天津農(nóng)學院水產(chǎn)科學系 孫金輝 孫敬鋒 孫學亮白東清 喬秀亭

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）為甲殼綱、十足目、方蟹科、絨螯蟹屬，俗稱河蟹。其主要分布在長江中下游各地，在江蘇、湖北、安徽和上海等地區(qū)，現(xiàn)已逐漸形成規(guī)?；B(yǎng)殖。河蟹生長迅速，肉質細嫩，味道鮮美，具有較高的經(jīng)濟價值。目前關于甲殼動物消化酶活力的研究已有較多報道 （江洪波等，2003），而有關中華絨螯蟹發(fā)育過程中不同蛋白質飼料對其消化酶活性變化的研究尚不多見。因此，本文研究了中華絨螯蟹發(fā)育過程中不同蛋白含量飼料對其生長性能及消化生理的影響情況，旨在探討中華絨螯蟹的消化生理特性，并為人工餌料的合理配制及中華絨螯蟹的科學養(yǎng)殖提供參考。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

2.1.1 試驗蟹來源及管理 試驗用蟹取自寧河七里海河蟹養(yǎng)殖基地。平均殼長為（3.50±0.6）cm，體重為（16.42±1.12）g，河蟹在 80 L 的水族箱內暫養(yǎng)一周，待攝食正常后開始試驗，試驗期間每天投喂2次，投喂量為蟹重的3%～5%。

2.1.2 試驗分組 試驗分為3組，每組66只河蟹，分別投喂人工蟹用配合飼料I、II號（蛋白質含量分別為38%和35%）及天然餌料，每個試驗組各設2個平行，進行試驗。

2.2 試驗方法

2.2.1 殼長、體重測量 取試驗蟹，利用分度值為0.01 cm的游標卡尺，測量河蟹頭胸甲額齒中間凹陷處至頭胸甲后緣的直線長度，該長度即為河蟹的殼長，測量結果準確至小數(shù)點后兩位（江蘇省淡水水產(chǎn)研究所，2010）。將河蟹放入器皿中，用量程為1000 g的電子稱稱重。

2.2.2 豐滿度計算 豐滿度計算公式為：

式中，K為豐滿度；W為體重，g；L為殼長，cm。

2.2.3 蛋白酶活性測定 蛋白酶活性的測定用福林-酚顯色法進行測定，在680 nm下，以每克新鮮組織1 min內水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為一個酶活力單位，μg/min·g（桂遠明，2004）。

2.2.4 淀粉酶活性測定 淀粉酶活性采用碘淀粉顯色法測定，酶活力定義為30 min內，100 mL酶液中的淀粉酶能完全水解淀粉10 mg為一個酶活力單位，mg/30 min·g（桂遠明，2004）。

淀粉酶活性=[（對照管光密度－測定管光密度）/對照管光密度]×800；

回歸曲線為：Y=0.001X+0.0014，R2=0.9952。

2.2.5 脂肪酶活性測定 脂肪酶活力采用聚乙烯醇橄欖油為底物的標準氫氧化鈉溶液滴定法進行測定。脂肪酶活力定義為：在pH 7.5條件下，每克新鮮組織中的脂肪酶水解脂肪，每分鐘產(chǎn)生1 μmol脂肪酸的酶量為一個酶活力單位 （μmol/min）（桂遠明，2004）。

3 結果與分析

3.1 不同飼料蛋白質對河蟹生長性能的影響

三種飼料對河蟹生長性能的影響見圖1至圖3。由圖1可知，第一次采樣時（8月16日），攝食 I號飼料的河蟹殼長較II號飼料增長1.79%，較天然餌料增長12.04%（P＜0.05）；第二次至第三次取樣間，河蟹殼長的增長進入平緩期。由圖2可知，在整個飼喂期間，河蟹的體重呈現(xiàn)明顯的增長的態(tài)勢，在第一次及第二次取樣后，投喂I號飼料的河蟹體重呈現(xiàn)出優(yōu)于其他兩組的趨勢。在試驗末期取樣后發(fā)現(xiàn)，I號飼料河蟹體重較其他兩組分別顯著增長21.42%和30.77%（P＜0.05）。由圖3可知，在整個試驗期間，河蟹的豐滿度呈現(xiàn)試驗前期增長緩慢，試驗后期快速增長的趨勢。與河蟹的殼長及體重情況相同，在試驗后期I號飼料組河蟹豐滿度顯著高于其他兩組16.36%和16.08%（P ＜ 0.05）。

綜合分析河蟹的殼長、體重與豐滿度指標，投喂蛋白質含量為38%的I號飼料對河蟹的生長促進效果最佳。

3.2 不同蛋白質含量飼料對河蟹消化酶活性的影響

3.2.1 不同蛋白質含量飼料對河蟹蛋白酶活性的影響 由圖4可知，在試驗前期和中期，各組河蟹體內蛋白酶活力上升較為明顯，至試驗后期蛋白酶活性變化較為平穩(wěn)。在試驗中期，I號飼料組河蟹蛋白酶活性較II號飼料組與天然餌料組分別提高25%和27.15%（P＜0.05）。

3.2.2 不同蛋白質含量飼料對河蟹淀粉酶活性的影響 由圖5可知，隨著飼喂時間的延長，河蟹淀粉酶酶活力逐漸上升，在第三次取樣時淀粉酶活力最高，且I號飼料組淀粉酶活力極顯著高于II號飼料組與天然餌料組（P＜0.01）。

3.2.3 不同蛋白質含量飼料對河蟹脂肪酶活性的影響 由表6可知，與河蟹體內淀粉活性相似，各試驗組脂肪酶的活性也呈現(xiàn)隨飼喂時間的延長，酶活力逐漸上升的趨勢。各取樣時間I號飼料組脂肪酶活力均顯著高于其他兩組，且酶活力在試驗末期達到最大值。

4 討論

4.1 不同蛋白質含量飼料對河蟹生長性能指標的影響 為滿足河蟹的生長和生理需要，河蟹飼料應盡量做到營養(yǎng)全面均衡，選料新鮮，以求最大限度的保證各種養(yǎng)分的含量，以滿足河蟹的生理需要及生長特點。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質含量為38%的I號飼料對河蟹的殼長、增重及豐滿度等生長性能指標具有明顯的促進作用，說明在河蟹生長初期，需要較高的飼料蛋白質用于自身生長。劉學軍等（1990）研究認為，成蟹養(yǎng)殖前期餌料蛋白質適宜含量為41.0%，中后期為36.0%。韓小蓮（1991）研究認為，大眼幼體至Ⅲ期幼蟹蛋白質的需要量為 45%。陳立僑等（1994）采用酪蛋白、明膠、酵母粉為蛋白源，結果表明，體重為6～10 g的中華絨螯蟹配合餌料蛋白質適宜需要量為34.05% ～46.5%。Mu等（1998）研究表明，以蝦粉為蛋白源，體重為1.0 g仔蟹對蛋白質的適宜需要量為39.0%，這些研究成果均與本試驗的結論相符合。

此外，但在本研究還發(fā)現(xiàn)，投喂天然餌料的河蟹，生長速度慢，與配合飼料相比差距較大。究其原因，可能主要與天然餌料中所含的蛋白質、脂類、維生素、碳水化合物以及礦物質、鈣磷等無機鹽不如配合飼料中含量和配比合理相關，不能充分滿足河蟹的生長需要，嚴重影響了河蟹的正常代謝；尤其是對于蛻殼時期的河蟹而言，投喂天然餌料不僅影響蟹殼的生長，對于后期的生理器官的發(fā)育也有很大的影響。

4.2 不同蛋白質含量飼料對河蟹消化酶活性的影響 研究證實，消化酶活性可作為蝦蟹餌料各營養(yǎng)成分消化吸收和利用的重要指標。本試驗結果表明，蛋白質含量為38%的I號飼料對河蟹的蛋白酶、淀粉酶與脂肪酶的促進效果均優(yōu)于其他兩種，這與大多學者的研究結論相似。周永奎等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，在中華絨螯蟹卵巢的發(fā)育期，對其投喂較高含量的蛋白質飼料，可有效提高河蟹體內胰腺蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶及脂肪酶的活性。林仕梅等（2001）與許實榮等（1987）也研究證實飼料中蛋白質含量對蝦、蟹類的消化酶活性具有重要的影響。

目前關于甲殼動物脂肪酶活力低的解釋主要有兩種：一種認為這是測定脂肪酶的反應條件不適宜或不夠靈敏所致，另一種則認為是試驗動物本身脂肪酶活力很低甚至無活力所致。本試驗結果表明，河蟹消化甘油三酯的能力較弱，因此表現(xiàn)為脂肪酶活力較低。

[1]陳立僑，魏斯?jié)?中華絨螯蟹的攝食量和胃容量研究 [J].水利漁業(yè)，1993，4：10 ～ 12.

[2]堵南山，賴偉.中華絨螯蟹卵黃形成的研究[J].動物學報，1999，45（1）：88 ～ 92.

[3]江洪波.中華絨螯蟹蛋白質營養(yǎng)生理研究：[博士學位論文][D].上海:華東師范大學，2003.

[4]江蘇省淡水水產(chǎn)研究所.河蟹養(yǎng)殖一月通[J].北京：中國農(nóng)業(yè)大學出版社，2010，5（3）：10.

[5]韓小蓮.河蟹幼體配合飼料的研究[J].河北漁業(yè)，1991，1：12～14.

[6]桂遠明.水產(chǎn)動物機能學實驗[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.124～126.

[7]劉學軍，張丙群，張玉蘭.人工配合飼料養(yǎng)殖河蟹高產(chǎn)技術試驗[J].淡水漁業(yè)，1990，5：20 ～ 22.

[8]林仕梅，羅莉，葉元土，等.中華絨螯蟹營養(yǎng)生理的研究Ⅱ蛋白質能量比對中華絨螯蟹蛋白酶活力和飼料消化率的影響[J].浙江海洋學院學報（自然科學版），2001，20（增刊）：62 ～ 65.

[9]潘魯青，王克行.河蟹幼體消化酶活力與氨基酸組成的研究[J].中國水產(chǎn)科學，1997，4（2）：13 ～ 20.

[10]許實榮，孫鳳，婁康后.中國對蝦營養(yǎng)研究--B族維生素（B1，B6）對對蝦蛋白酶和淀粉酶活力的影響[J].海洋科學，1987，11（4）：34 ～ 37.

[11]周永奎，劉立鶴，陳立僑，等.卵巢發(fā)育過程中河蟹肝胰腺消化酶活力的變化[J].水利漁業(yè)，2005，2（25）：19 ～ 21.

[12]Biesiot P M.Change in digestive enzyme activities during early development of the american lobster Homarus americanus[J].Mar Biol Ecol，1990，136（2）：107 ～ 122.

[13]Hirche.Digestibe enzyme activities dur ing larval development of Hy asaroneus[J].Comp Biochem Physiol，1987，87（2）：297 ～ 302.

[14]Mu Y Y，K F Shim，Guo J Y.Effects of protein level in isocaloric diets on growth performance of the juvenile Chinese hairy crab，Eriocheir sinensis[J].Aquaculture，1998，165：139 ～ 148.