王小東王秀麗張 穎
1.黑龍江省大興安嶺地區(qū)食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所,黑龍江 加格達(dá)奇 165000;2.黑龍江省大興安嶺職業(yè)學(xué)院,黑龍江 加格達(dá)奇 165000
民間常用藥穩(wěn)心草的薄層色譜研究
王小東1王秀麗2張 穎1
1.黑龍江省大興安嶺地區(qū)食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所,黑龍江 加格達(dá)奇 165000;2.黑龍江省大興安嶺職業(yè)學(xué)院,黑龍江 加格達(dá)奇 165000
目的:建立穩(wěn)心草薄層色譜分析方法。方法:薄層色譜鑒別方法。結(jié)果:以有效成分金絲桃苷為指標(biāo),建立了穩(wěn)心草的專(zhuān)屬性薄層色譜。結(jié)論:建立的方法簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確,重現(xiàn)性良好,可用于穩(wěn)心草的定性分析。
穩(wěn)心草;薄層色譜鑒別方法
穩(wěn)心草(Hypericum attenuatum Choisy.),又名趕山鞭、黑點(diǎn)葉金絲桃[1]。該藥為藤黃科金絲桃屬植物,莖圓柱形,常有兩條突起的縱肋且散生黑色腺點(diǎn)或黑點(diǎn)。葉卵形、長(zhǎng)圓狀卵形或卵狀長(zhǎng)圓形,基部漸狹,無(wú)柄,兩面及邊緣散生黑腺點(diǎn)?;ǘ鄶?shù),成圓錐狀花序或聚傘狀花序;萼片5,頂端急尖,表面及邊緣有黑腺點(diǎn);花瓣5,淡黃色,沿表面及邊緣有稀疏的黑腺點(diǎn);雄蕊多數(shù);花柱3個(gè),分離。蒴果卵圓形或卵狀長(zhǎng)橢圓形?;ü?~11月[2]。穩(wěn)心草植物資源分布廣泛,分布在黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、甘肅、河南、安徽、山東、江蘇、浙江、江西、廣東、廣西等省。生長(zhǎng)于海拔在1100m以下的田野、半濕草地、草原、石礫地、草叢、林內(nèi)等處。民間用全草代茶葉用,全草可入藥,搗爛治療跌打損傷或煎服作蛇藥用。味苦,性平,入心經(jīng)。具有清熱解毒消腫,活血止痛止血,化痰通乳功效。主治各種出血,風(fēng)濕痹痛,外傷腫痛,乳癰,療瘡腫毒,咯血,吐血,崩漏及乳汁缺乏等。穩(wěn)心草還用于治療心臟病,內(nèi)蒙古呼倫貝爾盟地區(qū)通過(guò)對(duì)慢性克山病的臨床觀察,發(fā)現(xiàn)穩(wěn)心草在改善慢性克山病患者癥狀的同時(shí),還對(duì)肝臟腫大、浮腫、頸靜脈充盈有一定效果,從而使心功能獲得不同程度的好轉(zhuǎn)[3]。東北民間采全草內(nèi)服,用于解熱,或治婦女抽筋。顧麗貞等[4]對(duì)穩(wěn)心草的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究,從中分離出了金絲桃素、懈皮素、蘆丁、金絲桃苷和山茶酚,發(fā)現(xiàn)穩(wěn)心草含有大量黃酮類(lèi)化合物。董建勇等[5]對(duì)甘肅產(chǎn)穩(wěn)心草進(jìn)行了化學(xué)成分研究,從地上部分分離出了11個(gè)黃酮化合物。其藥理作用主要是黃酮類(lèi)成分,具有提高機(jī)體免疫力,促進(jìn)機(jī)體代謝、強(qiáng)心、降壓、利尿、抗菌、抗病毒、抗衰老及明顯的耐缺氧作用。本文采用薄層色譜法檢識(shí)穩(wěn)心草中金絲桃苷,方法簡(jiǎn)便快速,靈敏準(zhǔn)確。
1.1 藥品與試劑 實(shí)驗(yàn)所用藥材于2011年10月采于黑龍江省大興安嶺地區(qū)加格達(dá)奇區(qū)大子楊山,經(jīng)大興安嶺地區(qū)農(nóng)林科學(xué)研究院劉光工程師鑒定為藤黃科植物穩(wěn)心草(Hypericum attenuatum Choisy.)的地上部分。金絲桃苷標(biāo)準(zhǔn)品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào)111521-201004);聚酰胺薄膜武漢科新技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司經(jīng)銷(xiāo);實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。
1.2 儀器型號(hào) 電子天平AE200(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),KT-300Y超聲波藥品處理機(jī)(濟(jì)寧中冠超聲波有限責(zé)任公司),DSY-1四孔電熱恒溫水浴鍋(北京國(guó)華醫(yī)療機(jī)械廠),CAMAG-Linomat-5瑞士卡馬半自動(dòng)點(diǎn)樣儀,ZY-600U薄層色譜自動(dòng)成像分析系統(tǒng)(北京先驅(qū))。
取穩(wěn)心草藥材粉末0.3g,加20ml甲醇,超聲10min,濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?ml,使溶解,作為供試品溶液。另取金絲桃苷對(duì)照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液,作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅥB)實(shí)驗(yàn)。吸取供試品溶液4μl,2μl,對(duì)照品溶液2μl,分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上,以36%乙酸為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn),見(jiàn)圖1。
3.1 比較了甲醇、乙醇、乙醚和醋酸乙酯的提取效果,乙醚、醋酸乙酯提取液的樣品特征斑點(diǎn)少,乙醇提取液的樣品斑點(diǎn)不清晰,因此選用甲醇為提取溶劑。
3.2 供試品點(diǎn)樣量對(duì)比分析,點(diǎn)樣4μl較2μl斑點(diǎn)清晰,且重現(xiàn)性好,如圖所示,2μl為2號(hào)位置,4μl為3號(hào)位置,選擇供試品點(diǎn)樣量為4μl。
3.3 穩(wěn)心草藥材均選取整棵藥材,粉碎混合均勻,稱(chēng)取一定量進(jìn)行薄層分析,可防止莖、葉、花蕾、果實(shí)等不同部位金絲桃苷含量不同而產(chǎn)生誤差。
3.4 研究結(jié)果表明,穩(wěn)心草的有效活性成分中含有金絲桃苷等,經(jīng)薄層色譜分析研究,金絲桃苷在Rf=0.41處薄層色譜分離清楚,斑點(diǎn)清晰,無(wú)托尾,重顯性好。本項(xiàng)研究建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于穩(wěn)心草的質(zhì)量控制,為該藥材的進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì)《中國(guó)植物志》.第五十卷.第二分冊(cè)[M].北京:科學(xué)出版社,1990:71-72.
[2]唐庭棣.大興安嶺藥用資源[S].哈爾濱:哈爾濱出版社,2001:309-310.
[3]黑龍江呼倫貝爾盟地方病研究所.穩(wěn)心草對(duì)慢性克山病的初步治療觀察[J].黑龍江醫(yī)藥,1976(5,6):46-48.
[4]顧麗貞,張宏彬.穩(wěn)心草化學(xué)成分的研究[J].植物學(xué)報(bào),1980,22(2):151.
[5]董建勇,賈忠建.趕山鞭中黃酮類(lèi)化學(xué)成分研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2005,12(40):897-899.
The common folk medicine W enxin Cao thin-layer chromatography
WANG Xiao-dong1,WANG Xiu-li2,ZHANG Ying1
(1.Daxinganling Food and drug inspection Jiagedaqi165000;2.Daxinganling Vocational College Heilongjiang Jiagedaqi165000)
Objective:To establish Wenxin Cao for thin-layer chromatography analysis.M ethods:TLC method.Results:The effective active ingredient Hypericin as an index established exclusivity Wenxin Cao TLC.Conclusion:The established method issimple,accurate,good repeatability can be used Wenxin Cao quality control.
Wenxin Cao;TLCmethod
R284.1
A
1007-8517(2013)05-0021-02
2013.02.10)