姜 勝，于世明，譚麗娟，范宏剛，王洪斌

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030）

經(jīng)過前期研究課題組開發(fā)出小型豬復(fù)合麻醉劑（XFM）［1］，近期課題組又開發(fā)出了以阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等為主要成分的小型豬特異性麻醉頡頏劑，保障XFM的安全性及可控性。本試驗(yàn)通過檢測(cè)小型豬血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）濃度的變化，判斷小型豬特異性麻醉頡頏劑對(duì)機(jī)體的氧化損傷程度，進(jìn)而評(píng)價(jià)小型豬特異性麻醉頡頏劑對(duì)XFM的特異性頡頏效果，以及小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑組方的合理性及臨床安全性。

具有高度活性的氧自由基分子不僅能造成蛋白質(zhì)、DNA損傷，誘發(fā)癌癥和囊性纖維化［2-3］，還能誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，使多不飽和脂類發(fā)生裂解，膜結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙［4］，并產(chǎn)生能夠反映脂質(zhì)過氧化的程度，且被認(rèn)為是檢測(cè)組織過氧化的生物學(xué)指標(biāo)的 MDA［2，5］。不穩(wěn)定自由基 NO，與正超氧陰離子（O-2）作用時(shí)可形成過氧化亞硝基陰離子（ONOO-），并進(jìn)而分解為毒性極強(qiáng)的羥自由基（OH-）和 NO-2自由基［6］，在體內(nèi)引起多方面的損害如脂質(zhì)過氧化［7］。SOD是機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化酶促防御系統(tǒng)中的一個(gè)重要酶，它不僅能有效清除生物氧化產(chǎn)生的超氧陽(yáng)離子自由基，并有終止自由基鏈鎖反應(yīng)的作用［8］，還能減少 ONOO-形成［9］，故可減輕NO的不利作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬14頭，16～18月齡，體重49.8±5.2kg，購(gòu)于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)用小型豬繁育基地，臨床檢查健康，營(yíng)養(yǎng)狀況良好。

1.2 試驗(yàn)材料 XFM（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號(hào)：20100821）；小型豬特異性麻醉頡頏劑（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號(hào)：20100824）。NOS、NO及考馬斯亮藍(lán)蛋白含量測(cè)定試劑盒，購(gòu)自南京建成生物工程研究所；AvantiTM30Centrifuge高速冷凍離心機(jī)、7230分光光度計(jì)等。

1.3 試驗(yàn)方法 14頭小型豬禁食12h，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組7頭。兩組動(dòng)物麻醉之前均采前腔靜脈空白血（記為0min），采血完成后立即注射XFM并計(jì)時(shí)。至30 min時(shí)，采前腔靜脈血（記為30min），此后試驗(yàn)組立即注射小型豬特異性麻醉頡頏劑，對(duì)照組則注射等量生理鹽水。至1、2、8h和1、3、7d時(shí)分別進(jìn)行前腔靜脈采血，并記錄各項(xiàng)生理反射指標(biāo)的恢復(fù)時(shí)間，直至兩組動(dòng)物均能行走為止。采集的血樣室溫靜置1h，3000r／min離心分離血清，置于-80℃冰箱內(nèi)冷凍保存，待檢。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 蘇醒時(shí)間 如表1所示，在注射頡頏劑后，試驗(yàn)組內(nèi)各生物反射指標(biāo)的恢復(fù)時(shí)間比對(duì)照組短且差異顯著（P＜0.05）。

2.2 抗氧化能力測(cè)定結(jié)果 具體結(jié)果見表2。注射麻醉劑后，小型豬血清MDA及SOD呈現(xiàn)無規(guī)則變化，且變化趨勢(shì)不明顯（P＞0.05），血清NOS及NO在注射XFM 30min后極明顯降低（P＜0.01），然后逐漸回升，60min后恢復(fù)正常。小型豬在注射XFM頡頏劑后與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表1 兩組蘇醒時(shí)間比較（n＝7）

表2 抗氧化能力監(jiān)測(cè)結(jié)果（n＝7）

3 討論

從蘇醒時(shí)間看，本試驗(yàn)表明，注射頡頏劑后，小型豬生理反射恢復(fù)的時(shí)間短，蘇醒效果明顯，能夠達(dá)到較快蘇醒的目的。

許多麻醉藥物的效應(yīng)和毒性均可抑制酶的活性，促使氧自由基、脂質(zhì)過氧化物（Lipid peroxide，LPO）、MDA 等體液因子的釋放增加［10］，因此需要拮抗劑抑制麻醉藥的中樞抑制作用，控制麻醉時(shí)間和濃度，逆轉(zhuǎn)麻醉藥的不良作用和對(duì)機(jī)體的損傷。從抗氧化結(jié)果看，小型豬血清SOD、MDA指標(biāo)變化均無明顯趨勢(shì)，這說明小型豬特異性麻醉頡頏劑沒有產(chǎn)生明顯的過氧化損傷，分析原因可能與納洛酮有一定關(guān)系：國(guó)外一些研究顯示，納洛酮在細(xì)胞水平具有抗休克作用，主要是因?yàn)槠渚哂蟹€(wěn)定溶酶體膜，明顯抑制嗜中性粒細(xì)胞釋放O-2的能力［11］，并且體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，納洛酮能抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的速率，尤其是可能在鐵離子催化的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)中充當(dāng)抗氧化劑［12］。小型豬血清NO及NOS在麻醉后30 min顯著降低，然后逐漸回升，從這一過程中來看與徐瑞芬等［13］報(bào)道的全麻能明顯抑制NOS的活性，降低NO的生成這一結(jié)果一致。由此分析，催醒過程中阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等特異性拮抗劑［14］與XFM競(jìng)爭(zhēng)同一受體，從而拮抗麻醉劑的藥理作用，并沒有引起機(jī)體產(chǎn)生大量自由基，對(duì)小型豬的抗氧化能力沒有明顯影響。

4 結(jié)語

綜合試驗(yàn)結(jié)果表明，小型豬特異性麻醉頡頏劑能夠很好的拮抗XFM麻醉效果，產(chǎn)生較快的蘇醒效果，在催醒過程中對(duì)小型豬沒有產(chǎn)生明顯的過氧化損傷，臨床安全性較好。

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