樊月圓，廖國周，張紅兵，蘇子峰，王桂瑛，程志斌*，廖啟順，劉紹貴

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；2.云南西南集團(tuán)，昆明 650224；3.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南 大理 671003；4.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，昆明 650031；5.云南省種畜場(chǎng)，昆明 650212）

大量試驗(yàn)研究表明，枯草芽孢桿菌（Bacillus Subtilis）是替代飼用抗生素的畜禽安全飼料添加劑之一[1－8]。針對(duì)我國肉雞養(yǎng)殖業(yè)相對(duì)落后的云南省存在大量地面平養(yǎng)的實(shí)際情況，曾開展日糧添加枯草芽孢桿菌對(duì)不同飼養(yǎng)方式（地面平養(yǎng)或籠養(yǎng)）肉雞生長性能影響的初步研究，結(jié)果顯示，無論是地面平養(yǎng)還是籠養(yǎng)方式，枯草芽孢桿菌替代抗生素對(duì)改善肉雞的生長性能有良好效果，良好的生長性能取決于肉雞對(duì)飼料營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化吸收與高效代謝利用[9－18]。已有報(bào)道證明，在籠養(yǎng)條件下，枯草芽孢桿菌能夠補(bǔ)充畜禽腸道多種內(nèi)源酶不足，從而綜合提高畜禽對(duì)飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化與利用[1,5,19－21]。然而，以地面平養(yǎng)為代表的肉雞傳統(tǒng)散養(yǎng)模式，與現(xiàn)代化規(guī)模養(yǎng)殖的籠養(yǎng)模式相比，肉雞的生產(chǎn)性能和健康狀況差異很大[13]。因此，在環(huán)保養(yǎng)殖與安全飼料及飼料添加劑使用日益被提倡的今天，深入研究枯草芽孢桿菌改善肉雞、尤其是地面平養(yǎng)肉雞生長性能的作用機(jī)理十分必要，這對(duì)當(dāng)前云南省地面平養(yǎng)肉雞的生產(chǎn)實(shí)際有科學(xué)指導(dǎo)意義[22－24]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇1日齡羅斯肉雞308（ROSS 308）240只，按照飼養(yǎng)方式（地面平養(yǎng)或籠養(yǎng)）和枯草芽孢桿菌的添加不同，分4個(gè)處理組，試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。每個(gè)處理組設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只，公母各半。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2 試驗(yàn)日糧

參考中國農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33－2004）》并結(jié)合云南省肉雞養(yǎng)殖實(shí)際情況配制1～21和22～42日齡肉雞試驗(yàn)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。處理組1和2肉雞飼糧添加抗生素金霉素，遵守農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》；處理組3和4使用枯草芽孢桿菌（由云南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提供）替代抗生素，添加量為5×1011cfu·kg－1全價(jià)飼糧。試驗(yàn)飼糧均不添加飼用植酸酶制劑，65℃低溫加工成顆粒飼料。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理

籠養(yǎng)采用3層重疊式肉雞籠（1.65 m×0.70 m×0.45 m），水泥地面平養(yǎng)為每個(gè)重復(fù)1個(gè)小圈，放置食料桶和飲水桶。所有試驗(yàn)雞均飼養(yǎng)于同一有窗雞舍內(nèi)，專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)試驗(yàn)。自然光照輔以人工照明，光照時(shí)間22 h。按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)雞場(chǎng)進(jìn)行，從2012年5月3日開始，試驗(yàn)期42 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

測(cè)定體重、飼料消耗量，統(tǒng)計(jì)死亡肉雞數(shù)量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、飼料增重比等生長性能指標(biāo)[13]。采用Cr2O3指示劑法，在試驗(yàn)肉雞36～42日齡進(jìn)行飼料營養(yǎng)物質(zhì)的表觀代謝率研究，具體方法參考丁雪梅等報(bào)道[25]。試驗(yàn)肉雞42日齡早晨空腹稱重后，每個(gè)重復(fù)，隨機(jī)抽取1只健康肉雞，進(jìn)行心臟采血。制備血清后，用全自動(dòng)生化分析儀（Olympus Au600型）測(cè)定血液生化指標(biāo)。分析測(cè)定在云南省動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行兩因素方差分析和多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響見表3。

表3 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

由表3可見，處理組4肉雞末體重、平均日增重、飼料增重比等指標(biāo)，顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05），處理組2和3差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)全期所有處理組肉雞的采食量無差異（P＞0.05）?？莶菅挎邨U菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響飼料增重比（P＜0.05）。

2.2 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響

枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響見表4。

表4 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響

由表4可見，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)的表觀代謝率（P＜0.05），處理組4優(yōu)于處理組2（P＜0.05）；處理組2優(yōu)于處理組1和3。枯草芽孢桿菌顯著影響飼料磷的表觀代謝率（P＜0.05），處理組4肉雞對(duì)飼料磷的表觀代謝率數(shù)值最大。飼養(yǎng)方式顯著影響代謝能的表觀利用率（P＜0.05），處理組2和4籠養(yǎng)肉雞顯著優(yōu)于處理組1和3地面平養(yǎng)肉雞（P＞0.05）。

2.3 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響見表5。由表5可見，枯草芽孢桿菌顯著影響肉雞血清尿酸和血糖的濃度（P＜0.05），處理組2和4肉雞血清尿酸濃度顯著低于處理組1（P＜0.05）；血糖濃度指標(biāo)，處理組4肉雞顯著低于處理組1和3（P＜0.05）?？莶菅挎邨U菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞血清白蛋白的濃度（P＜0.05），處理組4優(yōu)于處理組1，處理組2和3差異不顯著（P＞0.05）。

表5 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

在試驗(yàn)全期所有處理組肉雞的采食量無顯著差異基礎(chǔ)上，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞的飼料增重比?？傮w而言，采食添加枯草芽孢桿菌飼糧的處理組3和4肉雞飼料增重比，優(yōu)于飼用抗生素組的處理組1和2肉雞；其中，以籠養(yǎng)方式的處理組4肉雞飼料增重比最佳。說明無論是地面平養(yǎng)還是籠養(yǎng)方式，枯草芽孢桿菌替代抗生素對(duì)改善肉雞的生長性能有良好效果。此外，由于本次試驗(yàn)在昆明地區(qū)5～6月氣溫適宜（17～25℃）的時(shí)候進(jìn)行，且本試驗(yàn)飼養(yǎng)密度較前期試驗(yàn)飼養(yǎng)密度低，因此總體上本次試驗(yàn)的飼料增重比和死亡率指標(biāo)均優(yōu)于前期試驗(yàn)[13]。

3.2 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)利用率的影響

肉雞良好的生長性能取決于對(duì)飼料營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化、吸收與利用，采用Cr2O3指示劑法測(cè)定的營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率能夠客觀反映肉雞對(duì)飼糧的消化與利用狀況[25－27]。本試驗(yàn)采用了玉米－豆粕型飼糧，排除了基礎(chǔ)飼料原料對(duì)本試驗(yàn)的干擾。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響飼料粗蛋白質(zhì)的利用率。總體而言，使用枯草芽孢桿菌飼糧的處理組3和4肉雞對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)的利用率高于飼用抗生素組的處理組1和2的肉雞；以籠養(yǎng)方式的處理組2和4的肉雞對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)的利用率高于地面平養(yǎng)組的處理組1和3的肉雞；尤其是處理組4肉雞的粗蛋白質(zhì)利用率最高。這些結(jié)果與表3肉雞生長性能的結(jié)果基本一致，充分說明飼糧添加枯草芽孢桿菌有利于提高肉雞對(duì)飼料蛋白質(zhì)的利用率，從而改善肉雞的生長性能，且在籠養(yǎng)肉雞上的使用效果顯著優(yōu)于地面平養(yǎng)肉雞。研究結(jié)果也印證了過去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有補(bǔ)充或維持動(dòng)物腸道多種消化酶，提高營養(yǎng)利用率，改善畜禽生長性能的機(jī)理[1,5,19－21]。在所有試驗(yàn)飼料沒有添加植酸酶的條件下，處理組4肉雞對(duì)飼料磷的表觀代謝率數(shù)值最大，說明飼糧添加枯草芽孢桿菌具有改善肉雞對(duì)飼料磷利用率的作用。這印證了過去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有分泌植酸酶的功能，對(duì)畜禽提高飼料磷利用率，降低養(yǎng)殖環(huán)境污染有積極意義[1,5,8]。也提示飼糧中使用枯草芽孢桿菌可以適當(dāng)降低日糧無機(jī)磷的添加量，但降低幅度有待于進(jìn)一步試驗(yàn)探討。

此外，本次試驗(yàn)沒有發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對(duì)飼料代謝能、粗脂肪、粗纖維利用率的改善效果，其原因可能與本次試驗(yàn)的飼糧營養(yǎng)水平一致以及低纖維、高消化率的優(yōu)質(zhì)基礎(chǔ)飼料原料（玉米、豆粕、魚粉）選擇有關(guān)。

3.3 枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血液生化指標(biāo)是反映畜禽體內(nèi)物質(zhì)代謝變化和組織機(jī)能狀態(tài)變化的指標(biāo)物，可以作為機(jī)體營養(yǎng)代謝利用、應(yīng)激、健康狀態(tài)的綜合表征[28－32]。血清總蛋白包括白蛋白與球蛋白，血清白蛋白由肝臟合成，是機(jī)體蛋白質(zhì)營養(yǎng)需求的主要來源，用于修補(bǔ)組織器官和提供能量，還具有維持血漿滲透壓及作為其他營養(yǎng)物質(zhì)的載體等多種功能[29－30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞血清白蛋白的濃度，這一結(jié)果與肉雞對(duì)飼糧蛋白質(zhì)的利用率結(jié)果相符。處理組4肉雞的血清白蛋白濃度最高，主要因?yàn)樵诨\養(yǎng)條件下，采食添加枯草芽孢桿菌飼糧的肉雞攝入更多的飼料蛋白質(zhì)，且主要用于生長發(fā)育，因此處理組4肉雞生長性能最佳。

尿酸是禽類動(dòng)物體內(nèi)氨基酸及核苷酸等含氮化合物代謝的終產(chǎn)物，也是禽類動(dòng)物排出體內(nèi)多余氨，維持機(jī)體正常機(jī)能的重要方式之一[29]。飼糧粗蛋白質(zhì)水平、飼糧氨基酸平衡狀況、動(dòng)物的生理代謝、健康狀況等多種因素，綜合影響禽類血清尿酸濃度。一般認(rèn)為，較低血清尿酸濃度表征禽類對(duì)飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的良好代謝利用，有利于禽類的生長發(fā)育和健康狀況[29]。本試驗(yàn)在飼糧營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)條件一致的前提下，處理組4肉雞的血清尿酸濃度最低，結(jié)合處理組4肉雞對(duì)飼料蛋白質(zhì)最佳的利用率結(jié)果，說明枯草芽孢桿菌促進(jìn)了肉雞對(duì)飼料蛋白質(zhì)的消化率，減少氮排放，增加機(jī)體蛋白質(zhì)的沉積，從而改善了生長性能。

血清中葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇反映了畜禽對(duì)飼料糖類、脂質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用及其在相關(guān)機(jī)體組織內(nèi)的代謝綜合情況，這些指標(biāo)易受到飼糧營養(yǎng)水平（尤其是氨基酸種類、含量）、飼料原料選擇（谷物、油脂等能量飼料）、血清激素水平（主要是甲狀腺素、胰島素、胰高血糖素、生長激素、糖皮質(zhì)激素等）、肝臟脂質(zhì)相關(guān)代謝酶（脂肪酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶、激素敏感性甘油三酯脂酶、肝脂酶、脂蛋白脂酶等）、動(dòng)物健康狀況等多種因素影響[26,29－30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌顯著影響肉雞血糖濃度，處理組4肉雞血糖濃度顯著低于處理組1和3。推測(cè)是由于枯草芽孢桿菌增加了飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的攝入量，血液中較高濃度的蛋白質(zhì)和（或）氨基酸濃度，激發(fā)了甲狀腺素和（或）胰島素分泌。這兩種激素均有增加血清蛋白質(zhì)向機(jī)體組織沉積以及適當(dāng)降低血糖濃度的作用，以符合機(jī)體組織正常對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)及能量的代謝需求。當(dāng)然，這一推測(cè)有待于進(jìn)一步試驗(yàn)分析相關(guān)的指標(biāo)。

此外，本試驗(yàn)沒有發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對(duì)飼料粗脂肪利用率和肉雞血清甘油三酯及膽固醇濃度的影響，這可能與肝臟脂質(zhì)相關(guān)代謝酶的活性有關(guān)。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)證明，無論是傳統(tǒng)的肉雞地面平養(yǎng)方式還是現(xiàn)代的規(guī)?；怆u籠養(yǎng)方式，添加枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，均可以安全高效的替代飼用抗生素，改善肉雞生長性能，其作用機(jī)理主要是提高飼料蛋白質(zhì)的消化和代謝利用率。

[1]鮑振國,張文舉,胡猛,等.芽孢桿菌的研究進(jìn)展及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2012（1）:17－20.

[2]周映華,周小玲,吳勝蓮,等.不同劑量枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉的影響[J].飼料博覽,2012（4）:29－31.

[3]趙晨,李靜,韓安寧,等.芽孢桿菌制劑對(duì)麻雞生長性能的影響[J].飼料博覽,2010（7）:35－36.

[4]楊光宇.枯草芽孢桿菌在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2012（2）:41－43.

[5]侯玉潔,侯小輝,張建剛.芽孢桿菌類微生態(tài)制劑在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2012（3）:37－40.

[6]陸銀,鄭曦,趙國琦.芽孢桿菌在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2012（4）:9－12.

[7]張紅兵,蘇子峰,程志斌,等.仔豬斷奶過渡料粗蛋白水平和添加枯草芽孢桿菌對(duì)仔豬生長性能的影響[J].飼料博覽,2011（3）:4－7.

[8]王愛娜,馮雪云.益生菌對(duì)豬腸道微生物的調(diào)節(jié)及其對(duì)生產(chǎn)性能的影響[J].飼料博覽,2011（10）:18－20.

[9]程志斌,廖啟順,張紅兵,等.復(fù)合非淀粉多糖酶對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,25（2）:691－696.

[10]程志斌,廖國周,樊月圓,等.復(fù)合非淀粉多糖酶對(duì)肉雞的肌肉品質(zhì)影響的研究[J].畜牧與獸醫(yī),2012,44（3）:30－34.

[11]蘇子峰,張紅兵,樊月圓,等.絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長性能及雞舍有害氣體的影響[J].飼料博覽,2012（6）:1－5.

[12]程志斌,張紅兵,蘇子峰,吳政明.非淀粉多糖酶制劑對(duì)肉雞肉用性能的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011（18）:11 119－11 121.

[13]廖國周,蘇子峰,張紅兵,等.枯草芽孢桿菌飼料添加劑對(duì)籠養(yǎng)和地面平養(yǎng)肉雞生長性能的影響[J].飼料博覽,2011（10）:1－4.

[14]程志斌,張紅兵,黃遵錫,等.幾種商業(yè)非淀粉多糖酶制劑對(duì)肉雞腸道及內(nèi)容物消化酶的影響[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào),2011,32（2）:64－68.

[15]蘇子峰,陳愛民,張紅兵,等.復(fù)合非淀粉多糖酶與植酸酶組合使用對(duì)肉雞生長性能和氮、磷消化率的影響[J].飼料博覽,2012（3）:1－4.

[16]程志斌,張紅兵,蘇子峰,等.非淀粉多糖酶對(duì)肉雞腸道消化酶的影響[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)）,2011,26（6）:781－785.

[17]Cheng Z B,Li D F,Xing J J,et al.Oral administration of spermine advances intestinal maturation in sucking piglets[J].Animal Sci?ence,2006,82（5）:621－626.

[18]程志斌,蘇子峰,張紅兵,等.復(fù)合非淀粉多糖酶制劑對(duì)肉雞生長性能及腸道酶活性的影響[J].飼料工業(yè),2011,32（16）:26－30.

[19]徐海燕,張志焱,曹銀生,等.枯草芽孢桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素的理化性質(zhì)及抑菌譜的研究[J].飼料博覽,2010（4）:29－32.

[20]張慶麗,張志剛,胡志松.酶制劑與益生素組合作用原理的研究[J].飼料博覽,2011（10）:43－45.

[21]林謙,戴求仲,蔣桂韜,等.益生素與其他飼料添加劑配伍使用研究進(jìn)展[J].飼料博覽,2011（1）:46－49.

[22]程志斌,李曉珍,廖啟順,等.畜禽環(huán)保型飼料開發(fā)的必要性[J].飼料博覽,2011（1）:15－17.

[23]程志斌,李曉珍,蘇子峰,等.解讀農(nóng)業(yè)部公告（第1224號(hào)）《飼料添加劑安全使用規(guī)范》[J].飼料工業(yè),2011（3）:59－63.

[24]程志斌,李曉珍,廖啟順,等.畜禽環(huán)保型飼料的研發(fā)思路[J].飼料研究,2011（3）:78－80.

[25]丁雪梅,張克英,王亮,等.三聚氰胺在肉雞體內(nèi)的消化代謝及其對(duì)飼糧養(yǎng)分利用率和流通速率的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2011,23（8）:1 394－1 401.

[26]Kalmendal R,Tauson R.Effects of a xylanase and protease,indi?vidually or in combination,and an ionophore coccidiostat on per?formance,nutrient utilization,and intestinal morphology in broiler chickens fed a wheat－soybean meal－based diet[J].Poultry Sci?ence,2012,91（6）:1 387－1 393.

[27]張紅兵,黃遵錫,程志斌,等.幾種商業(yè)非淀粉多糖酶制劑對(duì)肉雞消化器官的研究[J].飼料博覽,2011（2）:5－7.

[28]Cheng Z B,Li D F,Ge C R,et al.Polyamines in sow colostrum and milk at different stages of lactation[J].Animal Science,2006,82（1）:95－99.

[29]Woyengo T A,Slominski B A,Jones R O.Growth performance and nutrient utilization of broiler chickens fed diets supplemented with phytase alone or in combination with citric acid and multicar?bohydrase[J].Poultry Science,2010,89（10）:2 221－2 229.

[30]姚浪群,薩仁娜,佟建明,等.安普霉素對(duì)仔豬內(nèi)分泌的調(diào)控作用及血液生化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2003,15（2）:58－64.

[31]張紅兵,蘇子峰,程志斌,等.日糧添加霉菌毒素吸附劑對(duì)肉雞生長性能影響的研究[J].飼料博覽,2011（6）:1－4.

[32]Junbo L,Defa L,Yin Y L,et al.Performance,nutrient digestibili?ty and intestinal disaccharidase activity of weaner/grower pigs giv?en diets containing extruded Chinese stored brown rice with exog?enous enzyme supplements[J].Aniaml Science Abstract,2004,79:429－438.