天津渤海職業(yè)技術(shù)學(xué)院（300408）楊靜

天津市南開醫(yī)院（300100）喬曉莉Δ

健心片主要由丹參、麥冬、黨參、黃芪等組成，具有活血化瘀，扶正固本的功效，適用于冠心病、心肌梗塞等心臟疾病。為了有效控制該制劑質(zhì)量，采用RPHPLC法，測定方中君藥丹參的主要成分原兒茶醛的含量，建立了可靠準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與材料

LC-10A型高效液相色譜儀，島津SPD-10A紫外檢測器， AUTO SCIENCE A T-3 3 0 柱溫箱，A G T C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；KQ3200超聲波清洗器（昆山市超聲波儀器廠）；甲醇（色譜純，天津大學(xué)科威公司），冰醋酸（分析純，天津大學(xué)科威公司），水為娃哈哈飲用純凈水。原兒茶醛對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110810-200506）；健心片為天津市南開醫(yī)院院用制劑（批號：20110607，20110609，20110720）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：AGT C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相∶甲醇-0.1%醋酸（12∶88）；檢測波長：278nm；流速：1.0mL／min；柱溫：35℃； 理論板數(shù)按原兒茶醛峰計(jì)算不低于3000。

2.2 樣品的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取原兒茶醛對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.02304mg的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品適量，研細(xì)，取2g，精密稱定，置于有塞錐形瓶中，精密加入含0.5%鹽酸的50%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理60min，放冷，再稱定重量，用含0.5%鹽酸的50%甲醇50ml補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按處方去除丹參的各味藥材，煎煮，制成陰性樣品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法，制得陰性樣品溶液，描記色譜圖。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取一定量對照品溶液，用甲醇稀釋并定容，得到濃度為0.0384，0.1152，0.2304，0.3072，0.3840mg/mL的對照品溶液的系列溶液。將上述溶液按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，以原兒茶醛峰面積值(Y)對其相應(yīng)濃度(X)做線性回歸，得到原兒茶醛的回歸方程：Y=2.32×105X+5.07×101，r＝0.9991，表明原兒茶醛在0.0384～0.3840μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗(yàn) 取同一濃度原兒茶醛對照品溶液(0.2304mg/mL)，按2.1項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積值，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.96%。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品（20110607），精密稱取5份，按2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.97%，表明本法重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，分別于0、3、9、14、17h按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.87%，表明樣品在17h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

附表1 回收率試驗(yàn)

附表2 樣品含量測定 (n=3)

2.7 回收率試驗(yàn) 取 同 一 批 號 樣 品（20110607），研細(xì)，取1g，共6份，精密稱定，置有塞錐形瓶中，分別加入含原兒茶醛0.0024mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液50ml（此標(biāo)準(zhǔn)品溶液以含0.5%鹽酸的50%甲醇作為溶劑），稱定重量，超聲處理60min，放冷，再稱定重量，用含0.5%鹽酸的50%甲醇50ml補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，制得供回收率用供試品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算回收率，見附表1。

2.8 樣品測定 按上述方法，測定3批健心片中原兒茶醛的含量并隨行對照品，結(jié)果見附表2。

3 討論

供試品制備過程中，對鹽酸的濃度、提取方法和提取時間三個因素，在二個水平下，采用L4（23）正交試驗(yàn)進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用含0.5%鹽酸的50%甲醇溶液，超聲處理60min后，得到的原兒茶醛的含量最高，因此，選用含0.5%鹽酸的50%甲醇溶液，超聲處理60min，作為實(shí)驗(yàn)條件。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)的報道[1][2[3]，對流動相進(jìn)行了選擇，最終確定流動相為甲醇-0.1%醋酸（12∶88）時，峰形良好，同時可達(dá)到完全分離且保留時間較短。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，該方法重復(fù)性好，操作簡便，可用于健心片中原兒茶醛的含量測定，為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了參考依據(jù)。