馬 哲（綜述），張 虹（審校）

（天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院普婦科，天津 300100）

在婦科惡性腫瘤中卵巢癌（ovarian cancer，OC）的發(fā)病率居第3位，僅次于子宮頸癌及子宮體癌，而其致死率卻居于首位［1］。由于卵巢解剖部位位于盆腔深部，卵巢癌早期癥狀多隱匿，因此就診時(shí)超過70%的患者已為FIGOⅢ—Ⅳ期，其5年生存率僅為30%［2］，而FIGOⅠ—Ⅱ期的卵巢癌患者5年生存率卻為70%～90%［3］。因此，早期診斷對卵巢癌患者的預(yù)后有重要影響。

B7分子家族是近年來廣泛研究的一組共刺激分子。它們提供了T細(xì)胞活化的第二信號，介導(dǎo)機(jī)體的抗腫瘤免疫，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及基因治療等方面具有重要的意義［4］。B7-H4是新近發(fā)現(xiàn)的共刺激分子家族新成員。研究表明，多種腫瘤細(xì)胞株和組織中均存在B7-H4表達(dá)［5］，在上皮性卵巢癌特別是漿液性卵巢癌中高表達(dá)?，F(xiàn)就B7-H4蛋白在上皮性卵巢癌中的研究進(jìn)展綜述如下。

1 B7-H 4的結(jié)構(gòu)、分布及生物學(xué)作用

機(jī)體抗腫瘤免疫的主力是細(xì)胞免疫，其中以T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)為主要方式。T細(xì)胞的活化需要雙信號的刺激，第一信號來自T細(xì)胞受體（TCR）與抗原肽-MHC復(fù)合物相互作用；第二信號來自抗原提呈細(xì)胞（APC）上的B7家族分子與其在T細(xì)胞上的配體CD28家族分子相結(jié)合產(chǎn)生的協(xié)同刺激信號。只有雙信號共同刺激才能有效地激活T細(xì)胞發(fā)揮相應(yīng)的免疫功能。若缺乏第二信號的輔助功能，T細(xì)胞將處于克隆無能或無應(yīng)答狀態(tài)，無法有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞得以發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移。

利用生物信息學(xué)方法，G.LSica等［6-8］相繼于2003年發(fā)現(xiàn)了B7-H4分子。B7-H4分子是以當(dāng)時(shí)現(xiàn)有的B7家族成員的胞外段可變區(qū)（IgV+IgC）為查詢序列，對GenBank中的表達(dá)序列標(biāo)簽進(jìn)行搜索時(shí)發(fā)現(xiàn)的，并在人胎盤cDNA文庫中得到了全長序列。人B7-H4的cDNA長約1.8 kb，位于染色體1p11.1，在基因組上跨越66 kb，含有6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子，第6個(gè)外顯子存在2種可變剪切形式，由此產(chǎn)生2種不同的剪切體。此外，在人染色體20 p 11.1中有1個(gè)假基因，它在編碼區(qū)僅含有1個(gè)外顯子和2個(gè)終止密碼子，且與編碼B7-H4的cDNA核酸水平的相似性高達(dá)94%。兩者的堿基序列差異主要在IgV和IgC區(qū)；2個(gè)終止密碼子分別位于第21位和540位，分別在信號肽區(qū)和跨膜區(qū)的外側(cè)，阻止全長B7-H4蛋白的合成。因此，這個(gè)可變的B7-H4基因組DNA被認(rèn)為可能是B7-H4的假基因。表達(dá)的假基因在調(diào)控與它同源的編碼基因mRNA穩(wěn)定性上起著重要的作用。

B7-H4表達(dá)在專職APC的細(xì)胞膜上，受白介素10（IL-10）的誘導(dǎo)，并廣泛分布在非淋巴組織中［6］。反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）分析顯示，在人正常組織（胎盤、肝、骨骼肌、腎、胰腺、前列腺、卵巢、睪丸和小腸）中均有B7-H4mRNA表達(dá)。然而，用人B7-H4特異性單克隆抗體進(jìn)行免疫組化，在上述正常來源的組織中均呈陰性表達(dá)，提示正常外周組織能在轉(zhuǎn)錄水平對B7-H4分子的表達(dá)進(jìn)行嚴(yán)密的調(diào)控，并提示該分子的表達(dá)可能具有重要功能。

B7-H4可負(fù)性調(diào)節(jié)T細(xì)胞的活化，其生物學(xué)功能包括：1）抑制T細(xì)胞增殖。固相化的B7-H4免疫球蛋白（mB7-H4-Ig）明顯抑制T細(xì)胞增殖，而可溶性B7-H4-Ig雖然不能抑制T細(xì)胞增殖卻能部分抑制同種反應(yīng)性細(xì)胞毒性T細(xì)胞的產(chǎn)生［8］。2）減少細(xì)胞因子的產(chǎn)生。在加入抗CD3單克隆抗體和B7-H4-Ig融合蛋白的T細(xì)胞培養(yǎng)體系中，白細(xì)胞介素-2（IL-2）的分泌被明顯抑制。B7-H4對T細(xì)胞增殖的抑制作用可能是通過減少其IL-2分泌來實(shí)現(xiàn)的，這表現(xiàn)在外源性IL-2能逆轉(zhuǎn)B7-H4-Ig誘導(dǎo)的對T細(xì)胞的增殖抑制作用［7-8］。

2 B7-H4與腫瘤的關(guān)系

B7-H4在腫瘤中的表達(dá)與腫瘤的進(jìn)程及腫瘤患者的預(yù)后相關(guān)。 B7-H4 在前列腺癌［9］、乳腺癌［10］、非小細(xì)胞性肺癌［11］中的表達(dá)與腫瘤的分型、分期以及患者的轉(zhuǎn)歸關(guān)系密切，而且在肺癌和前列腺癌中B7-H4的表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移相關(guān)，B7-H4呈高表達(dá)的前列腺癌患者更容易發(fā)生擴(kuò)散、復(fù)發(fā)，患者病死率也高［9］。

2006 年 A.E.Krambeck 等［12］研究發(fā) 現(xiàn)，B7-H4在59.1%的腎細(xì)胞癌樣本中表達(dá)染色，腫瘤細(xì)胞B7-H4蛋白的表達(dá)與不良的臨床病理特征相對應(yīng)；B7-H4陽性表達(dá)的腫瘤患者因腎細(xì)胞癌致死的可能性是缺乏B7-H4表達(dá)的腫瘤患者的3倍。因此推斷，B7-H4是判斷腎細(xì)胞癌患者預(yù)后的腫瘤標(biāo)記物之一。 2008 年 F.Ficarra 等［13］進(jìn)一步研究表明，B7-H4可能是評估腎細(xì)胞癌預(yù)后準(zhǔn)確度有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

3 B7-H 4與卵巢腫瘤的關(guān)系

3.1 B7-H 4在卵巢癌組織中的表達(dá)及意義

2008年孔凡榮等［14］對110例卵巢上皮源性腫瘤組織進(jìn)行免疫組化發(fā)現(xiàn)，B7-H4在原發(fā)上皮性卵巢癌中的陽性表達(dá)率為88.57%（62/70），顯著高于卵巢良性腫瘤表達(dá)率的45.00%（9/20）及正常卵巢組織零表達(dá)（0/20），兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。B7-H4在原發(fā)上皮性卵巢癌中表達(dá)與癌細(xì)胞組織分化、病理類型及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與絕經(jīng)狀態(tài)、FIGO分期及有無腹水無關(guān)。魏雙燕等［15］于2008年通過免疫組織化學(xué)方法對58例卵巢上皮癌進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，B7-H4蛋白表達(dá)與卵巢癌的病理類型有關(guān)，漿液性癌、透明細(xì)胞癌及內(nèi)膜樣癌100%表達(dá)，黏液性癌表達(dá)率相對較低。結(jié)合臨床病理資料分析41例卵巢漿液性癌患者B7-H4蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)晚期癌表達(dá)高于早期癌，分化程度差的標(biāo)本B7-H4表達(dá)高于分化程度高者。

廖林虹等［16］研究發(fā)現(xiàn)，B7-H4 mRNA 在卵巢漿液性癌、交界性卵巢漿液性腫瘤和卵巢漿液性囊腺瘤組織中均有表達(dá)；B7-H4蛋白表達(dá)于卵巢漿液性腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)和（或）胞膜，卵巢漿液性癌、交界性卵巢漿液性腫瘤和卵巢漿液性囊腺瘤組織中其陽性表達(dá)率分別為 75%（30/40）、50%（10/20）和 13.3%（2/15），陽性率逐級下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。B7-H4在卵巢漿液性癌的高表達(dá)及其與臨床分級分期關(guān)系，提示其可能與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，可為卵巢惡性腫瘤診斷及治療提供靶位點(diǎn)。

3.2 B7-H 4聯(lián)合CA125在卵巢癌早期診斷的意義

腫瘤標(biāo)志物糖類抗原125（CA125）在監(jiān)測卵巢癌的療效、進(jìn)展、預(yù)后及復(fù)發(fā)方面的價(jià)值得到公認(rèn)。但在早期卵巢癌患者中僅有50%的患者血清CAl25水平升高，且在CAl25水平異常者中20%為卵巢癌患者，26%為其他惡性腫瘤患者，14%為卵巢良性疾病患者，其余為婦科良性疾病患者［17］。CA125對卵巢癌早期診斷敏感性差。B7-H4分子是CAl25檢測早期卵巢癌一個(gè)很好的補(bǔ)充。

研究發(fā)現(xiàn)，B7-H4還以可溶性形式存在于血液和體液中。I.Simon等［18］用ELISA法分析了2 500例患者血清和組織溶解產(chǎn)物中B7-H4蛋白的水平，發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清和腹水中可溶性 B7-H4（soluble B7-H4，sB7-H4）的含量顯著高于正常人和生殖系統(tǒng)良性病變的婦女，B7-H4分子在48%的Ⅰ期腫瘤患者、55%的Ⅱ期腫瘤患者以及67%的晚期腫瘤患者中有過表達(dá)。sB7-H4水平不隨月經(jīng)、年齡和月經(jīng)周期而改變，而CAl25的水平隨月經(jīng)和年齡而改變，將B7-H4與CAl25共同檢測，其早期卵巢癌的特異性較單獨(dú)檢測CAl25的52%提高到65%。標(biāo)志物表達(dá)與臨床結(jié)局的相互關(guān)系反映出B7-H4高水平與預(yù)后不良有相關(guān)性。他們還檢測了16例早期、52例晚期卵巢癌血清標(biāo)本中 B7-H4、CA125、Spondin 2和DcR3的表達(dá)，這4種腫瘤標(biāo)記物在卵巢癌患者血清中均有升高，但B7-H4的特異性最高，在正常對照組中表達(dá)最低。因此認(rèn)為，B7-H4可作為早期卵巢癌的一個(gè)重要診斷標(biāo)記物，利用B7-H4單獨(dú)或者與CAl25聯(lián)合診斷早期卵巢癌具有可行性［19］。

4 B7-H 4與腫瘤免疫治療

卵巢腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的免疫因素有關(guān)。B7-H4分子在人腫瘤組織中廣泛表達(dá)，轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)B7-H4的表達(dá)在正常組織和器官中扮演了決定性的角色，而在腫瘤中，這種調(diào)節(jié)機(jī)制發(fā)生了異常［20］。對B7-H4分子的基本特性及免疫調(diào)節(jié)功能的研究將對臨床診療具有重要作用。T.Miyatake等［21］發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌B7-H4高表達(dá)與患者年齡大、腫瘤不良分級分期呈正相關(guān)，而與腫瘤相關(guān)淋巴細(xì)胞（TAL）數(shù)目呈負(fù)相關(guān)。提示B7-H4蛋白表達(dá)在腫瘤免疫逃逸及不良預(yù)后中起重要作用。

I.Kryczek等［22］對103例卵巢癌患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，B7-H4不僅表達(dá)于卵巢癌腫瘤組織中，同時(shí)在腫瘤組織周圍浸潤的巨噬細(xì)胞上也有表達(dá)。并發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）上表達(dá)的B7-H4能抑制該細(xì)胞對腫瘤相關(guān)抗原特異性T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。在人卵巢癌中，腫瘤相關(guān)T細(xì)胞促使巨噬細(xì)胞分泌IL-6和IL-10，然后這些細(xì)胞因子通過自分泌和（或）旁分泌的形式刺激抗原提呈細(xì)胞B7-H4表達(dá)。B7-H4表達(dá)陽性的TAM和T細(xì)胞數(shù)目呈顯著正相關(guān)，同時(shí)T細(xì)胞數(shù)目和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞B7-H4的強(qiáng)度與患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)［23］。

5 展望

綜上所述，B7-H4在上皮性卵巢癌特別是漿液性卵巢癌中高表達(dá)，在卵巢良性組織以及正常卵巢組織中低表達(dá)或不表達(dá)；B7-H4與CAl25聯(lián)合檢測可明顯提高卵巢癌早期診斷的特異性和敏感性，B7-H4是一個(gè)極具應(yīng)用前景的卵巢癌腫瘤標(biāo)記物。同時(shí)，阻斷B7-H4或者減少B7-H4陽性TAM可能是加強(qiáng)T細(xì)胞腫瘤免疫治療癌癥的一種新策略。

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