龔秋紅

（湖南食品藥品職業(yè)學院專業(yè)建設(shè)科，湖南 長沙 410014）

肝癌細胞多天生耐藥，常規(guī)全身給藥的化療方法療效不明顯但毒副作用大。納米制劑具有靶向、緩釋等特性，可以較好的解決這一難題[1,2]。納米制劑主動聚集于腫瘤區(qū)，使腫瘤組織處于較恒定的高濃度藥物環(huán)境中，從而更直接地殺傷癌細胞，有效地抑制種植性腫瘤的生長；由于藥物在短時間內(nèi)主動富集于腫瘤部位，而非隨機彌散于全身，有望通過延緩藥物釋放速度，減慢其轉(zhuǎn)化為代謝物，從而減輕其毒性作用[3]。喜樹堿（CPT）是拓撲異構(gòu)酶I（TOPO-I）抑制劑，羥喜樹堿（HCPT）是從喜樹堿基苯環(huán)A環(huán)中的10位-H由-OH取代合成，是從我國特有的珙桐科植物中提取的具有抗腫瘤活性的生物堿[4,5]。

1 資料與方法

1.1 材料

選用已建立原位肝腫瘤模型小鼠50只及異位種植瘤模型小鼠20只，雌雄兼用，10～12周齡，體質(zhì)量24～34g，小鼠的一般情況（周齡，體質(zhì)量，雌雄，生活習性等）均無明顯差異，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 取原位肝癌模型小鼠20只，隨機分成HCPT納米組和HCPT粉針組，每組10只，分別尾靜脈注射納米羥喜樹堿和羥喜樹堿粉針劑，給藥劑量5mg/kg。給藥后15min處死，分別測定小鼠血液、肝組織、肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度。另取原位肝癌模型小鼠30只，隨機分成HCPT納米組、HCPT粉針組和空白對照組3組，每組10只，分別尾靜脈注射納米羥喜樹堿、粉針劑羥喜樹堿、生理鹽水。給藥劑量5mg/kg，每周第1和第4天給藥，給藥2周后分別測定小鼠血液、肝組織、肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度。篩選20只生長良好，采用肝癌細胞（腫瘤直徑約0.5 cm）異位（右側(cè)肩胛部皮下）接種法制備的小鼠。隨機分為4組，給藥劑量5mg/kg，實驗組給予HCTP納米制劑；裸藥陽性對照組給予HCTP凍干粉針；納米載體組給予等量納米微球；空白對照組給予等量的生理鹽水。每周第1和第4天給藥，共給藥2周。于首次給藥后15d處死動物，稱體質(zhì)量，解剖剝離瘤塊，稱瘤重。

1.2.2 統(tǒng)計學方法

實驗數(shù)據(jù)均以SPSSI3.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。計量資料數(shù)值用±s表示。采用2組獨立樣本t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

見表1～表3。

3 討 論

原發(fā)性肝癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其中肝細胞癌占90%。我國是肝癌大國，也是全球肝癌發(fā)病率最高的國家，目前我國肝癌發(fā)病人數(shù)占全球的55%[6]，嚴重威脅我國人民健康。臨床上常用的抗肝癌藥物，其中絕大多數(shù)水溶性差，心臟毒性和骨髓抑制等副作用較明顯。因此，尋求一種具有靶向治療作用的制劑勢在必行。

納米制劑進入血液循環(huán)后，易與血漿蛋白、糖蛋白等結(jié)合，形成大分子物質(zhì)，并被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)尤其是肝臟的庫普弗細胞所吞噬，增加肝臟藥物質(zhì)量濃度，從而達到靶向治療的效果[7]。同時，由于腫瘤組織血運豐富，細胞吞噬能力強，納米制劑的靶向作用使其更容易識別腫瘤細胞，納米制劑在腫瘤組織中保持較高的藥物質(zhì)量濃度，由于其同時具有控釋特性，其控釋模式開始表現(xiàn)為相對的爆發(fā)釋放，在其后相當一段時間內(nèi)以較恒定的速度釋放[8]。藥物半衰期的延長，有利于提高作用于細胞周期S期的藥物療效，延長體內(nèi)循環(huán)時間，產(chǎn)生特定肝腫瘤靶向作用[9]。而且，納米制劑在保證藥物作用的前提下，可減少給藥劑量，加之具有靶向輸送功能，因此有可能達到減輕或避免全身毒副反應(yīng)的目的。

表1 尾靜脈注射2種劑型HCPT 15min后，小鼠血漿、肝臟組織及肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度（μg/L，±s，n=10）

表1 尾靜脈注射2種劑型HCPT 15min后，小鼠血漿、肝臟組織及肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度（μg/L，±s，n=10）

注：與粉針組比較，P＜0.05

組別 血漿藥物質(zhì)量濃度 肝組織藥物質(zhì)量濃度 肝腫瘤藥物質(zhì)量濃度HCTP凍干粉針組 373.25±15.32 251.34±11.21 291.35±21.50 HCTP納米制劑組 623.32±21.12 3125.31±44.21 3312.41±22.40

表2 尾靜脈注射2種劑型HCPT 2周后，小鼠血漿、肝臟組織及肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度（μg/L，±s，n=10）

表2 尾靜脈注射2種劑型HCPT 2周后，小鼠血漿、肝臟組織及肝腫瘤中藥物質(zhì)量濃度（μg/L，±s，n=10）

注：與粉針組比較，P＜0.05

組別 血漿藥物質(zhì)量濃度 肝組織藥物質(zhì)量濃度 肝腫瘤藥物質(zhì)量濃度HCTP凍干粉針組 1.05±0.08 2.73±0.53 2.82±1.02 HCTP納米制劑組 2.13±0.51 89.54±16.35 93.85±18.91

表3 體內(nèi)腫瘤抑制實驗結(jié)果：各組腫瘤的重量

納米技術(shù)是近年來迅速發(fā)展起來的前沿科技領(lǐng)域，其在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展必將引起醫(yī)療的革命。目前，納米醫(yī)藥技術(shù)的基礎(chǔ)理論及納米制劑的制備工藝尚處在體外細胞培養(yǎng)及動物實驗階段，因此對于納米技術(shù)在治療肝癌的研究還需做大量的工作。但是，納米醫(yī)藥技術(shù)在抗肝癌研究領(lǐng)域中所展現(xiàn)出的優(yōu)越性預示著它在臨床治療肝癌中具有廣泛的和十分誘人的前景。

[1]吳孟超,沈鋒.肝癌研究的進展[J].中華實驗外科雜志,1999,6(4):481-482.

[2]秦仁義,裘法祖.納米生物技術(shù)在實驗外科的應(yīng)用前景[J].中華實驗外科雜志,2003,20(9):773-775.

[3]Asif M,Arayne MS,Sultana N,et al. Fabrication Dfnanoparticles within polymeric pores for controlled release of drug[J].Pak J Pharm Sci,2006,19(1):73-84.

[4]沈潔,王青松,許向陽,等.喜樹堿類衍生物脂質(zhì)體的研究進展[J].中國藥科大學學報,2007,38(4):380-384.

[5]方歡樂,陳衍斌.抗腫瘤藥物羥喜樹堿研究進展[J].陜西中醫(yī)學院學報,2006,29(4):11-14.

[6]Parkin DM,Bray F,Ferlay J,et a1.Estimating the wofl cancer burden:globocan2000[J].Int J Cancer,2001,94(2):153-156.

[7]潘宏.羥喜樹堿國內(nèi)臨床應(yīng)用分析[J].中國藥師,2009,12(7):967-969.

[8]Soma CE,Dubernet C,Bentolila D,et al.Reversion of multidrug resistance by co-encapsulation of doxorubicin and cyclosporine A in polyalkylcyanoacrylate nanoparticles[J].Biomaterials,2000,21(1):1-7.

[9]Beretta GI,Zunino F.Relevance of extracellular and intracellular interactions of camptothecins as determinants of antitumoractivity[J].Biochem Pharmacol,2007,74(10):1437-1444.