薛俊龍，張偉業(yè)，張國權(quán)，王國艷，劉一飛，劉 源，薛逸緋

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原 030032；2.山西大同大學(xué)，山西大同 037009）

1 概述

新城疫（ND）是禽類的一種高接觸性、烈性傳染病，給許多國家的養(yǎng)禽業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。疫苗接種是防治該病的重要措施之一，但近年來，ND并未得到有效控制，新城疫的迅速蔓延，使疫苗免疫接種成為必然的選擇。而呼吸道局部免疫只有直接接觸外界抗原才能引起免疫應(yīng)答，循環(huán)抗體則不能運(yùn)轉(zhuǎn)到氣管、支氣管、肺等部位，利用這一原理對控制新城疫有重要意義，在生產(chǎn)實(shí)踐中證明應(yīng)用弱毒苗滴鼻、點(diǎn)眼、氣霧免疫能刺激黏膜免疫，使呼吸道、消化道黏膜有效抵抗外界新城疫病毒的侵襲。但是局部免疫對整體循環(huán)抗體的影響尚不明確。本研究通過局部接種兩種新城疫活疫苗測定其ND抗體水平用以判定對血液循環(huán)抗體滴度的影響。

2 試驗(yàn)材料

2.1 試驗(yàn)雞

新城疫循環(huán)抗體處于較高水平的生產(chǎn)期商品蛋雞，由稷山縣某養(yǎng)殖戶提供。

2.2 試驗(yàn)疫苗及標(biāo)準(zhǔn)抗原

雞新城疫COL-30凍干苗、Lasota系凍干苗市場購買；標(biāo)準(zhǔn)新城疫抗原購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。

3 試驗(yàn)方法

3.1 正處于盛產(chǎn)期的兩群母雞各60只，共120只，各平均分成3組，共6組，每組20只。試驗(yàn)1組，新城疫 Lasota系凍干苗4個(gè)劑量點(diǎn)眼免疫；試驗(yàn)2組，新城疫Lasota系凍干苗6個(gè)劑量點(diǎn)眼免疫；試驗(yàn)3組，新城疫COL-30凍干苗5個(gè)劑量點(diǎn)眼免疫；試驗(yàn)4組，COL-30凍干苗10個(gè)劑量點(diǎn)眼免疫，同時(shí)各種疫苗組相應(yīng)的各設(shè)一對照組。（Lasota系凍干苗免疫組及對照組，免疫前的平均循環(huán)抗體為10.5 log2；COL-30凍干苗免疫組及對照組，免疫前的平均循環(huán)抗體為10.4 Log2）。

3.2 免疫后1～17天，每天收集每個(gè)試驗(yàn)組和對照組所產(chǎn)雞蛋（不低于15枚），通過實(shí)驗(yàn)室對蛋黃的系列處理后作為抗體檢測樣本。

3.3 采用血球凝集抑制試驗(yàn)測定雞蛋中ND抗體水平，各組數(shù)據(jù)求得的平均值，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。

4 結(jié)果與分析

相同新城疫弱毒凍干疫苗，在不同的免疫劑量下，通過點(diǎn)眼免疫血液循環(huán)抗體的變化結(jié)果見下表和圖。

4.1 新城疫 Lasota系凍干苗，不同劑量點(diǎn)眼免疫抗體檢測結(jié)果見表1。

表1 Lasota系凍干苗不同的免疫劑量抗體檢測結(jié)果（log2）

4.2 新城疫COL-30系凍干苗，不同劑量點(diǎn)眼免疫抗體檢測結(jié)果見表2。

表2 Col-30凍干苗不同的免疫劑量抗體檢測結(jié)果（log2）

從表1及表2的結(jié)果可以看出，不同劑量的新城疫弱毒疫苗通過點(diǎn)眼局部免疫后，在連續(xù)17天的循環(huán)抗體檢測期間，每組的平均抗體滴度和不免疫的對照組一樣，在一定的范圍內(nèi)（9.3 log2～10.9 log2）波動(dòng)，即沒有明顯的規(guī)律性變化（圖1、2）；無論是Lasota還是COL-30弱毒苗，不同劑量的免疫抗體變化與同批的對照組抗體相比，差異均不顯著（P>0.05）；相同的疫苗不同的免疫劑量抗體效價(jià)相比，差異也不顯著（P>0.05）。

5 討論

新城疫免疫抗體組成包括循環(huán)抗體、局部抗體和細(xì)胞免疫。循環(huán)抗體是體液免疫最主要部分，存在于血清中，可由HI實(shí)驗(yàn)測定，作用是阻止病毒擴(kuò)散，防治感染；細(xì)胞免疫，當(dāng)用Ⅳ系或Ⅰ系緊急接種時(shí)，2～3天會(huì)起到作用[1]。在實(shí)際的疫苗預(yù)防過程中，臨床上雞新城疫野毒主要是通過呼吸道等途徑感染易感雞。疫苗的使用主要遵循弱毒凍干疫苗（如Lasota系列、克隆系列）局部免疫（如滴鼻、點(diǎn)眼、飲水），增強(qiáng)局部免疫力抵抗野毒的侵襲，新城疫I系疫苗、滅活疫苗（如佐劑滅活疫苗）通過注射接種，提高血液循環(huán)抗體，減少或消滅機(jī)體內(nèi)的新城疫病毒。但近年來，臨床上新城疫免疫雞群中出現(xiàn)了非典型新城疫病癥，盡管個(gè)別患病雞群的血液循環(huán)抗體滴度大于9 log2也未幸免。究其原因，主要是忽視了疫苗的局部免疫接種，但在加強(qiáng)局部免疫的同時(shí)，局部免疫是否會(huì)對原有的血液循環(huán)抗體（特別是高抗體）產(chǎn)生不利的影響[2]，鮮有研究文獻(xiàn)提供數(shù)據(jù)支持，為此本試驗(yàn)則通過設(shè)計(jì)了新城疫循環(huán)抗體處于高位時(shí)，使用不同的弱毒凍干疫苗和不同的免疫劑量進(jìn)行局部免疫接種，通過連續(xù)的抗體檢

測，體現(xiàn)循環(huán)抗體的變化，最終結(jié)果表明，對原存的循環(huán)抗體滴度幾乎沒有影響，這將為新城疫弱毒疫苗預(yù)防接種程序的制定提供了可靠的理論依據(jù)。

[1]賈松濤，劉星，劉煒，等.不同免疫程序ND 抗體消長規(guī)律及免疫保護(hù)臨界值的測定[J].中國動(dòng)物檢疫，2010，27（9）：51-52.

[2]王俊卿，祝麗.非典型雞新城疫的發(fā)病原因及其防制措施[J].中國動(dòng)物檢疫.2007，24（9）：41.