朱 茜，張 艷，王慧君，張 靜，毛麗芳，黃 欣，趙 龍，唐曉平

(川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，四川 南充 637000)

由于可以模擬人類蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachniod hemorrhage，SAH)后腦血管痙攣(cerebral vasospasm，CVS)的發(fā)生發(fā)展過程，枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型已成為研究CVS的常用方法［1］。但由于大鼠耐受麻醉能力差，圍手術期呼吸道并發(fā)癥成為導致造模失敗的重要因素。我們采用枕大池二次注血法建立SAH大鼠模型的經(jīng)驗，總結行之有效的針對性呼吸道護理措施，并評價其在枕大池二次注血法建立SAH大鼠模型中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

健康SD大鼠203只(普通級)，由川北醫(yī)學院實驗動物中心提供。其中雄性110只，雌性93只，體重300～350 g。根據(jù)是否采取針對性呼吸道護理分為兩組:采用針對性呼吸道護理前為對照組(87例):雄性45例，雌性42例，體重(322±17.1)g;采用針對性呼吸道護理后為護理干預組(116例):雄性65例，雌性51例，體重(326±18.9)g。兩組大鼠性別、體重差異無統(tǒng)計學意義。

1.2 手術方式

護理干預組與對照組均由相同人員實施手術。實驗者之前有建立該模型經(jīng)歷，兩組間手術熟練程度和手術步驟無明顯差異。3%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉后，將大鼠以俯臥位固定于實驗臺上。項部剪毛備皮，3%碘酊、75%乙醇消毒，枕下正中入路切開皮膚，手術顯微鏡下暴露寰樞弓、枕骨和寰枕筋膜。用27G穿刺針穿入枕大池抽出腦脊液0.1～0.2 mL后，在2 min內向枕大池緩慢注入新鮮自體動脈血液0.3 mL，注血后保留穿刺針于枕大池內2～5 min后拔出，用醫(yī)用耳腦膠封住穿刺口防止瘺的形成。術后將大鼠保持頭低30°，俯臥位30 min，使自體血在重力作用下進入基底池。48 h后重復上述操作，向枕大池注血0.2 mL。

1.3 針對性圍手術期呼吸道護理

1.3.1 術前護理 ①保證實驗大鼠生活環(huán)境溫暖、安靜，干燥通風;②術前密切觀察大鼠狀態(tài)，存在咳嗽、流涕、氣喘現(xiàn)象的大鼠不能用于實驗;③術前禁食水:術前禁食12 h、禁水6 h;④手術體位:置大鼠于俯臥位，保持軀體舒展，避免腹部彎曲與擠壓;⑤術前30 min按體重腹腔注射阿托品0.05 mg/kg;⑥麻藥劑量:精確計算麻藥劑量，在保證手術順利的前提下，盡量縮短麻醉時間。

1.3.2 術中護理 ①手術動作要輕柔，術中盡量避免大鼠腹部的壓迫和移動;②密切觀察呼吸頻率及節(jié)律變化，注意有無痰鳴或咳嗽、喘息癥狀;③由于手術在頸枕部操作，需盡量避免頸部的側彎與屈曲。

1.3.3 術后護理 ①注血后保持大鼠頭低30°，俯臥位30 min，然后恢復平臥位，保持呼吸道通暢;②術后密切觀察呼吸情況4～12 h，生命體征平穩(wěn)后，將大鼠放回安靜、通風環(huán)境內單獨飼養(yǎng)。

1.4 呼吸道并發(fā)癥的判斷與處理

在圍手術期大鼠呼吸時出現(xiàn)痰鳴音，呃逆，咳嗽，呼吸急促或不規(guī)則，甚至呼吸暫停等表現(xiàn)時，即判斷為發(fā)生了呼吸道并發(fā)癥。發(fā)現(xiàn)呼吸道并發(fā)癥者，予以保持呼吸道通暢，并予吸氧、吸痰等處理，對于呼吸節(jié)律及頻率明顯變化者，進行胸廓按壓輔助呼吸。在手術中出現(xiàn)呼吸道并發(fā)癥者除按以上步驟處理外，需立即停止手術操作，待呼吸狀況好轉后繼續(xù)手術。

1.5 成功及失敗標準

二次注血術后存活大鼠根據(jù)實驗目的分別于術后1 d、3 d、5 d處死，取腦觀察，發(fā)現(xiàn)蛛網(wǎng)膜下腔有血凝塊或血性腦脊液者視為造模成功。實驗大鼠在達到成功標準前死亡、解剖發(fā)現(xiàn)蛛網(wǎng)膜下腔無血凝塊或血性腦脊液、解剖發(fā)現(xiàn)硬膜下積血者或發(fā)現(xiàn)腦內血腫、腦組織損傷、大量脊髓段硬膜外/下血腫、顱內膿腫之一者視為實驗失敗。所有實驗失敗者根據(jù)麻醉及手術過程、術后觀察、解剖及尸檢結果分析失敗原因。

1.6 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 16.0軟件包進行數(shù)據(jù)分析，除大鼠體重資料比較采用成組分析t檢驗外，其他指標組間比較均采用χ2檢驗。

2 結果

共造模成功160例(成功率78.82%)。其中49例(24.14%)發(fā)生呼吸道并發(fā)癥，因呼吸道并發(fā)癥失敗14例(6.9%);發(fā)生非呼吸道并發(fā)癥35例(17.24%)，因非呼吸道并發(fā)癥失敗 29例(14.29%)，常見的非呼吸道并發(fā)癥為腦組織穿刺傷、麻藥過量、腦疝等。呼吸道并發(fā)癥占所有圍手術期并發(fā)癥的58.33%。

護理干預組出現(xiàn)呼吸道并發(fā)癥19例(16.38%)，對照組發(fā)生呼吸道并發(fā)癥30例(34.48%)，組間比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=0.9658，P ＜0.005);護理干預組因呼吸道并發(fā)癥造模失敗4例(3.6%)，對照組因呼吸道并發(fā)癥造模失敗10例(11.49%)，組間差異有統(tǒng)計學意義(χ2=0.8784，P ＜0.05)。

3 討論

動脈瘤性SAH是最危險的腦血管疾病之一，其起病突然，病情變化快，且難以早期診斷和預防，死亡率與致殘率均相當高［2－3］。CVS是其最常見的并發(fā)癥，也是導致其預后不佳的重要原因。但目前對蛛網(wǎng)膜下腔出血后CVS的發(fā)生發(fā)展機制及臨床治療的研究都還不盡如人意［4］。由于臨床實驗的局限性，對于活體動物模型的研究成為目前研究蛛網(wǎng)膜下腔出血后CVS的重要手段。因為可以模擬人類蛛網(wǎng)膜下腔出血后典型的腦血管痙攣過程，枕大池二次注血法是建立蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣最常用的方法［1，5］。而大鼠則是常用的實驗對象之一［6－7］。但是，由于大鼠耐受麻醉及手術能力差，圍手術期并發(fā)癥較多，實驗失敗率和圍手術期死亡率均較高。林琳等［8－9］認為，圍手術期護理在建模過程中起著重要作用。而我們的實驗結果顯示，呼吸道并發(fā)癥占所有圍手術期并發(fā)癥的一半以上。所以我們在實驗中采取針對性的呼吸道護理措施，減少了并發(fā)癥的發(fā)生，提高了建模成功率。

我們認為，大鼠發(fā)生呼吸道并發(fā)癥的原因主要有以下3種:①呼吸道分泌物增加;②胃腸內容物返流與誤吸;③氣道機械性梗阻。所以我們在針對性呼吸道護理中采取了多項措施預防并發(fā)癥的發(fā)生。在實驗對象的準備上，我們嚴格控制飼養(yǎng)環(huán)境，預防呼吸道疾病的發(fā)生;而且在實驗開始前再次密切觀察，防止?jié)撛诤粑兰膊〈笫筮M入實驗。我們在術前30 min應用阿托品，減少了術中呼吸道腺體的分泌，以防止術中窒息［10］。在胃腸道準備方面，我們術前嚴格禁食、水，保證大鼠在術中胃處于排空狀態(tài);而且，我們盡量減少術中操作對胃腸道的刺激，防止術中出現(xiàn)胃腸道返流和誤吸。另外，我們還發(fā)現(xiàn)，術中頸部的過度屈曲也是導致大鼠呼吸困難、缺氧的原因之一。所以，在針對性護理中，我們在操作過程中對大鼠頭部進行適當?shù)墓潭?，避免頸部的過度扭曲，以防氣道閉塞。實驗結果顯示，護理干預組呼吸道并發(fā)癥的發(fā)生率明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義，說明采取以上綜合護理措施有利于防止呼吸道并發(fā)癥的發(fā)生。

實驗發(fā)現(xiàn)，除因枕大池注射導致枕骨大孔疝而發(fā)生的呼吸驟停難以恢復外，在發(fā)現(xiàn)和處理及時的前提下，其他呼吸道癥狀大多是可以逆轉的。所以，我們在采取針對性呼吸道護理后，強調了術中術后的觀察與呼吸道并發(fā)癥的處理。我們安排專人對術中、術后大鼠進行觀察與護理，除保證大鼠處于舒適的體位及呼吸道通暢外，一旦發(fā)現(xiàn)呼吸道癥狀，立即酌情給予停止手術操作、吸氧、吸痰、胸廓按壓輔助呼吸等處理。結果顯示，護理干預組因呼吸道并發(fā)癥死亡率明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義，說明密切的觀察和及時的處理有利于降低實驗大鼠的圍手術期死亡率，提高建模成功率。

結果顯示，針對性呼吸道護理干預有利于減少圍手術期呼吸道并發(fā)癥的發(fā)生，可以提高建模成功率，但其意義遠不止于此。由于該模型是研究CVS的常用模型之一，而神經(jīng)功能評價則是評價腦缺血性損害的重要手段［11－12］。大鼠圍手術期呼吸道并發(fā)癥可能導致大鼠腦缺氧，進而加重神經(jīng)功能障礙，而非CVS導致的神經(jīng)功能障礙必然會導致實驗結果可信度下降，影響實驗效能。所以，采用針對性呼吸道護理措施還有利于提高SAH模型的質量和個體間一致性，有利于得出客觀、可信的實驗結果。我們相信，針對性呼吸道護理將在SAH的模型及相關的研究中發(fā)揮重要作用。

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