黃敏

廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530003

回春丹系兒科較常用的中成藥。具清熱定驚，祛風祛痰之功效，臨床上用于小兒驚風，感冒發(fā)熱，嘔吐腹瀉，咳嗽氣喘等癥，療效確切。收載于《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊［1］。處方由麝香、川貝母、全蝎、僵蠶、半夏、鉤藤、膽南星、木香、豆蔻、檀香、沉香、枳殼、甘草、朱砂、大黃、麥芽、槐花等32味藥材組成。其中槐花、車前子、側(cè)柏葉、厚樸等14味加水煎煮，濾液濃縮干燥粉碎成浸膏粉。麝香、半夏、大黃等18味藥材粉碎成粉末。兩者混勻，用水泛丸制成。原標準中只有性狀和檢查項目。為更好的控制藥品質(zhì)量我們對其質(zhì)量標準進行研究。采用顯微鑒別方法可檢出處方中的川貝母、豆蔻、檀香、甘草、全蝎、僵蠶、朱砂等7味，薄層色譜法可檢出鉤藤、木香、大黃等3味，同時增加［浸出物］測定，較好地控制了本品的質(zhì)量?，F(xiàn)將試驗方法與結(jié)果報道如下。

1 儀器、試藥與樣品

OLYMPUS生物顯微鏡、全自動式顯微照相儀，日本.奧林巴斯光學工業(yè)株式會社;0.3%氫氧化鈉羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板，作者自制;硅膠G薄層板、羧甲基纖維素鈉為黏合劑硅膠G薄層板，煙臺市化學工業(yè)研究所;化學試劑均為分析純，大黃酚對照品，鉤藤、木香、大黃對照藥材均為中國藥品生物制品檢定所;回春丹樣品為廣西某制藥有限公司生產(chǎn);陰性樣品為作者按本品處方、比例、工藝、方法制成。

2 方法與結(jié)果

2.1 顯微鑒別 取本品粉末少許，用水裝片，置顯微鏡下觀察淀粉粒特征。取本品粉末加適量水，攪拌溶解，離心2次，取沉淀物，用水合氯醛裝片加熱透化，置顯微鏡下觀察其他組織特征。

淀粉粒廣卵形、長圓形、腎形、橢圓形或貝殼形，直徑40～64μm，臍點短縫狀、人字形或馬蹄形層紋隱約可見，為川貝母的顯微特征 (圖1);內(nèi)種皮石細胞黃棕色或棕紅色，表面觀類多角形，壁厚，胞腔內(nèi)含硅質(zhì)塊，為豆蔻的顯微特征 (圖2);厚壁細胞長方形或類方形，直徑約45μm，木化，胞腔內(nèi)含草酸鈣方晶1～2塊，為檀香的顯微特征 (圖3);纖維成束，壁厚，微木化，薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，為甘草的顯微特征 (圖4);體壁碎片淡黃色至黃色或綠黃色，表面有小圓孔、網(wǎng)狀紋理或圓形毛窩，有時可見棕褐色剛毛，為全蝎的顯微特征 (圖5);體壁碎片無色或淡黃色，表面有極細的菌絲體，為僵蠶的顯微特征 (圖6);不規(guī)則細小顆粒，暗棕紅色，有光澤，邊緣暗黑色，為朱砂的顯微特征 (圖7);

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 鉤藤的薄層鑒別 取本品10 g，研細，加80%乙醇100ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加1%鹽酸溶液10 ml使溶解，濾過，濾液用氨試液調(diào)節(jié)pH值至10，用氯仿振搖提取2次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取鉤藤對照藥材3g，同法制成對照藥材溶液。再取缺鉤藤陰性樣品10g，同法制成缺鉤藤陰性溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各10～15μl，分別點于同一 以0.3%氫氧化鈉羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷一丙酮一甲醇一濃氨試液 (10:16:0.5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的橙紅色斑點，陰性對照無干擾 (見圖8)。

2.2.2 木香的薄層鑒別 取本品10g，研細，加石油醚(30～60℃)30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。再取缺木香樣品10g，同法制成缺木香陰性溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10～15μl，對照藥材溶液2～5μl分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－丙酮 (10∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍色斑點。陰性對照無干擾 (見圖9)。

2.2.3 大黃的薄層鑒別 取大黃對照藥材0.1g，加石油醚(30～60℃)30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為對照藥材溶液。另取大黃酚對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺大黃陰性樣品粉末10g，同法制成缺大黃陰性溶液。照薄層色譜法 (中國藥典2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取【木香鑒別】項下供試品溶液及上述對照藥材溶液、對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚 (30～60℃)－甲酸乙酯－甲酸 (15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點。陰性對照無干擾 (見圖10)。

2.3 ［浸出物］測定 乙醇浸出物。精密稱取本品粉末約3g，置250ml的錐形瓶中，精密加入乙醇100ml，塞緊，稱定重量，靜置1小時后，連接回流裝置，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過。精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時，移置干燥器中，放置30分鐘，迅速精密稱定重量，以干燥品計算。經(jīng)測定本品6批的乙醇浸出物含量分別見下表。

批號 A－01 A－02 A－03 A－04 A－05 A－06 平均值(%)乙醇浸出物(%)17.16 16.53 15.45 15.54 15.37 15.25 15.88

考慮到本品藥味多，乙醇浸出物含量會因各原料藥材的產(chǎn)地、采收季節(jié)、加工方法的不同，有一定變化差異，故暫擬定本品乙醇浸出物不得少于15.0%。

3 討論

本品川貝母、全蝎、僵蠶、豆蔻、檀香、甘草、朱砂等7味藥材的顯微特征，經(jīng)過6批次樣品的觀察，專屬性強。本品試驗中，還能觀察到草酸鈣針晶，為天麻、半夏、膽南星等共有特征，因?qū)傩圆粡?，不收入正文中。觀察到大黃的草酸鈣簇晶特征，但因草酸鈣簇晶分布量極少，在顯微鏡下較難觀察到，同時薄層鑒別中已有大黃的鑒別，故不將大黃粉末特征收入正文中。在鉤藤薄層色譜試驗中，曾選用過二氯甲烷－甲醇－濃氨試液 (4∶1∶0.1)、二氯甲烷－甲醇 (23∶1)等展開劑，展開，但效果不理想。在薄層鑒別試驗過程中，曾參考中國藥典2010年版及有關(guān)文獻的方法，對方中麝香、牛黃、天麻、半夏、膽南星、檀香、沉香、枳殼、陳皮、甘草、槐花、香附等10多味藥材，采用過不同的溶劑，不同的提前方法，不同的展開劑、顯色劑進行摸索，因本品復方藥味太多，有的主斑點不清晰，或陰性有干擾，未獲得理想效果，無法收入正文中。曾采用高效液相法對本品進行含量測試驗，因為本品處方藥味較多，成分復雜，陰性干擾大等原因，未能建立含測方法。故暫測定其乙醇浸出物的含量，對本品的質(zhì)量控制有一定的現(xiàn)實意義。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑 (第二冊)，1990，95.