許國(guó)新，楊鳳英，陳郁鋼

(1、無(wú)錫市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇無(wú)錫214062；2、太倉(cāng)出入境檢驗(yàn)檢疫局江蘇太倉(cāng)215400；3、太倉(cāng)婦幼保健所，江蘇太倉(cāng)215400)

冠心病患者血漿高遷移率族蛋白B1與白細(xì)胞介素18水平變化研究

許國(guó)新1，楊鳳英2，陳郁鋼3

(1、無(wú)錫市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇無(wú)錫214062；2、太倉(cāng)出入境檢驗(yàn)檢疫局江蘇太倉(cāng)215400；3、太倉(cāng)婦幼保健所，江蘇太倉(cāng)215400)

目的研究冠心病(CHD)患者血清白細(xì)胞介素-18(IL-18)、高遷移率族蛋白B1(HMGBl)水平變化的臨床意義，為CHD的診療提供參考。方法CHD組102例為本院確診患者，對(duì)照組52例為健康體檢者，采集早晨空腹靜脈血5ml于EDTA-Na2抗凝管中，3000 r/min離心15 min后采用ELISA法測(cè)定HMGBl、IL-18水平。結(jié)果CHD組HMGBl、IL-18水平高于對(duì)照組(P＜0.01)，CHD組中HMGBl、IL-18水平在不同病變程度各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其水平與冠狀動(dòng)脈病變程度呈正相關(guān)。結(jié)論HMGBl、IL-18水平變化佐證冠心病的發(fā)生和發(fā)展中炎癥反應(yīng)在起著重要作用，血漿HMGBl、IL-18水平檢測(cè)可作為冠心病病程變化的參考指標(biāo)。

冠心??；高遷移率族蛋白Bl；白細(xì)胞介素-18

冠心病(coronary heart disease，CHD)的發(fā)病由多種因素引起，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化(AS)為CHD的病理基礎(chǔ)，在其發(fā)病過(guò)程中炎癥反應(yīng)的作用極其重要。高遷移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)與白細(xì)胞介素-18(interlekin-18，IL-18)均為重要的炎癥因子[1，2]。細(xì)胞在機(jī)械損傷和壞死過(guò)程中能夠釋放HMGB1，介導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞向損傷或壞死部位聚集。前炎癥細(xì)胞因子IL-18是炎癥反應(yīng)的一個(gè)中樞性調(diào)節(jié)因子，在血管粥樣硬化斑塊中有表達(dá)，而沒(méi)有粥樣硬化的血管中檢測(cè)不到IL-18。本文通過(guò)觀察CHD患者血漿HMGBl、 IL-18水平變化，以期為冠心病的診斷與治療提供新的策略和靶位。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象CHD組為2012年3月至2013年3月本院明確診斷的CHD診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，確診的CHD住院病人102例，男性62例，女性40例，平均年齡(56.38±11.26)歲。根據(jù)CHD診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)，將CHD患者分為穩(wěn)定型心絞痛(SAP)(36例)組、不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)(32例)和急性心肌梗死(AMI)(34例)，冠脈造影以冠狀動(dòng)脈狹窄≥50%作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)冠脈造影顯示累及支數(shù)，分為單支病變組31例、雙支病變組37例、三支病變組34例三組。對(duì)照組為我院健康體檢者52例，平均年齡(57.38±10.76)歲，男25例，女27例。對(duì)照組經(jīng)體

檢各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)均正常，冠狀動(dòng)脈造影成像未見(jiàn)狹窄或斑塊，排除肝膽疾病、感染、心臟疾病、風(fēng)濕活動(dòng)、惡性腫瘤以及急性損傷等疾患。

1.2 標(biāo)本采集與保存所有研究對(duì)象均抽取早晨空腹靜脈血，采集早晨空腹靜脈血5ml于EDTANa2抗凝管中，30 min內(nèi)3000r/min離心15min，分離血漿置于-20℃冰箱保存。

1.3 方法采用ELISA法測(cè)定HMGBl、IL-18水平，HMGBl試劑盒為美國(guó)ADL公司產(chǎn)品，IL-18試劑盒為Eton Bioscience產(chǎn)品，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。結(jié)果以x±s表示，率的比較用χ2檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，2組間比較采用非配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1CHD組、AMI組、UAP組、SAP組與對(duì)照組HMGBl、IL-18水平比較與對(duì)照組相比，CHD組病人HMGBl、IL-18水平均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。AMI組HMGBl、IL-18水平高于UAP組、SAP組；UAP組HMGBl、IL-18水平SAP組。見(jiàn)表1。

表1 不同類型CHD患者血漿HMGBl、IL-18水平

2.2 不同病變程度CHD患者血漿HMGBl、IL-18水平變化單支、雙支、三支病變組組血漿HMGBl、IL-18水平依次升高，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。隨著冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)的增加，HMGBl、IL-18水平也逐漸增高。見(jiàn)表2。

表2 不同病變程度CHD患者血漿HMGBl、IL-18水平

3 討論

HMGBl、IL-18作為炎性因子，在介導(dǎo)炎癥過(guò)程中扮演重要角色，對(duì)AS的發(fā)生發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。而AS作為CHD的病理基礎(chǔ)，在其形成及發(fā)展過(guò)程中與炎癥關(guān)系密切，炎癥因子、炎癥細(xì)胞起著重要作用，故HMGBl、IL-18在CHD起著重要作用。

HMGBl是一種廣泛存在于高等真核細(xì)胞中的染色體結(jié)合蛋白，位于大多數(shù)細(xì)胞的胞核和胞漿中，為基因調(diào)控蛋白。在細(xì)胞表面，HMGB1主要通過(guò)與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體結(jié)合而作用于細(xì)胞[4]，參與DNA的重組、修復(fù)。正常血管壁內(nèi)存在HMGBl的表達(dá)，分布比較均勻，生理?xiàng)l件下，HMGBl維持在較低水平的表達(dá)。當(dāng)組織細(xì)胞壞死、損傷時(shí)，HMGBl釋放至血液和組織液，高濃度的HMGBl誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)分泌炎癥因子，炎癥因子趨化、活化單核-巨噬細(xì)胞，從而在內(nèi)皮細(xì)胞損傷-炎癥因子產(chǎn)生-HMGBl分泌中形成正反饋，加快AS的形成。因此，HMGBl在動(dòng)脈粥樣硬化以及促進(jìn)冠脈再狹窄的血管重構(gòu)的病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。Sorensen MV等研究顯示[5]，HMGB1升高程度與急性心肌梗死不良預(yù)后有很好的相關(guān)性。本研究中CHD患者HMGBl水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)，在CHD組各分組比較中，HMGBl水平隨著CHD病情的加重明顯增加，且隨著冠狀動(dòng)脈病變累及支數(shù)的遞增，炎癥范圍的擴(kuò)大，HMGBl也呈上升趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示HMGBl水平與AS形成和發(fā)展密切相關(guān)，在冠狀動(dòng)脈病變過(guò)程中起著十分重要的作用。

IL-18作為CHD的一個(gè)重要危險(xiǎn)因子，被認(rèn)為是心血管事件危險(xiǎn)最強(qiáng)有力的預(yù)測(cè)因子之一，主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生多生物活性的細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)急性期炎性反應(yīng)的產(chǎn)生，促進(jìn)多種免疫細(xì)胞的分化及活化，在炎癥反應(yīng)過(guò)程中扮演重要角色。在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中，IFN-γ起促進(jìn)作用，而IL-18作為IFN-γ的誘導(dǎo)因子可誘導(dǎo)IFN-γ的產(chǎn)生，在增強(qiáng)局部炎癥反應(yīng)以及血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)相關(guān)分子過(guò)程中，IL-18起到了促進(jìn)作用。血管粥樣硬化斑塊中IL-18的表達(dá)使得中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞趨化、活化至炎癥部位，活化的炎癥細(xì)胞繼而進(jìn)一步大量表達(dá)IL-18，進(jìn)一步加重?fù)p傷部位的炎癥反應(yīng)，形成一個(gè)正反饋過(guò)程。在本研究顯示CHD組各分組比較中，IL-18含量為AMl組＞UAP組＞SAP組，各組間水平有顯著性差異(P＜0.05)；在單支、雙支及三支病變組間，IL-18水平呈逐漸增高的趨勢(shì)，顯示IL-18水平與CHD的冠脈病變程度顯著正相關(guān)。該結(jié)果與國(guó)外研究一致[6]。這可與血漿IL-18水平升高導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊破裂，繼而促進(jìn)急性冠狀動(dòng)脈綜合征的進(jìn)一步加劇有關(guān)。

本研究表明，與對(duì)照組比較，CHD患者HMGBl、IL-18水平明顯升高，提示HMGBl、IL-18都可以通過(guò)炎癥反應(yīng)促進(jìn)AS的發(fā)生、發(fā)展，與CHD的進(jìn)展程度呈正相關(guān)。HMGBl、IL-18水平變化佐證冠心病的發(fā)生和發(fā)展中炎癥反應(yīng)在起著重要作用，血漿HMGBl、IL-18水平檢測(cè)可作為冠心病病程變化的參考指標(biāo)，為冠心病的治療開(kāi)辟了一條新的途徑。

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Changes of high mobility group protein B1 and interleukin-18 levels in plasma of patients with coronary heart disease

XU Guoxin,YANG Fengying,CHEN Yugang.Department of Clinical Laboratory,the fourth People's Hospital of Wuxi City, Jiangsu Wuxi 214062,China.

Objective To research the clinical significance of changes of high mobility group B1(HMGBl)and interleukin-18 levels in plasma of patients with coronary heart disease(CHD),and provide reference for the diagnosis and treatment of CHD. Methods One hundred and two cases of CHD were diagnosed in our hospital,and the control group were 52 healthy people.5ml morning fasting venous blood was collected in EDTA-Na2anticoagulant tube,and then centrifuged for 15 minutes with 3000 r/min, and last detected the levels of HMGBl and IL-18 by ELISA method.Results The levels of HMGBl and IL-18 in CHD group were significantly higher than control group(P＜0.01),and there was a positive correlation between HMGBl,IL-18 levels and the severity of coronary artery disease(P＜0.05).Conclusion The changes of HMGBl and IL-18 levels confirm that inflammatory reaction plays an important role in the occurrence and development of CHD.The plasma levels of HMGBl and IL-18 may be regarded as markers of CHD progression.

Coronary heart disease；High mobility group protein B1；Interleukin-18

R541.4

A

1674-1129(2013)06-0524-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.06.004

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30871193,81001319)

許國(guó)新，男，1973年1月出生，江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院學(xué)士主管技師臨床檢驗(yàn)專業(yè)研究方向：免疫、臨床生化。