潘慶珍

（廣州市荔灣區(qū)婦幼保健院，廣東 廣州 510375）

1 血液細(xì)胞檢驗(yàn)

又稱為血常規(guī)檢驗(yàn)，主要是指對(duì)血液中的紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）、血小板（PLT）以及血紅蛋白（HGB）及相關(guān)的數(shù)據(jù)進(jìn)行技術(shù)檢測(cè)并分析。血液細(xì)胞檢驗(yàn)是當(dāng)前各大醫(yī)院檢驗(yàn)科室中最為多見的檢驗(yàn)內(nèi)容，也是臨床醫(yī)療診斷最為常用的檢驗(yàn)方法。傳統(tǒng)的血液檢驗(yàn)方法主要是采用人工顯微鏡對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)，現(xiàn)代的檢驗(yàn)方法主要是采用自動(dòng)血液分析儀對(duì)血液細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)自動(dòng)化、智能化程度不斷提高。然而，無(wú)論是傳統(tǒng)的鏡檢還是現(xiàn)代的血液分析儀，要獲取可靠、準(zhǔn)確的血液分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，都需要充分考慮實(shí)驗(yàn)室血液檢驗(yàn)中的各種影響因素，并采取相應(yīng)的質(zhì)量控制措施。

2 血液細(xì)胞檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)

2.1 保持細(xì)胞形態(tài)完整

在進(jìn)行標(biāo)本制備的過(guò)程中必須要保證血液標(biāo)本的各種細(xì)胞的形態(tài)保持完整，細(xì)胞的形態(tài)一旦遭到破壞，相關(guān)的測(cè)量治療會(huì)出現(xiàn)差錯(cuò)，影響檢驗(yàn)結(jié)果。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果的前提條件。

2.2 采集血液細(xì)胞標(biāo)本

臨床上，主要是采集末梢毛細(xì)血管血液以及靜脈血作為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的標(biāo)本。靜脈血的血樣能最準(zhǔn)確地反映人體的病變情況，是最為可靠的血液標(biāo)本。與手指血相比，靜脈血的準(zhǔn)確性以及可重復(fù)性都較高，白細(xì)胞計(jì)數(shù)以及血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確率都較高?；诖?，在采集血液檢驗(yàn)的標(biāo)本時(shí)盡量采用靜脈血作為標(biāo)本。此外，不允許從病人輸液的滯留針處或者是輸液靜脈同側(cè)血管中采集到的血液作為檢驗(yàn)標(biāo)本，防止上述所采的血液稀釋，影響血液檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率。同時(shí)，用止血帶壓迫止血的時(shí)間不宜超過(guò)1分鐘，防止患者淤血以及血液濃縮的發(fā)生，導(dǎo)致血液檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。

2.3 血液細(xì)胞標(biāo)本的抗凝

在采集到血液標(biāo)本后，必須要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行抗凝劑抗凝處理，EDTA（EDTA- Na2，EDTA- K2，EDTA-K3）是目前使用較為普遍的抗凝劑，其對(duì)血小板以及白細(xì)胞形態(tài)的影響較小，適合用于血液細(xì)胞的檢驗(yàn)。除了血液生理性因素以及采取部位等采血因素的影響外，血液標(biāo)本的質(zhì)量主要取決于抗凝劑與血液之間的比例。當(dāng)抗凝劑的量不足時(shí)血，血漿中會(huì)出現(xiàn)微凝血塊，使用血細(xì)胞分析儀對(duì)具有微凝血塊的標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，微凝血塊很可能會(huì)導(dǎo)致儀器阻塞，同時(shí)也會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的真確性。當(dāng)血液得比例過(guò)低，而抗凝劑的劑量過(guò)多，白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變，其改變的程度與抗凝劑的使用時(shí)間及濃度有關(guān)，白細(xì)胞形態(tài)改變的程度越高對(duì)檢驗(yàn)指標(biāo)的準(zhǔn)確性的影響越嚴(yán)重。抗凝劑的最佳濃度應(yīng)控制在1.5mg/ml。

2.4 血液細(xì)胞標(biāo)本的稀釋

血液主要是由血漿以及血細(xì)胞組成的紅色粘稠混懸液。在對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)檢驗(yàn)時(shí)，直接對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行血液計(jì)數(shù)是非常困難的，因而要在計(jì)數(shù)檢驗(yàn)前要對(duì)血液進(jìn)行合理的稀釋處理。根據(jù)血細(xì)胞分析儀的基本原理，在對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行設(shè)計(jì)時(shí)，要將血液的計(jì)數(shù)容量及血液的稀釋倍數(shù)充分考慮進(jìn)去，作為重要的設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。在對(duì)血液進(jìn)行稀釋時(shí)，應(yīng)按照稀釋比例（1∶N），將血液放入到稀釋液中形成血液細(xì)胞稀釋標(biāo)本，以流動(dòng)檢測(cè)的方法測(cè)出一定量（V）的稀釋標(biāo)本中的血細(xì)胞數(shù)（T），經(jīng)換算后得出血液中的血細(xì)胞濃度 L（L=T×N/V）。當(dāng)稀釋的倍數(shù)過(guò)高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致一定測(cè)量容量中血細(xì)胞的數(shù)量過(guò)少，這樣會(huì)對(duì)血液細(xì)胞檢驗(yàn)的測(cè)量精度造成嚴(yán)重影響。當(dāng)稀釋的倍數(shù)過(guò)低時(shí)，會(huì)導(dǎo)致血液細(xì)胞排隊(duì)經(jīng)過(guò)傳感器，造成血液細(xì)胞的重合缺損?；诖耍m宜的稀釋倍數(shù)是提高血液細(xì)胞檢測(cè)質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。從目前情況來(lái)看，HGB以及WBC的稀釋倍數(shù)最宜控制在1∶250左右，PLT 以及RBC的稀釋倍數(shù)應(yīng)盡量控制在1∶10000～1∶30000。

2.5 血液細(xì)胞標(biāo)本的儲(chǔ)存

抗凝劑因使用濃度以及使用時(shí)間的不同，會(huì)對(duì)血細(xì)胞的形態(tài)造成嚴(yán)重影響。國(guó)內(nèi)外研究顯示，用EDTA抗凝劑對(duì)靜脈血液標(biāo)本進(jìn)行抗凝時(shí)，在血液標(biāo)本采集后的5min內(nèi)或者是30min以后，在室溫下保存8h內(nèi)對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，可以獲得最佳的檢驗(yàn)結(jié)果。如果不需要對(duì)白細(xì)胞或者血小板進(jìn)行分類的確切數(shù)據(jù)，血液細(xì)胞標(biāo)本在2～8℃的環(huán)境下能保存24h。預(yù)稀釋的血液細(xì)胞標(biāo)本應(yīng)盡可能在制備之后的10min內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。如果在血液細(xì)胞稀釋液中添加有細(xì)胞穩(wěn)定劑，預(yù)稀釋血液標(biāo)本在常溫下保存的時(shí)間也不可以超過(guò)4h。

3 血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

3.1 制定完善的質(zhì)量控制機(jī)制

為了更好地提高血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量，現(xiàn)代化的醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)以先進(jìn)的質(zhì)量控制以及管理理念為指導(dǎo)，建立健全實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)量控制機(jī)制，明確各工作崗位的檢驗(yàn)人員的職責(zé)權(quán)限以及合理的獎(jiǎng)懲制度。此外，還要制定嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室操作標(biāo)準(zhǔn)，以規(guī)范實(shí)驗(yàn)人員的檢驗(yàn)操作，使血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作的質(zhì)量控制有據(jù)可循，為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制提供技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 優(yōu)化血液細(xì)胞檢驗(yàn)的工作流程

優(yōu)化血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作的流程，可以有效提高血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量，為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制奠定基礎(chǔ)。醫(yī)院在對(duì)血液細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制時(shí)，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)到檢驗(yàn)工作流程對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量的提高以及質(zhì)量控制的重要性。醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)根據(jù)本院的血液細(xì)胞檢驗(yàn)設(shè)備為基礎(chǔ)，優(yōu)化檢驗(yàn)工作流程，促進(jìn)醫(yī)院對(duì)血液細(xì)胞檢驗(yàn)質(zhì)量控制的順利開展。

3.3 血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作質(zhì)量控制

血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作主要包括血液細(xì)胞標(biāo)本采集工作、血液細(xì)胞標(biāo)本的稀釋工作、血液細(xì)胞標(biāo)本儲(chǔ)存工作等。醫(yī)療機(jī)構(gòu)必須要針對(duì)設(shè)備的具體情況對(duì)血液細(xì)胞各個(gè)工作內(nèi)容進(jìn)行質(zhì)量控制，確保血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作的質(zhì)量。

3.4 血液細(xì)胞檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制

血液細(xì)胞檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制對(duì)血液細(xì)胞的檢驗(yàn)質(zhì)量有著重要的決定作用，在進(jìn)行細(xì)胞檢驗(yàn)前，應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確地校驗(yàn)，并嚴(yán)格按照操作規(guī)程要求進(jìn)行操作，以此使檢驗(yàn)質(zhì)量滿足臨床診斷的要求，保證血液檢驗(yàn)結(jié)果的精確度。

3.5 血液分析儀的質(zhì)量控制

①血液分析儀細(xì)胞計(jì)數(shù)的最合適溫度應(yīng)保持在18～22℃之間，當(dāng)溫度過(guò)高或者過(guò)低時(shí)，都可能會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果有嚴(yán)重影響。②在打開血液分析儀后，首先要做實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)控，并參與實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)評(píng)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的質(zhì)量控制是血液細(xì)胞檢驗(yàn)質(zhì)量控制的最重要的環(huán)節(jié)，其能確保血液分析儀測(cè)量值的穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量測(cè)評(píng)能有效解決實(shí)驗(yàn)室之間的協(xié)調(diào)以及檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的問(wèn)題，保證成批血液標(biāo)本測(cè)量記過(guò)不會(huì)產(chǎn)生明顯誤差的重要環(huán)節(jié)。③嚴(yán)格依照實(shí)驗(yàn)室操作程序?qū)x器進(jìn)行操作，并采取相應(yīng)的保養(yǎng)措施對(duì)儀器進(jìn)行定期保養(yǎng)、清洗及濃縮沖洗，避免儀器發(fā)生堵塞現(xiàn)象。④根據(jù)參數(shù)變化以及直方圖確定細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性，所分析的準(zhǔn)確性不高時(shí)，必須要用顯微鏡進(jìn)行復(fù)查。⑤分析參數(shù)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的關(guān)系，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床分析相比較，判斷二者是否相符，如果出現(xiàn)異常結(jié)果，應(yīng)主動(dòng)與臨床實(shí)踐相聯(lián)系，以做出正確的判斷。

3.6 數(shù)據(jù)分析后的質(zhì)量控制

要定期對(duì)血液細(xì)胞的檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。臨床的醫(yī)護(hù)人員一般對(duì)患者的病情變化以及病程最為了解，因而必須要征求臨床醫(yī)護(hù)人員的意見，判斷檢驗(yàn)結(jié)果的正確性，并針對(duì)醫(yī)護(hù)人員提出的要求不斷改進(jìn)檢驗(yàn)工作，以提高血液細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果的整體質(zhì)量，確保檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床診斷、治療提供準(zhǔn)確、科學(xué)的數(shù)據(jù)。

4 結(jié)束語(yǔ)

影響臨床血液細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果的原因較多，要想取得科學(xué)、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的每個(gè)步驟都應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)督及管理，確保實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)操作規(guī)范化。加大對(duì)實(shí)驗(yàn)室血液細(xì)胞檢驗(yàn)注意事項(xiàng)的重視，提高對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制方面的分析、判斷、計(jì)算以及表達(dá)能力，要建立健全完整的質(zhì)量控制機(jī)制，建立實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員獎(jiǎng)懲制度，明確其職責(zé)權(quán)限，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性以及準(zhǔn)確性，為臨床診斷、治療以及療效評(píng)價(jià)提供可靠、有效、準(zhǔn)確的信息[1-5]。

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