丁文強(qiáng) 賈 剛 王康寧

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所，雅安 625014)

自50年代開(kāi)始將抗生素作為豬的促生長(zhǎng)劑以來(lái)，其弊端日益受到關(guān)注，益生素、某些多糖及中草藥作為替代品以成為研究的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，添加銀耳孢子發(fā)酵物(Tremella fuciformis Berk spore fermentation，TSF)后，在豬 20 kg以前其促生長(zhǎng)效果與抗生素相當(dāng)，此后其效果顯著高于抗生素，且能改善腸道菌群，提高血清胰島素樣生長(zhǎng)因子－Ⅰ(IGF－Ⅰ)和免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白 M(IgM)的含量，并對(duì)肉質(zhì)有改善的作用［1－3］;益生素對(duì)仔豬也具有顯著的促生長(zhǎng)效果，但在肥育后期作用效果不一致［4－6］。TSF與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬各階段生長(zhǎng)及胴體品質(zhì)的影響有無(wú)差異還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)以抗生素作為對(duì)照，比較研究TSF與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬各個(gè)階段生長(zhǎng)性能、腸道菌群、血液生化指標(biāo)及肉品質(zhì)的影響，為T(mén)SF的推廣應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和試驗(yàn)動(dòng)物

本試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將24頭日齡相近，平均體重為(10.35±0.28)kg的“杜×太”雜交仔豬(公母各占1/2，全部去勢(shì))按照體重相近原則，隨機(jī)分配到4個(gè)組，每個(gè)組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，4個(gè)組分別為對(duì)照組(飼喂基礎(chǔ)飼糧)、抗生素組(在基礎(chǔ)飼糧中添加0.15 g/kg土霉素+1.5 g/kg硫酸抗敵素)、TSF組(在基礎(chǔ)飼糧中添加4 g/kg TSF)和益生素組(在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2 g/kg益生素)。試豬從10 kg飼喂到110 kg。

1.2 試驗(yàn)材料

TSF由四川禾本生物工程有限公司提供，其多糖含量為56.7%，是采用銀耳孢子深層液體發(fā)酵，經(jīng)干燥所獲得的干粉末，每克粉末由5 mL發(fā)酵液與載體干燥而成，每毫升發(fā)酵液含銀耳孢子5億個(gè)。益生素制劑選用芽孢桿菌，由山東六和生物科技有限公司研制，有效活菌含量≥2.0×1010CFU/g。

1.3 基礎(chǔ)飼糧與飼養(yǎng)管理

基礎(chǔ)飼糧參照中國(guó)肉脂型生長(zhǎng)肥育豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004)分階段配制成粉料，各階段基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行，所有試豬均單籠飼養(yǎng)，并自由采食和飲水。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)開(kāi)始后每2周的第1天早上空腹稱重1次，并準(zhǔn)確記錄各籠試驗(yàn)豬的喂料量與余料量，計(jì)算每頭豬每階段及全期的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G)。

1.4.2 血液指標(biāo)

在試豬平均體重達(dá)到20和110 kg時(shí)，每個(gè)組選取體重接近的4頭豬，前腔靜脈采血20 mL，靜置30 min后離心制成血清備用。采用免疫透射比濁法檢測(cè)血清中IgG、IgM、免疫球蛋白A(IgA)含量;采用ELISA試劑盒(美國(guó)GBD公司)檢測(cè)血清中IGF－Ⅰ含量。

1.4.3 胴體性狀及肉品質(zhì)

在各組試豬平均體重達(dá)110 kg時(shí)空腹稱重，從每個(gè)組中選取體重接近的4頭豬進(jìn)行屠宰，測(cè)定如下指標(biāo):屠宰率、眼肌面積、肌內(nèi)脂肪，其中肌內(nèi)脂肪采用索氏抽提法測(cè)定;滴水損失、剪切力測(cè)定方法參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 821—2004《豬肌肉品質(zhì)測(cè)定技術(shù)規(guī)范》［7］;pH 用酸度儀(丹麥 SFK pH－STAR)測(cè)定;肉色的亮度(L*)、紅度(a*)、黃度(b*)值用色差計(jì)(日本MINOLTA CR－300)測(cè)定。

1.4.4 腸道菌群

屠宰后無(wú)菌收集盲腸內(nèi)容物，送微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，其中大腸桿菌選用麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，乳酸桿菌選用MRS培養(yǎng)基，雙歧桿菌選用添加1%莫匹羅星鋰鹽的MRS培養(yǎng)基，培養(yǎng)后采用平板菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬生長(zhǎng)性能的影響

從表2可以看出，在10～20 kg階段，TSF組、益生素組和抗生素組的ADG、ADFI和F/G無(wú)顯著差異(P＞0.05)，但ADG和ADFI均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。21～50 kg階段，TSF組的ADG和ADFI較益生素組和抗生素組有所提高，但差異不顯著(P＞0.05)。51～110 kg階段，TSF組ADG顯著高于益生素組(P＜0.05)，益生素組則顯著高于抗生素組和對(duì)照組(P＜0.05)，后2組間無(wú)顯著差異(P＞0.05);ADFI基本類(lèi)似。從全期來(lái)看，ADG和ADFI變化與51～110 kg階段一致。在F/G方面，各階段及各組之間均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，只TSF組略低。從全期來(lái)看，生長(zhǎng)性能最優(yōu)的是TSF組，其次是益生素組，抗生素組又優(yōu)于對(duì)照組。

2.2 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ含量的影響

從表3可以看出，在20 kg時(shí)，TSF組與益生素組血清IGF－Ⅰ含量顯著高于抗生素組和對(duì)照組(P＜0.05)，益生素組與TSF組相當(dāng)，差異不顯著(P＞0.05)。110 kg時(shí)，TSF組的 IGF－Ⅰ含量顯著高于其他3組(P＜0.05)，益生素組則顯著高于抗生素組和對(duì)照組(P＜0.05)，而抗生素組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air－dry basis) %

表2 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of TSF and probiotic on growth performance of growing－finishing pigs

表3 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ含量的影響Table 3 Effects of TSF and probiotic on serum IGF－Ⅰ content of growing－finishing pigs ng/mL

2.3 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬免疫功能的影響

從表4可以看出，在20和110 kg時(shí)，各組間血清IgA含量變化不大(P＞0.05)。在20 kg時(shí)，TSF組和益生素組血清中的IgG和IgM的含量顯著高于抗生素組和對(duì)照組(P＜0.05)，而抗生素組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。在110 kg時(shí)，TSF組的IgG含量顯著高于益生素組(P＜0.05)，而益生素組和抗生素組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);TSF組和益生素組的IgM含量較抗生素組和對(duì)照組也有顯著提高(P＜0.05)，但前2組間和后2組間均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

2.4 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬腸道菌群的影響

從表5可以看出，TSF組、益生素組和抗生素組較之對(duì)照組均能一定程度抑制空腸、回腸、盲腸中的大腸桿菌的增殖，抗生素組達(dá)到顯著水平(P＜0.05)，相對(duì)TSF組和益生素組效果更佳。TSF組和益生素組較之抗生素組能顯著提高空腸、回腸、盲腸中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量(P＜0.05)，而TSF組與益生素組之間則無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

2.5 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬胴體性狀和肉品質(zhì)的影響

從表6可以看出，TSF組的眼肌面積顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，略高于益生素組和抗生素組，但差異不顯著(P＞0.05);肌內(nèi)脂肪含量較之益生素組和抗生素組有提高的趨勢(shì)。滴水損失，TSF組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，也低于益生素組和抗生素組，但差異不顯著(P＞0.05);剪切力變化的規(guī)律與滴水損失基本類(lèi)似。在屠宰率方面，TSF組較之益生素組與對(duì)照組有提高的趨勢(shì)。TSF組的45 min和24 h肌肉pH和紅度值較其他3組有提高的趨勢(shì)，黃度和亮度值有降低的趨勢(shì)，其中黃度值顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。

表4 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬免疫功能的影響Table 4 Effects of TSF and probiotic on immune function of growing－finishing pigs g/L

表5 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬腸道菌群的影響Table 5 Effects of TSF and probiotic on intestinal flora of growing－finishing pigs lg(CFU/g)

3 討論

3.1 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)在生長(zhǎng)肥育豬10～20 kg階段，TSF的促生長(zhǎng)效果與益生素和抗生素相當(dāng)，但TSF組的ADG 還稍低，這與文敏等［1］、吳玉玲［2］、傅祖良等［3］的試驗(yàn)結(jié)果類(lèi)似;而在21～50 kg階段，TSF組ADG相比益生素組和抗生素組提高了6.7%和4.8%;50 kg以后，TSF組則顯著高于益生素組、抗生素組和對(duì)照組，分別提高了3.7%、10.0%和10.3%，說(shuō)明TSF要發(fā)揮作用的確存在一個(gè)適應(yīng)過(guò)程。文敏等［1］、吳玉玲［2］和傅祖良等［3］的研究表明，此適應(yīng)期為1～2周。在20 kg以前，益生素和抗生素抑制大腸桿菌，促進(jìn)乳酸桿菌等有益微生物的效果較TSF來(lái)得快，可能是其原因。血清IGF－Ⅰ含量的變化規(guī)律也與ADG相吻合，與文敏等［1］試驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明TSF和益生素促生長(zhǎng)的效果與其能刺激機(jī)體分泌IGF－Ⅰ有關(guān)。在10～110 kg整個(gè)階段，TSF組較益生素組ADG提高了4.2%，結(jié)合機(jī)體免疫功能和腸道菌群的變化情況，表明TSF促生長(zhǎng)的效果較益生素更好。

表6 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬胴體性狀和肉品質(zhì)的影響Table 6 Effects of TSF and probiotic on carcass traits and meat quality of growing－finishing pigs

3.2 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬免疫功能的影響

機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)，顯然有利于提高動(dòng)物對(duì)疾病的抵抗能力和生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)從20 kg到110 kg體重，TSF組的免疫指標(biāo)呈上升趨勢(shì)，并逐漸超過(guò)益生素組，與文敏等［1］的試驗(yàn)結(jié)果一致。在110 kg時(shí)，TSF組血清中的IgG含量顯著高于其他各組，說(shuō)明TSF在生長(zhǎng)肥育后期的效果更為明顯，有可能超過(guò)益生素。鄒建［8］、吳玉玲［2］和文敏等［1］的試驗(yàn)結(jié)果也表明，TSF能提高機(jī)體的體液免疫功能，并顯著優(yōu)于抗生素組和對(duì)照組。TSF提高機(jī)體的體液免疫功能的原因，從對(duì)腸道菌群的改善看，可能有類(lèi)似益生素之處。有研究表明，益生素改善動(dòng)物體的內(nèi)環(huán)境，有益于益生菌群的生長(zhǎng)，從而提高益生菌的代謝產(chǎn)物如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧物酶(GSH－Px)等，增強(qiáng)機(jī)體的生理機(jī)能，提高免疫水平［9］。

3.3 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬腸道菌群的影響

禹慧明等［10］研究報(bào)道，腸道中有害菌群的過(guò)度繁殖，與小腸下端養(yǎng)分過(guò)剩有關(guān)，有害菌的大量繁殖，產(chǎn)生更多的毒素。TSF與益生素一樣，都能改善豬的腸道菌群，降低大腸桿菌的數(shù)量，提高乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量，顯然有利于動(dòng)物的生長(zhǎng)，與 Muralidhara等［11］、毛倩等［12］的研究結(jié)果一致。TSF中所含的銀耳多糖是一種甘露聚糖，Kakuta 等［13］、Quigley［14］、Flickinger 等［15］研 究 證實(shí)這類(lèi)寡糖不能被單胃動(dòng)物的消化道酶所分解，從而進(jìn)入腸道后段，為乳酸桿菌、雙歧桿菌等選擇性利用，從而使這類(lèi)有益菌得到增殖。而抗生素不但抑制大腸桿菌生長(zhǎng)，也使乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量變低，與易力等［16］的研究結(jié)果一致。這也是TSF組和益生素組在育肥后期較之抗生素組仍有較高平均日增重的又一原因。

3.4 銀耳孢子發(fā)酵物與益生素對(duì)生長(zhǎng)肥育豬胴體性狀及肉品質(zhì)的影響

從表6所列指標(biāo)可見(jiàn)，TSF較之益生素和抗生素有改善胴體性狀和肉品質(zhì)的作用，盡管某些指標(biāo)較之益生素未達(dá)顯著水準(zhǔn)，但升高或降低的趨勢(shì)是明顯的，特別是肌內(nèi)脂肪含量、滴水損失、剪切力和黃度值改進(jìn)較明顯。文敏等［1］的試驗(yàn)也表明，TSF組較之抗生素組和對(duì)照組可顯著提高胴體屠宰率和降低滴水損失，較對(duì)照組可顯著提高眼肌面積，對(duì)肉色也有一定程度的改善，從而提高肌肉的嫩度，改善其適口性。而益生素組較之抗生素組與對(duì)照組在改善豬肉pH、肉色、肌內(nèi)脂肪含量方面則無(wú)太大差異，與文敏等［1］和毛倩［17］的試驗(yàn)結(jié)果一致。說(shuō)明TSF的確能改善胴體性狀和肉品質(zhì)，效果也優(yōu)于益生素。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下:

① 在10～20 kg階段，TSF促生長(zhǎng)的效果與益生素和抗生素相當(dāng);在21～50 kg階段，TSF與益生素相當(dāng)，但明顯優(yōu)于抗生素;在50 kg以后，TSF優(yōu)于益生素，而益生素優(yōu)于抗生素，抗生素則無(wú)促生長(zhǎng)的效果。

②TSF較之抗生素和益生素可改進(jìn)豬肉品質(zhì)，提高肌內(nèi)脂肪含量和屠宰率，降低滴水損失和剪切力。

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