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水貂肉毒梭菌毒素中毒的診治

李昆朋 （山東省青州市畜牧局 262500）

2012年3月初，山東省濰坊市一水貂養(yǎng)殖場(chǎng)的水貂突然發(fā)病。該養(yǎng)殖場(chǎng)現(xiàn)共有1800只貂，其中300只為種貂。此次發(fā)病半月左右，已死亡20~30只。死亡情況與水貂的日齡及性別差異無明顯關(guān)聯(lián)性。初期，病貂有咳嗽現(xiàn)象，2~3d后開始不食，不食3~6d后出現(xiàn)死亡。從發(fā)生不食情況開始到死亡為止，病貂糞便顏色依次呈黃綠色，黃色，棕色。大多數(shù)病貂死后身體不發(fā)生僵硬。該養(yǎng)殖場(chǎng)飼喂用料為凍魚、冷凍雞腸、膨化玉米，凍魚僅用水沖洗，冷凍雞腸解凍后不清洗，并且在制成濕料后添加了少量食用保鮮劑。

此次發(fā)病后曾在濰坊市不同地區(qū)就診過2次，首次檢查確診為血蟲病及腸炎。二次檢查，經(jīng)解剖觀察診斷為腸炎。曾用大觀霉素、黃芪多糖、電解多維、磺胺甲氧嘧啶，無明顯藥效。氨芐西林鈉與地塞米松磷酸鈉合用，僅對(duì)部分病貂有一定療效，且出現(xiàn)病情反復(fù)。經(jīng)兩次診治后療效不佳，特送來進(jìn)行檢驗(yàn)。本病通過臨床癥狀、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢查，疑似水貂肉毒梭菌毒素中毒病。

1 臨床癥狀

病貂精神沉郁，不食，被毛雜亂無光澤，口腔黏膜略有蒼白，咳而不喘，糞便呈黃綠色、棕色，尿液顏色偏黃，大多病貂死后身體不發(fā)生僵硬。

2 剖檢癥狀

肺部充血水腫，局部淤血壞死；肝臟腫脹，呈土黃色；腎臟腫脹，蒼白；脾臟腫脹；膀胱內(nèi)有尿液潴留，色澤偏黃；機(jī)體各處淋巴結(jié)未見明顯的病理性變化；胃腸輕微鼓氣，未見明顯出血點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 取水貂吃剩的飼料及胃內(nèi)容物，用滅菌的緩沖液稀釋，均分為2份。一份不加任何其他處理，另一份90℃加熱30min以殺死細(xì)菌而非芽孢。待處理過的樣品冷卻至室溫后，將兩份樣品同時(shí)接種于已制備好的庖肉培養(yǎng)基，經(jīng)12h后觀察，石蠟沖起，肉渣變黑腐敗惡臭。第5d后挑取具有典型特點(diǎn)的菌落接種于卵黃瓊脂平板，進(jìn)行分離純化，35℃厭氧培養(yǎng)48h，挑取48h培養(yǎng)后的單菌落進(jìn)行涂片鏡檢，觀察并記錄菌落形態(tài)等。

3.2 生化反應(yīng) 取分離純化后的培養(yǎng)物進(jìn)行明膠穿刺培養(yǎng)，同時(shí)使用葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖、蔗糖生化管進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)，觀察并記錄試驗(yàn)結(jié)果。

3.3 動(dòng)物接種 取病死水貂胃內(nèi)容物及剩余飼料按照1：2用量加入緩沖液，無菌環(huán)境下充分研磨，室溫下放置1~2h充分浸出后，濾紙過濾，將濾液分為兩份。一份不加任何處理，作為試驗(yàn)組，另一份100℃加熱30min滅活毒素，作為對(duì)照組。

取體況相似的健康小白鼠6只，3只腹腔注射實(shí)驗(yàn)組液體0.5ml/只，3只腹腔注射對(duì)照組液體0.5ml/只。將6只小鼠置于同一適宜的環(huán)境下飼養(yǎng)，觀察并記錄試驗(yàn)結(jié)果。另取體況相似的公雞2只(體重約為2kg)，分別于左眼內(nèi)接種試驗(yàn)組液體，右眼內(nèi)接種對(duì)照組液體，用量均為0.2ml，觀察并記錄試驗(yàn)結(jié)果。

4 診斷

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果 卵黃瓊脂平板上生長(zhǎng)出的菌落具有典型的形態(tài)特點(diǎn)，其菌落及周圍培養(yǎng)基表面覆蓋著特有的虹彩樣(或珍珠層樣)薄層。挑取厭氧培養(yǎng)48h后的典型單菌落染色鏡檢，可見革蘭氏陽性大桿菌，兩端純圓，芽胞位于菌體近端呈網(wǎng)球拍狀，帶芽胞的菌體呈半透明狀，單個(gè)或成短鏈排列存在。

4.2 生化結(jié)果 細(xì)菌能沿穿刺線生長(zhǎng)，培養(yǎng)基出現(xiàn)液化，產(chǎn)氣。生化管反應(yīng)結(jié)果見表1。

4.3 接種動(dòng)物的反應(yīng) （1）小白鼠接種后2h，試驗(yàn)鼠出現(xiàn)肌肉麻痹并逐漸進(jìn)入癱瘓狀態(tài)，3只試驗(yàn)組小鼠分別于腹腔注射后4、4.5h后死亡，剖檢觀察，病變典型。（2）小公雞接種后約3h，一只左眼因麻痹呈半閉合狀，用小棒敲擊刺激仍無法睜開，右眼正常。接種后約4h另一只雞也出現(xiàn)上述癥狀，直至次日中午才恢復(fù)正常。

表1 生化管反應(yīng)結(jié)果

5 確診

綜合臨床診斷以及實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，確診這起水貂發(fā)病致死的原因?yàn)槿舛舅缶舅刂卸尽?/p>

6 防治

（1）立即停喂已變質(zhì)或疑似變質(zhì)的飼料。（2）雞腸、魚、肉在飼喂前，用0.3%KMnO4浸泡3~5min，瀝干水分后，用清水沖洗一遍。（3）在飼料中拌入一定量的解毒劑。按照1kg/50kg飼料的濃度，向飼料中拌入葡萄糖。并按照臨床使用量加入氟苯尼考、強(qiáng)力霉素。另外，添加一定量的復(fù)合VB，在飼料臨近飼喂時(shí)加入VC，不可過早加入，防止其失效。（4）及時(shí)清理、清洗絞肉設(shè)備。每次使用后，先用清水沖洗干凈，再用季銨鹽類消毒劑進(jìn)行清洗。

7 討論

水貂肉毒梭菌中毒是由于食入了含有肉毒梭菌毒素的動(dòng)物性飼料所引起的一種急性中毒病，該病以呈現(xiàn)運(yùn)動(dòng)中樞神經(jīng)麻痹及延腦麻痹為特征的癥狀，若不及時(shí)地采取治療措施，易引發(fā)患病動(dòng)物的大批死亡。

肉毒梭菌是一種能夠產(chǎn)生芽胞的革蘭氏陽性大桿菌，并能產(chǎn)生多種外毒素。肉毒梭菌的芽孢分布廣泛，動(dòng)物腸道、糞便、腐敗的尸體、變質(zhì)的飼料中都經(jīng)常含有肉毒梭菌及其芽孢。肉毒桿菌芽胞抵抗力很強(qiáng)，干熱180℃5~15min、濕熱100℃5h、高壓蒸氣121℃ 30min才能被殺死。該菌能在動(dòng)物尸體、肉類、飼料中繁殖，并能在繁殖過程中產(chǎn)生6種外毒素，毒力相當(dāng)，但抗原性不同。肉毒梭菌主要依靠其強(qiáng)烈的外毒素致病。據(jù)報(bào)道，肉毒毒素是已知最強(qiáng)烈的毒素，毒性比氰化鉀強(qiáng)104倍。其對(duì)酸的抵抗力特別強(qiáng)，胃酸溶液24h內(nèi)不能將其破壞，故可被胃腸道吸收。本病的潛伏期為4~20d，患病動(dòng)物多數(shù)突然發(fā)病，迅速死亡。

本病主要發(fā)生在氣溫較高的夏季，但并無明顯的季節(jié)性。水貂肉毒梭菌中毒的傳染源主要是被該菌污染的飼料。水貂吃了含有肉毒梭菌及其毒素的飼料就會(huì)發(fā)生中毒現(xiàn)象。然而含有毒素的飼料在外觀上并無明顯變化，不易被發(fā)現(xiàn)。這種被污染的飼料即使被存放于低溫冷庫中也不能破壞其中的毒素，后期飼喂的時(shí)候仍然會(huì)引起中毒。因此，該病發(fā)病無明顯的季節(jié)性，亦不分年齡、性別，均易感。

處理肉毒梭菌中毒病的關(guān)鍵在于預(yù)防，動(dòng)物性飼料要保證新鮮、無污染。對(duì)于冷藏的肉類及其副產(chǎn)品，在冷藏前應(yīng)保證無污染，購買回來后要快解凍、快加工，防止二次污染。

飼料加工所使用的機(jī)械設(shè)備等應(yīng)及時(shí)清洗干凈，經(jīng)常消毒。通過對(duì)飼養(yǎng)員的詢問了解到，該養(yǎng)殖場(chǎng)飼喂用料為凍魚、冷凍雞腸、膨化玉米，凍魚僅用水沖洗，冷凍雞腸解凍后不清洗，并且在制成濕料后添加了少量食用保鮮劑。首先，冷凍的魚、雞腸均未經(jīng)過徹底的清洗消毒，簡(jiǎn)單的沖洗并不能去除其中可能存在的細(xì)菌與毒素，而后又不經(jīng)過高溫煮熟直接飼喂生食，給水貂患病帶來很大隱患。其次在未確認(rèn)解凍后的雞腸、魚是否被污染時(shí)就添加了保鮮劑，保鮮劑對(duì)動(dòng)物性飼料新鮮度的維持的同時(shí)，也為可能存在的病原菌提供了良好的生存、繁殖環(huán)境，因此，在水貂飼養(yǎng)過程中，不要僅憑想象進(jìn)行操作，要考慮清楚操作的利弊。有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)可于每年定期進(jìn)行一次預(yù)防接種。倘若發(fā)生此病，應(yīng)立即停止飼喂可以飼料，對(duì)癥治療，避免造成更大的損失，有條件的可以使用對(duì)應(yīng)抗原型的抗毒素進(jìn)行肌肉注射。

（2012–07–31）

S828.92

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1007-1733(2012)11-0065-02