■ 朱國霞 孫學(xué)亮 陳成勛 郭永軍 程民杰 黃亞東

（天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室,天津 300384）

由于自然等原因造成生長停滯或負增長時，當(dāng)脅迫條件改善或消失，動物表現(xiàn)出一個快速的迸發(fā)式的生長，被稱為補償生長。充分考慮魚類的補償生長，借助一定的數(shù)學(xué)模型，在漁業(yè)資源管理上能夠更加準確診斷和預(yù)測魚類種群資源增長對食物的需求量。通過生物補償生長機制的研究，揭示生物適應(yīng)饑餓脅迫的生理生態(tài)對策，并以此采取科學(xué)的飼養(yǎng)措施，已在提高飼料轉(zhuǎn)化效率，緩解因養(yǎng)殖而產(chǎn)生的諸如環(huán)境污染等一系列問題和促進養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展等方面顯示出巨大的經(jīng)濟、社會和生態(tài)潛力，已引起養(yǎng)殖專家的廣泛關(guān)注和重視。

革胡子鯰（clarias leather）又稱埃及塘虱，原產(chǎn)于非洲的尼羅河流域。革胡子鯰具有生長速度快、產(chǎn)量高、食性雜、個體大、耐低氧、抗病力強、水質(zhì)條件要求低、生產(chǎn)周期短等優(yōu)點，是值得大力推廣的養(yǎng)殖品種。許多學(xué)者已經(jīng)完成了革胡子鯰的生物學(xué)特性、養(yǎng)殖理論、人工繁殖、營養(yǎng)需求、生長性能、血液常數(shù)值、生長激素cDNA克隆與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等研究。但在目前通過改變投喂方式來促使革胡子鯰補償生長的研究較少，本研究考察了革胡子鯰在不同間歇停喂后，其各消化器官蛋白酶、脂肪酶以及淀粉酶的變化情況。為魚類補償生長的研究提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗魚為革胡子鯰魚種，均為1年齡。試驗魚外觀正常，體質(zhì)健壯，無病害，體重(128.36±1.42)g，共180尾，分別放在藍色長方形塑料箱（70 cm×50 cm×50 cm）中，每箱20尾。暫養(yǎng)15 d，使其適應(yīng)試驗環(huán)境，減少應(yīng)激反應(yīng)。暫養(yǎng)期間水溫19～23℃。為了減少試驗期內(nèi)魚類排泄物對試驗的影響，試驗前停食1 d。在相同條件下養(yǎng)殖，待生理指標(biāo)穩(wěn)定后進行試驗。

1.2 試驗設(shè)計

試驗設(shè)3種投喂組：第1種連續(xù)投喂組，整個試驗期間不間斷，為對照組。第2種投喂3 d后饑餓1 d；第3種連續(xù)投喂7 d后饑餓1 d。3種方式分別以R0、R1/3和R1/7表示。投喂鮮雜飼料∶茨粉=6∶1。每組做3個重復(fù)。實際水體積為120 L。模擬實際養(yǎng)殖條件下?lián)Q水量，每天換水兩次，每次換水量為實際水體積的3/4，水溫保持(25±1)℃。每日投喂兩次，日投餌量為體重4%～7%。試驗時間為50 d，每天觀察并記錄魚的攝食、殘餌及死亡情況。試驗用水為前1 d曝氣后的自來水。

1.3 消化酶液制備

試驗結(jié)束時每個水族箱隨機選取5尾革胡子鯰，將其置冰盤毀髓處死，解剖分離肝臟、胃、腸道，用去離子水沖洗干凈，用剪刀剪成小塊。肝臟、胃和腸道稱重后加入9倍的生理鹽水，研磨均勻，將研磨液低溫離心(4 ℃、4 000 r/min，15 min)，制成組織勻漿液。對肝臟、前腸、中腸和后腸組織勻漿液進行消化酶活性的測定。

1.4 酶活性測定

蛋白酶活性采用福林酚試劑法測定；淀粉酶和脂肪酶活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定；總蛋白（TP）含量采用半自動化測定儀測定，方法為雙縮脲法。

1.5 數(shù)據(jù)分析

所得的原始數(shù)據(jù)用Excel 2003和SPSS11.0軟件處理。利用方差分析檢驗各組間差異，若差異顯著，采用Duncan's法作多重比較。

2 試驗結(jié)果

2.1 不同處理組對革胡子鯰蛋白酶活性的影響（見表1）

由表1可以看出，R0、R1/3和R1/7組胃、后腸和肝臟中蛋白酶活性差異不顯著(P＞0.05)，但前腸和中腸內(nèi)蛋白酶活性存在差異，其中R0組的前腸蛋白酶活性最高，R1/7組最低(P＜0.05)。中腸R1/7組蛋白酶活性最高，R1/3組最低(P＜0.05)。

表1 不同處理組對革胡子鯰蛋白酶活性的影響(U/mg蛋白)

2.2 不同處理組對革胡子鯰淀粉酶活性的影響(見表2)

由表2可以看出，R0組、R1/3組和R1/7組胃、前腸、中腸、后腸和肝臟內(nèi)淀粉酶活性差異不顯著(P＞0.05)，其中，R1/7組的前腸、中腸和后腸淀粉酶活性最高。

表2 不同處理組對革胡子鯰淀粉酶活性的影響(U/mg蛋白)

2.3 不同處理組對革胡子鯰脂肪酶活性的影響(見表3)

由表3可以看出，R0、R1/3和R1/7組對胃、前腸和肝臟脂肪酶活性影響，其中R0的脂肪酶活性在胃、前腸和肝臟中都是最高的。而R0、R1/3和R1/7組中腸、后腸中脂肪酶活性差異不顯著(P＞0.05)，其中R0中后腸脂肪酶的活性最高，R1/3的中腸脂肪酶活性最高。

表3 不同處理組對革胡子鯰脂肪酶活性的影響(U/mg蛋白)

3 討論

動物產(chǎn)生補償生長的生理機制主要有3種：①饑餓使動物代謝水平降低，但恢復(fù)進食時，較低的代謝水平能持續(xù)一段時間，這種代謝支出的降低使動物用于生長的能量增加，從而提高了食物轉(zhuǎn)化率，出現(xiàn)補償性生長；②饑餓后恢復(fù)喂食時，動物體內(nèi)將立即進行大量的合成作用，代謝水平將迅速升高，不可能通過降低代謝水平而明顯改善食物轉(zhuǎn)化率，補償生長的產(chǎn)生是動物在恢復(fù)生長中食欲增強，大幅度提高攝食水平實現(xiàn)的；③補償生長是攝食率和食物轉(zhuǎn)化率同時提高的結(jié)果。消化酶主要是消化腺和消化系統(tǒng)分泌的起消化作用的酶類。在消化酶中，依照消化對象的不同而大致劃分蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纖維素酶等幾種。消化酶的活力高低決定著對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力，從而決定其生長發(fā)育速度，同時也能反應(yīng)出水產(chǎn)動物的變化或利用飼料成分的能力。

3.1 不同處理組對革胡子鯰蛋白酶活性的影響

錢云霞對養(yǎng)殖鱸的研究發(fā)現(xiàn)，饑餓期間消化道沒有食物蠕動的機械刺激，因而蛋白酶的分泌量下降，蛋白酶的活性降低。付世建等對南方鲇幼魚進行長期饑餓后，發(fā)現(xiàn)其胃和肝臟的組織結(jié)構(gòu)變化，從而導(dǎo)致這些器官的消化酶分泌量降低。此外，Yufera等也提出了類似的推論，即長期饑餓后仔魚呈現(xiàn)出廣泛的組織學(xué)衰退，特別是消化道和附屬腺體。從本試驗結(jié)果中可以看出，各投喂組的胃、后腸和肝臟中蛋白酶差異不顯著，說明隔3 d停喂1 d和隔7 d停喂1 d與不間斷投喂對革胡子鯰胃、后腸和肝臟中蛋白酶活性的變化沒有影響。分析原因，可能是停喂時間較短，饑餓并未對其消化器官組織結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響。而在前腸內(nèi)蛋白酶活性隨著間隔天數(shù)的增加而呈現(xiàn)下降的趨勢。隔3 d停喂1 d投喂組與不間斷投喂組的中腸蛋白酶活性差異不顯著，但當(dāng)隔7 d停喂1 d時，其饑餓并沒有引起消化酶活性的下降，反而使消化酶活性高于對照組，說明短期饑餓可以一定程度上誘導(dǎo)中腸內(nèi)消化酶活性的升高，這與喬秋實等研究結(jié)果相似。

3.2 不同處理組對革胡子鯰淀粉酶活性的影響

王燕妮等通過對鯉魚饑餓與淀粉酶活性關(guān)系的探討，發(fā)現(xiàn)總的趨勢是饑餓后鯉魚的淀粉酶活性大幅上升，而恢復(fù)進食后則有所下降。樊啟學(xué)等研究結(jié)果表明，饑餓再投喂后，翹嘴鲌幼魚消化酶活性迅速升至顯著高于饑餓前水平，然后再逐步恢復(fù)正常。鄭曙明等進行了饑餓和再投喂對翹嘴鲌幼魚消化酶活性影響的研究，研究結(jié)果表明淀粉酶活性在饑餓時間較短時呈現(xiàn)下降趨勢,持續(xù)饑餓時間增加后則開始上升,恢復(fù)生長后酶活性均上升。從本次試驗結(jié)果中可以看出，各投喂組的各消化器官中淀粉酶活性差異不顯著，說明隔3 d停喂1 d和隔7 d停喂1 d與不間斷投喂對革胡子鯰胃、后腸和肝臟中淀粉酶活性的變化沒有影響。造成這種現(xiàn)象的原因，可能是當(dāng)水產(chǎn)動物饑餓時首先消耗的不是糖原，優(yōu)先動用脂肪補充能量，而本試驗饑餓時間較短，魚體并未開始出現(xiàn)由于大量消耗糖原，從而導(dǎo)致淀粉酶活性增加，糖原以轉(zhuǎn)化淀粉作為補充供能物質(zhì)的現(xiàn)象。

3.3 不同處理組對革胡子鯰脂肪酶活性的影響

Orhan等通過對海鯛魚幼魚腸道內(nèi)脂肪酶的測定，發(fā)現(xiàn)饑餓能改變腸道內(nèi)脂肪酶活性。羅海忠等發(fā)現(xiàn)，饑餓開始后鮸魚幼魚各器官中的脂肪酶活性下降；隨饑餓時間延長，脂肪酶活性出現(xiàn)上升現(xiàn)象。區(qū)又君等研究結(jié)果表明,在饑餓過程中千年笛鯛幼魚體內(nèi)脂肪酶活性下降明顯，恢復(fù)投喂后，脂肪酶活性與饑餓前相比都有所上升，脂肪酶活性總體上高于對照組水平。從本試驗結(jié)果中可以看出，各投喂組的中腸和后腸脂肪酶活性差異不顯著，說明隔3 d停喂1 d和隔7 d停喂1 d與不間斷投喂對革胡子鯰中腸和后腸脂肪酶活性的變化沒有影響。但對胃、前腸和肝臟脂肪酶活性有影響，并且胃內(nèi)脂肪酶活性隨著間隔投喂的出現(xiàn)呈現(xiàn)下降的趨勢。

4 結(jié)論

用間歇性投喂方式投喂革胡子鯰，用間歇性投喂方式投喂革胡子鯰，3種方式對革胡子鯰各消化器官消化酶有影響。隔7 d投喂1次的中腸蛋白酶活力有顯著的升高，并且腸道淀粉酶活力是最高的。綜合考慮，隔7 d停喂1次喂養(yǎng)革胡子鯰獲得的試驗效果較理想。在革胡子鯰實際養(yǎng)殖生產(chǎn)中。綜合考慮，隔7 d停喂1次喂養(yǎng)革胡子鯰獲得的試驗效果較理想。在革胡子鯰實際養(yǎng)殖生產(chǎn)中，可以隔1周停喂1次來投喂革胡子鯰，既能保證革胡子鯰消化酶的穩(wěn)定，又能起到節(jié)約飼料，提高餌料利用率，加強魚體免疫力，提高養(yǎng)殖產(chǎn)量的作用。