李愛麗，黃麗芳，曾健兵，盧建華 (廣東省韶關(guān)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 韶關(guān) 512000)

自動生化分析儀是將實(shí)驗(yàn)室檢查分析過程中的取樣、加試劑、去干擾物、混合、保溫反應(yīng)、自動檢測、數(shù)據(jù)處理、試驗(yàn)后的清洗等步驟進(jìn)行自動化操作的儀器。自動生化分析儀使臨床生物化學(xué)檢測實(shí)現(xiàn)了自動化、機(jī)械化。隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各類全自動生化分析儀廣泛應(yīng)用于臨床，往往同一醫(yī)院會采用不同儀器、試劑和方法檢測相同的項(xiàng)目，以滿足不同功能分區(qū)的需求。由不同儀器、試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品配套所構(gòu)成的檢測系統(tǒng)是不完全一致的，其結(jié)果勢必影響到臨床判斷和對患者病情變化的監(jiān)測。因此，如何進(jìn)行比對試驗(yàn)、如何評估不同檢測系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的偏倚，以及如何判斷不同檢測系統(tǒng)結(jié)果的可比性，是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)界關(guān)注和討論的熱點(diǎn)。本研究按照美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)EP9－A2文件《用患者樣品進(jìn)行方法比對及偏倚評估》的要求［1］，對我科室的兩臺全自動生化儀邁瑞B(yǎng)S800和BeckmanAU－5811的檢測結(jié)果進(jìn)行比對分析和偏倚評估，以驗(yàn)證分析系統(tǒng)的有效性、可比性和檢測結(jié)果的一致性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器、試劑:Beckman AU5811全自動生化分析儀電極部分試劑和校準(zhǔn)品采用貝克曼原裝試劑及校準(zhǔn)品，其余檢測項(xiàng)目試劑采用寧波美康產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)參數(shù)按照說明書設(shè)定;邁瑞B(yǎng)S800全自動生化分析儀，試劑和校準(zhǔn)品均采用深圳邁瑞公司生產(chǎn)的原裝試劑及校準(zhǔn)品，實(shí)驗(yàn)參數(shù)廠家工程師導(dǎo)入。兩臺儀器所用質(zhì)控品為美國伯樂公司的質(zhì)控品。

1.1.2 檢測系統(tǒng):Beckman AU5811全自動生化分析儀參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評及廣東省臨檢中心室間質(zhì)評成績合格，且室內(nèi)質(zhì)控日間CV均小于CLIA’88規(guī)定的室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)允許誤差范圍的1/2，因此以Beckman AU5811全自動生化分析儀為比較系統(tǒng)，邁瑞B(yǎng)S800全自動生化分析儀作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。

1.2 比對項(xiàng)目:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿素(BUN)、肌酐(CR)、尿酸(UA)、血糖(GLU、鉀(K+)、鈉(Na+)、氯(Cl－)。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)條件:嚴(yán)格按照我室的SOP文件對儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)，確定儀器處于良好狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)前在兩臺儀器上分別測定高值和中值質(zhì)控血清，測定項(xiàng)目為本實(shí)驗(yàn)室所開展的生化檢測項(xiàng)目，對失控的項(xiàng)目校準(zhǔn)后重新測定，所有項(xiàng)目均在控再進(jìn)行樣本的測定。

1.3.2 數(shù)據(jù)收集及處理:每天從我院門診、體檢及住院患者中隨機(jī)選取8份在線性范圍內(nèi)的高、中、低三個(gè)濃度的新鮮無溶血、無脂濁血清(可以減少因用標(biāo)準(zhǔn)品而可能造成的基質(zhì)效應(yīng))，且參考范圍以外的標(biāo)本在50%以上，在兩臺生化分析儀上同時(shí)進(jìn)行比對項(xiàng)目的測定，8份樣本都按照1～8的順序測定，再按照8～1的順序重復(fù)測定，連續(xù)進(jìn)行5天，記錄測定結(jié)果，不采用明確有人為誤差的結(jié)果。同時(shí)選用同一批號的伯樂公司的高值和中值質(zhì)控血清連續(xù)20次的檢測結(jié)果，計(jì)算出均值、標(biāo)準(zhǔn)差(s)和變異系數(shù)(cv)來評價(jià)兩個(gè)監(jiān)測系統(tǒng)的精密度。

1.3.3 離群值檢驗(yàn):計(jì)算每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測定值間的差值、每個(gè)標(biāo)本測定值的均值及兩種方法測定結(jié)果均值間的差值，按EP9－A2文件進(jìn)行離群值檢驗(yàn)。

1.3.4 比較系統(tǒng)(X)測定范圍的檢驗(yàn):用相關(guān)系數(shù)(r)粗略估計(jì)X的分布范圍是否合適，若r＞0.975或r2＞0.95，則認(rèn)為X范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠。

1.3.5 計(jì)算線性回歸方程:Y實(shí)驗(yàn)=bX比較+a

1.3.6 計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差:根據(jù)臨床使用要求，將各個(gè)項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度(XC)代入回歸方程，計(jì)算Y與X之間的系統(tǒng)誤差(SE)。SE=|Y－X|;相對偏差(SE%)= (SE/XC)×100%。

1.3.7 臨床可接受性能判斷:以方法學(xué)比較評估的SE%不大于1/2美國臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部門修正法規(guī)(CLIA’88)允許總誤差屬臨床可接受水平［2］，判斷比較系統(tǒng)與實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測系統(tǒng)精密度分析:根據(jù)質(zhì)控品連續(xù)20次的盲測結(jié)果，計(jì)算均值和變異系數(shù)以評價(jià)不同檢測系統(tǒng)的精密度，結(jié)果見表1。AST、ALT的單位為U/L，BUN、GLU、K、NA、CL為mmol/L，CR、UA為μmol/L。

表1 儀器精密度分析

2.2 兩種檢測系統(tǒng)的相關(guān)性和可接受性能的評價(jià):每天收集8份濃度各不相同的患者血清標(biāo)本，連續(xù)測定5 d，檢測系統(tǒng)Y與檢測系統(tǒng)X之間計(jì)算變異系數(shù)，與允許誤差范圍比較以及相關(guān)分析、回歸分析(相關(guān)系數(shù)r＞0.95，則認(rèn)為X的取值范圍合適，數(shù)據(jù)滿足統(tǒng)計(jì)要求，回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠)，結(jié)果見表2。

表2 兩種檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果相關(guān)與回歸分析

2.3 兩種檢測系統(tǒng)可接受性能的評價(jià):將各個(gè)檢測項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平代入各自的回歸方程，計(jì)算SE和SE%，判斷可接受性，見表3。結(jié)果表明，由于GLU檢測的回歸統(tǒng)計(jì)斜率和截距不可靠，所以其醫(yī)學(xué)決定水平的可接受性因SE%＞5%而判斷為“不可接受”，除此之外，其他比對項(xiàng)目的檢測結(jié)果符合臨床要求。

表3 兩檢測系統(tǒng)可接受性能的評價(jià)

3 討論

檢測系統(tǒng)包括完成一個(gè)檢測項(xiàng)目所需要的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合［3］。各個(gè)檢測系統(tǒng)對同一份標(biāo)本的同一項(xiàng)目檢測結(jié)果應(yīng)具有可比性。不同儀器之間，由于系統(tǒng)配置的不一致，如檢測方法、反應(yīng)杯體積、試劑的不同、反應(yīng)介質(zhì)、吸樣方式，以及檢測光路等都存在差別，常導(dǎo)致檢測結(jié)果的不一致，這種不同實(shí)驗(yàn)室之間，或同一實(shí)驗(yàn)室的不同儀器之間所存在的差別，常常被人們所忽略，從而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果的不確定性，常會給臨床帶來混亂。如何使不同的檢測系統(tǒng)一，使檢測結(jié)果相一致，已成為當(dāng)今臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化必須解決的問題。

本實(shí)驗(yàn)室目前有兩臺生化分析儀用于常規(guī)生化檢測，AU5811主要用于住院患者標(biāo)本的檢測，BS800主要用于門診患者和體檢標(biāo)本的檢測。為確保不同儀器檢測同一項(xiàng)目的結(jié)果一致性，目前不同生化分析儀間比對多采用NCCLS的EP9－A2文件進(jìn)行［4－8］。為確保不同儀器檢測同一項(xiàng)目的結(jié)果一致性，本研究參考NCCLS的EP9－A2文件，對不同檢測系統(tǒng)的九項(xiàng)生化結(jié)果進(jìn)行比對。從表1可以看出，兩臺儀器精密度均較高，且兩個(gè)水平質(zhì)控物測定結(jié)果非常接近。從表2可知，兩檢測系統(tǒng)相關(guān)性分析的相關(guān)系數(shù)除 GLU外均大于0.975，表明數(shù)據(jù)分布范圍較好，作回歸統(tǒng)計(jì)時(shí)其斜率和截距可靠，可以用醫(yī)學(xué)決定水平處的值來評估實(shí)驗(yàn)檢測系統(tǒng)的系統(tǒng)誤差能否為臨床所接受。同時(shí)我們也看到，兩臺儀器還是有一定的誤差，個(gè)別項(xiàng)目的斜率不是特別接近1，回歸方程的截距也較大，產(chǎn)生的原因可能是兩臺儀器的檢測系統(tǒng)不完全一樣。表3結(jié)果表明，所研究的九項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查測定值在兩系統(tǒng)間的誤差除GLU測定結(jié)果的預(yù)期偏差不能被接受外，其他幾項(xiàng)均小于CLIA’88規(guī)定的允許誤差的1/2，各檢測項(xiàng)目在兩儀器間的測量結(jié)果具有可比性，BS800全自動生化分析儀的檢測結(jié)果能為臨床所接受。這兩個(gè)系統(tǒng)的結(jié)果具有很好的相關(guān)性原因可能是BS800使用的原廠的試劑及校準(zhǔn)品，他們在一起構(gòu)成一個(gè)完整的檢測系統(tǒng)。而血糖之所以不能被接受是因?yàn)锽S800生化分析儀在分析血糖時(shí)用的采光周期與AU5811不同，AU5811是 27點(diǎn)，BS800采的是31－33點(diǎn)，BS800的分析時(shí)間延后，這就使得BS800測定的血糖結(jié)果偏高。筆者校準(zhǔn)了斜率和截距后重新測定，該項(xiàng)目取得了良好的一致性。

綜上所述，即使每臺儀器工作性能穩(wěn)定、室內(nèi)質(zhì)控正常，不同儀器間的檢測結(jié)果也存在一定的誤差，所以定期開展新鮮血的比對試驗(yàn)，對儀器進(jìn)行校正和偏倚評估，建立統(tǒng)一的室內(nèi)質(zhì)控系統(tǒng)，使系統(tǒng)間的相對偏差處于臨床可接受范圍是非常必要的。

［1］ The national committee for clinical Laboratory Standards Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline－Second Edition［S］.EP9－A2，2002，22(19):1.

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［3］ 叢玉隆，馮仁豐，陳曉東.臨床實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2004:111－380.

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