L，超出500 mg/L判定為陽(yáng)性結(jié)果。膠乳凝集法測(cè)定D－二聚體含量時(shí)所采用的試劑購(gòu)自天津美德太平洋，嚴(yán)格按照膠乳凝集法操作手冊(cè)中操作步驟進(jìn)行，測(cè)定的正常參考結(jié)果為陰性，即無(wú)肉眼可見(jiàn)的顆粒形成。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

免疫比濁法和膠乳凝集法分別檢測(cè)患者及健康體檢者D－二聚體檢出率，結(jié)果如表1和表2所示，健康體檢者兩種方法檢測(cè)均未出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，在150例患者中，免疫比濁法所檢測(cè)的陽(yáng)性率為84%，顯著高于膠乳凝集法的陽(yáng)性檢測(cè)率(34.6%)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

表1 健康體檢者血漿D－二聚體兩種方法檢測(cè)陰性率和陽(yáng)性率比較(n=50)

表2 患者血漿D－二聚體兩種方法檢測(cè)陰性率和陽(yáng)性率比較(n= 150)

3 討論

D－二聚體的檢測(cè)在國(guó)內(nèi)已開(kāi)展多年，為血栓性疾病的診斷治療、纖溶活性的鑒別以及腫瘤患者的治療、觀察、預(yù)后等都提供了重要的參考價(jià)值［7－8］。

D－二聚體的檢測(cè)方法可分為半定量和定量。半定量檢測(cè)方法中比較常用的方法是乳膠凝集法，其原理是被檢血漿中D－二聚體與包被在乳膠顆粒上的單抗相作用，產(chǎn)生絮狀沉淀反應(yīng)。乳膠凝集法由于其簡(jiǎn)單的操作方法，不需要復(fù)雜的儀器，適用于床邊檢測(cè)(POCT)，適合臨床上個(gè)體檢測(cè);此外，由于乳膠凝集法快速、經(jīng)濟(jì)，該方法在各個(gè)基層醫(yī)院中得到廣泛推廣。免疫比濁法是定量方法中較常用的方法之一。其工作原理是:標(biāo)本中D－二聚體與包被有高特異性D－二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結(jié)合后，乳膠顆粒發(fā)生凝集，在405 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)透射光強(qiáng)度的變化，凝集程度與標(biāo)本中D－二聚體的含量成正比。免疫比濁法由于其準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，尤其通常是由自動(dòng)化儀器完成檢測(cè)，具有更高的靈敏度與精密度，避免了人工加樣的偶然誤差，在臨床上也得到廣泛應(yīng)用。

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，D－二聚體的兩種檢測(cè)方法——乳膠凝集法和免疫比濁法均有良好的陰性預(yù)期值，但兩者的敏感性存在很大差異。經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析比較，兩種檢測(cè)方法的結(jié)果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)免疫比濁法的敏感性顯著高于乳膠凝集法。在本研究中，筆者發(fā)現(xiàn)，只有在含量＞5 000 mg/L的標(biāo)本(采用免疫比濁法檢測(cè))，乳膠凝集法才呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，因此，乳膠凝集法的陽(yáng)性預(yù)期值不佳。反觀使用SYSMEX CA7000免疫比濁法檢測(cè)D－二聚體，該法能夠?qū)?biāo)本中的D－二聚體進(jìn)行準(zhǔn)確快速的定量，具有良好的陰性預(yù)期值和陽(yáng)性預(yù)期值。此外，在陽(yáng)性結(jié)果的判斷上，乳膠凝集法往往存在主觀差異，且無(wú)法給出具體的數(shù)值，因此乳膠凝集法檢測(cè)標(biāo)本中的D－二聚體雖然對(duì)排除和診斷DIC、深靜脈血栓、肺栓塞有一定幫助，但無(wú)法給臨床醫(yī)生提供治療效果的依據(jù)及病情的監(jiān)測(cè)。而免疫比濁法使用方便、操作簡(jiǎn)單，可適用于各種生化分析儀，并可實(shí)現(xiàn)定量測(cè)定，為疾病的治療、觀察、預(yù)后等都提供了重要的參考價(jià)值。

綜上所述，筆者認(rèn)為，免疫比濁法準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便，具有較高的靈敏度，并可實(shí)現(xiàn)定量測(cè)定，滿足了臨床急診需要，值得在各大中型醫(yī)院中推廣使用。

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