王繼貴

(中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南長(zhǎng)沙410011)

·述評(píng)·

卵巢癌生物標(biāo)志物研究的現(xiàn)代進(jìn)展

王繼貴

(中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南長(zhǎng)沙410011)

卵巢癌是婦女中最普通的一種惡性腫瘤。由于卵巢癌臨床癥狀含糊不清，大多數(shù)病人是在晚期階段診斷出的。本文概述了用血清生物標(biāo)志物對(duì)卵巢癌早期診斷及疾病進(jìn)程監(jiān)測(cè)的當(dāng)前進(jìn)展。

卵巢癌；生物標(biāo)志物；檢測(cè)

卵巢癌(Ovarian cancer,OC)的診斷主要基于臨床癥狀、影像學(xué)及實(shí)驗(yàn)室生物標(biāo)志物的檢查?？偟膩?lái)說(shuō)，已鑒別出200多種潛在的生物標(biāo)志物，在OC時(shí)有不同的表達(dá)[1]。然而，已發(fā)現(xiàn)沒(méi)有單一的生物標(biāo)志物對(duì)于OC的診斷是滿(mǎn)意的，當(dāng)多種生物標(biāo)志物聯(lián)合使用時(shí)，對(duì)OC的診斷可增加敏感度和特異性。由于OC病人臨床癥狀是難以捉摸和非特異的，大多數(shù)病人是在疾病的晚期階段診斷出的，此時(shí)其5年生存率僅30%[2]。因此，早期診斷OC將顯著改善病人的預(yù)后。本文將概述用血清生物標(biāo)志物對(duì)OC的早期診斷及疾病進(jìn)程監(jiān)測(cè)的當(dāng)前進(jìn)展。

1 OC的分類(lèi)

大多數(shù)OC是由三個(gè)生物類(lèi)別的細(xì)胞發(fā)展而來(lái)；上皮細(xì)胞、性索基質(zhì)細(xì)胞和生殖細(xì)胞。它們之中，上皮細(xì)胞癌占OC的90%。上皮細(xì)胞OC又被分成5個(gè)亞型：(1)漿液型，約占50%左右；(2)黏液型，約占5%～10%；(3)子宮內(nèi)膜樣型，約占10%～25%；(4)透明細(xì)胞型，約占4%～5%；(5)變遷型，罕見(jiàn)[3]。因?yàn)镺C細(xì)胞有各種各樣的組織型，可以表達(dá)不同的腫瘤標(biāo)志物，重要的是用多種腫瘤標(biāo)志物可以檢測(cè)所有的OC。

2 卵巢癌的生物標(biāo)志物

過(guò)去20年，用先進(jìn)的技術(shù)，物別是質(zhì)譜法，發(fā)現(xiàn)了大量的血清生物標(biāo)志物同OC有關(guān)[1]。Cramer等[4]在多種癌癥病人中，研究了OC生物標(biāo)志物的過(guò)篩特性，發(fā)現(xiàn)了一些有希望的標(biāo)志物。

2.1 糖鏈抗原125糖鏈抗原125(Carbohydrate antigen 125,CA125)在1981年由Bast等人發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)時(shí)他們用漿液性O(shè)C細(xì)胞株免疫鼠，產(chǎn)生了鼠單克隆抗體(OC125)。隨后的研究顯示：用參考界值35U/ml作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)在80%漿液型OC的CA125增加、黏液型有69%、子宮內(nèi)膜樣型有75%、透明細(xì)胞型有78%、未分化型OC有88%。良性卵巢疾病病人有2.2%～27.8%CA125升高，在健康婦女中也發(fā)現(xiàn)有0.2%～5.9%人群CA125升高。CA125升高在Ⅰ期OC病人中有50%、Ⅱ期有90%，Ⅲ和Ⅳ期OC病人則＞90%。然而，在其他癌時(shí)，如子宮內(nèi)膜癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌及其他胃腸道癌，CA125水平也增加。

由于CA125的特異性有限，目前尚未用作常規(guī)診斷試驗(yàn)，但是用于監(jiān)測(cè)治療反應(yīng)及檢測(cè)疾病復(fù)發(fā)，它還是有用的[5]。最近，測(cè)定CA125被認(rèn)為是對(duì)許多OC病人監(jiān)測(cè)的醫(yī)療標(biāo)準(zhǔn)，婦產(chǎn)科癌癥社會(huì)團(tuán)體(GCIG)間已達(dá)成一致意見(jiàn)，推薦CA125只能用作評(píng)價(jià)治療效果，CA125反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)被定義為：同治療前的樣本比較，若治療后CA125下降50%，或CA125濃度在治療后下降到參考范圍內(nèi)，被認(rèn)為是對(duì)治療有完全的應(yīng)答[6]。

Prat等[7]評(píng)價(jià)了CA125最低值在參考范圍(＜35U/ml)時(shí)的預(yù)后作用，繼最初治療之后，發(fā)現(xiàn)CA125水平絕對(duì)值增加≥5U/ml(同它的最低值比較)，是OC復(fù)發(fā)的一個(gè)強(qiáng)烈預(yù)測(cè)指征。這個(gè)新的CA125預(yù)測(cè)進(jìn)展的標(biāo)準(zhǔn)，得到的敏感度為90%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為96.4%，假陽(yáng)性率為5.6%。這些研究證實(shí)適當(dāng)應(yīng)用CA125，可以幫助癌癥專(zhuān)家檢測(cè)OC的早期復(fù)發(fā)。

2.2 人附睪蛋白4人附睪蛋白4(Human epididymis 4,HE4)是一種低分子量的糖蛋白，一種人附睪蛋白的前身，且是穩(wěn)定的4-二硫化物家族的一個(gè)成員。HE4主要在正常婦女生殖組織上皮細(xì)胞中表達(dá)，在嚴(yán)重OC病人中過(guò)表達(dá)者為93%，子宮內(nèi)膜樣癌為100%，透明細(xì)胞癌中為50%，但是

在黏液型或OC的生殖細(xì)胞中不表達(dá)[8]。Escudero等[9]在127例OC病人、292例良性婦科疾病病人及101例健康對(duì)照中研究了HE4和CA125的表達(dá)。以CA125界值35U/ml，HE4界值140nmol/ml作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示：在健康人，HE4結(jié)果異常者有1.1%，CA125有9.9%；在良性婦科疾病的病人中，HE4異常者有12.3%，CA125有37%，HE4增加的良性婦科疾病病中，腎衰竭是最普通的原因，與其他良性婦科病人比較，有顯著差別(P= 0.001)。在OC同婦科良性疾病的鑒別診斷中，HE4的ROC曲線下面積比CA125顯著增加(0.874比0.722)，因此認(rèn)為HE4對(duì)OC的診斷特異性比CA125顯著高一些，而聯(lián)合檢測(cè)HE4和CA125，可顯著改善所有階段及組織型OC的診斷效率，由Anastasi等[10]的一份研究顯示，在OC復(fù)發(fā)的病人中，在CA125之前5～8個(gè)月，HE4已增加，表明HE4對(duì)于監(jiān)測(cè)OC復(fù)發(fā)可能是一個(gè)較好的新的早期標(biāo)志物。

2.3 巢蛋白-2巢蛋白-2(Nidogen-2)是一種基底膜蛋白質(zhì)，在基底膜成份中，巢蛋白家族有兩個(gè)已知的基底膜蛋白質(zhì)在細(xì)胞外基質(zhì)中有重要的作用。在人類(lèi)，已經(jīng)鑒定出兩種巢蛋白，巢蛋白-1(分子量150KDa)和巢蛋白-2(200KDa)，兩種蛋白質(zhì)有46%主要序列完全相同。2010年，Kuk等[11]首先報(bào)告巢蛋白-2是OC的一種新的血清生物標(biāo)志物，可用于早期診斷。研究包括100例OC病人、100例良性婦科疾病病人和100例健康對(duì)照。上述血清標(biāo)本同時(shí)用Roche商品免疫試驗(yàn)測(cè)定CA125和非競(jìng)爭(zhēng)Sandwich ELISA測(cè)定巢蛋白-2濃度。結(jié)果顯示：正常對(duì)照組和良性婦科疾病組血清巢蛋白-2濃度平均值分別為13.2mg/L和12.1mg/L，兩組之間無(wú)顯著差異。然而，OC病人組血清巢蛋白-2濃度則升高，平均值為18.6mg/L，與正常對(duì)照組或良性婦科疾病組比較有顯著差異(P＜0.001)。在所有樣本中發(fā)現(xiàn)CA125和巢蛋白-2濃度密切相關(guān)(P＜0.001)。提示血清巢蛋白-2可能是OC的一個(gè)新血清標(biāo)志物。

除了上述幾種重要的生物標(biāo)志物外，已報(bào)道的與OC有關(guān)的血清標(biāo)志物還有很多，下面摘幾種主要的(見(jiàn)表1)，它們主要同其他生物標(biāo)志物組合，聯(lián)合測(cè)定用于OC的早期篩查，可以改善OC檢測(cè)的敏感度和特異性。

表1 同OC有關(guān)的重要血清標(biāo)志物

3 多標(biāo)志物組合用于OC的診斷

由于OC標(biāo)志物的敏感度和特異性有限，當(dāng)前尚沒(méi)有單一的標(biāo)志物被FDA批準(zhǔn)用于OC的早期診斷。假陽(yáng)性結(jié)果將導(dǎo)致不必要的手術(shù)和治療，因此，過(guò)篩試驗(yàn)的特異性是極為重要的。由于單一標(biāo)志物未成功地用于OC的早期診斷，研究轉(zhuǎn)向聯(lián)合多種生物標(biāo)志物組合在一起用于OC的早期診斷。

Yurkovetsky等[2]研究了35種生物標(biāo)志物，分別組合成4標(biāo)志物的檢測(cè)板，用于檢測(cè)早期OC可增加敏感度，如一種檢測(cè)板包括CA125、HE4、CEA和VCAM-1(血管細(xì)胞黏附分子-1)。此板有較好的檢測(cè)效果，用于早期OC得到的敏感度為86%，特異性為93%；用于晚期OC特異性為98%。當(dāng)前，大量研究已表明，多標(biāo)志物平臺(tái)比單用CA125改善了診斷效力，隨后，有報(bào)告用5種和7種生物標(biāo)志物組合一種檢測(cè)板，用于篩查早期OC，現(xiàn)摘要于表2[12]。

多標(biāo)志物組合進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，提升了對(duì)數(shù)學(xué)技術(shù)的需要，它不是以單個(gè)標(biāo)志物在聯(lián)合檢測(cè)中的測(cè)定值來(lái)解釋結(jié)果，而是將測(cè)定值經(jīng)過(guò)數(shù)學(xué)處理，得來(lái)各種組合指數(shù)(Composite Index)進(jìn)行評(píng)價(jià)。Zhang等[13]在研究中設(shè)計(jì)了一種人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(Artificial neural network)模擬工具，將聯(lián)合測(cè)定中各標(biāo)志物值輸入計(jì)算出組合指數(shù)，顯著改善了Ⅰ期

上皮細(xì)胞卵巢癌病人同健康婦女的鑒別診斷難度，提高了早期OC的診斷效率。

Gorelik等[14]用Sandwich免疫試驗(yàn)和玻璃微珠技術(shù)研究了細(xì)胞因子作為新的一組腫瘤標(biāo)志物在OC診斷中的作用，共研究了24種細(xì)胞因子(包括細(xì)胞因子、化學(xué)趨化因子、生長(zhǎng)因子和血管生成因子)。發(fā)現(xiàn)IL-6、IL-8、EGF、VEGF、MCP-1和CA125六種標(biāo)志物組合的檢測(cè)板，通過(guò)LabMAP(自動(dòng)控制領(lǐng)域的一種軟件中間件)技術(shù)分析，能很好地鑒別OC和健康對(duì)照，可以代表一個(gè)有希望的手段用于OC的早期檢測(cè)。

表2 多標(biāo)志物板用于檢測(cè)OC的敏感度和特異性

4 小結(jié)

對(duì)于OC早期診斷的挑戰(zhàn)仍然存在，雖然已發(fā)現(xiàn)數(shù)百個(gè)生物標(biāo)志物同OC有關(guān)，它們對(duì)早期診斷的用途至今尚未確定。用新的技術(shù)，如質(zhì)譜法，預(yù)料將會(huì)發(fā)現(xiàn)同OC有關(guān)的另外的新的生物標(biāo)志物，這時(shí)的義務(wù)將是發(fā)展多元的試驗(yàn)，它有可能在一個(gè)單一的檢測(cè)板上同時(shí)測(cè)定多種生物標(biāo)志物。聯(lián)合使用多種生物標(biāo)志物，包括CA125、HE4及其他生物標(biāo)志物組合在一起對(duì)于OC的早期診斷、治療反應(yīng)的監(jiān)測(cè)及預(yù)測(cè)疾病的復(fù)發(fā)是今后的一個(gè)研究方向。

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R737.31,R730.43

A

1674-1129(2013)06-0515-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.06.001

王繼貴，男，1937年生，湘雅二醫(yī)院檢驗(yàn)科原主任，主任檢驗(yàn)師，研究方向?yàn)榕R床生物化學(xué)。