孫慶弟 王京昆 陸 瑛

1．云南省藥物研究所，云南 昆明 650101;2．昆明醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650101

扶正固本膏是中藥復(fù)方制劑，具有培元固本、扶正祛邪之功效，主治腎陽不足。臨床用于腎陽不足引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲減退、夜尿頻多等癥。本研究采用正常小鼠連續(xù)灌胃給予扶正固本膏15天，觀察其對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。

1 實驗材料

1.1 供試品

扶正固本膏，棕褐色稠厚半流體，批號20091227，10－15天為一個療程。供試品輔料對照:棕黃色流體，批號:20100201。由本所科研管理部提供;給藥時，高劑量組直接使用，低、中劑量組用滅菌純化水配成約0.34g/ml、0.68g/ml的藥液，使用前充分混勻。

1.2 實驗動物

SPF級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重29～32g，由昆明醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，許可證號:SCXK(滇)2005－0008，發(fā)證單位:云南省科學(xué)技術(shù)廳。

1.3 環(huán)境條件

溫度范圍:20～26℃ (日溫差范圍≤4℃);濕度范圍:40%～70%;換氣次數(shù):10－15次/h;氣流速度:0.1－0.2m/s;壓強梯度:20Pa;空氣潔凈度:10000級;氨濃度(動態(tài)):0mg/m3;照明:12h:12h明暗交替;動物照度:18Lx;工作照度:376Lx;噪音:52dB。實驗動物環(huán)境及設(shè)施檢測報告編號:J201003031，檢測單位:云南省醫(yī)療器械檢定所。實驗動物使用許可證:SYXK(滇)2005－0001，發(fā)證單位:云南省科學(xué)技術(shù)廳。

1.4 實驗儀器 L104型電子分析天平，梅特勒－托利多儀器 (上海)有限公司;JJ2000型電子天平，常熟雙杰測試儀器廠;1500全波長酶標(biāo)儀，芬蘭Thermo electron corporation。

1.5 統(tǒng)計方法 用SPSS17.0 for Windows軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料正態(tài)分布、方差齊用單因素方差分析，偏態(tài)分布或方差不齊用秩和檢驗。統(tǒng)計結(jié)果以x±SD表示，檢驗水準(zhǔn)a=0.05。

2 分組及劑量

用Excel進(jìn)行隨機區(qū)組設(shè)計法，分為陰性對照組、輔料對照組、扶正固本膏低、中、高劑量組，每組10只，雌雄各半。陰性對照組給予滅菌純化水，輔料對照組給予扶正固本膏輔料，給藥組按6.8、13.6、27.2g/kg給予扶正固本膏，各組均按20ml/kg連續(xù)給藥15天。

3 方法與結(jié)果

SPF級昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機分為陰性對照組、輔料對照組、扶正固本膏低、中、高劑量組，每組10只。陰性對照組給予滅菌純化水，輔料對照組給予扶正固本膏輔料，給藥組按6.8、13.6、27.2g/kg給予扶正固本膏，連續(xù)給藥15天。末次給藥60min，按0.1 ml/10 g小鼠尾靜脈注射20%印度墨水，分別于注射后2、12 min用毛細(xì)管于小鼠眼眶靜脈叢取血10ul置于2ml 0.1%NaCO3溶液中混勻，用1500全波長酶標(biāo)儀于波長680 nm處測定吸光度 (A);頸椎脫臼處死小鼠取肝、脾、胸腺稱質(zhì)量，按公式計算廓清指數(shù) (K)、吞噬系數(shù) (a)和臟器系數(shù)。K=(lgA1－lgA2)/(t2－t1)=(lgA1－lgA2)/10，α =K1/3×體質(zhì)量/(肝質(zhì)量+脾質(zhì)量)，臟器系數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量［1］。

表1 對小鼠體重的影響 (n=10)

表2 對小鼠免疫器官的影響 (n=10)

表3 對小鼠碳粒廓清的影響 (n=10)

表1顯示，連續(xù)灌胃給予小鼠扶正固本膏15天，對小鼠體重?zé)o明顯影響，各組動物體重組間比較無顯著性差異(P＞0.05);表2顯示，中、高劑量組脾臟指數(shù)與陰性對照組比較有顯著性差異 (P＜0.05/P＜0.01)，說明扶正固本膏可增加小鼠脾臟指數(shù);表3顯示，低、中、高劑量組廓清指數(shù)及吞噬系數(shù)與陰性對照組比較有顯著性差異 (P＜0.05/P＜0.01)，說明扶正固本膏能增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能，加速碳粒的清除。

4 討論

隨著社會的發(fā)展，現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，人們面臨的壓力也日益沉重，激烈的社會競爭使人心理應(yīng)激明顯增多。先天原因，后天原因:藥誤、久病、七情所傷、房勞、飲食等多種因素導(dǎo)致人群出現(xiàn)腎陽虛。

扶正固本膏具有培元固本、扶正祛邪之功效，主治腎陽不足。臨床用于腎陽不足引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲減退、夜尿頻多等癥。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎為先天之本，腎藏精是腎的主要生理功能之一。精是構(gòu)成人體的基本物質(zhì)，也是人體各種功能活動的物質(zhì)基礎(chǔ)。精能化氣，腎精所化之氣稱為“腎氣”。腎的精氣盛衰，關(guān)系到生殖和生長發(fā)育的能力。故古代醫(yī)家認(rèn)為腎為五臟之本［2］。腎臟有病必影響其他臟腑之功能，反之臟腑有病，久必及腎。因此，腎氣盛衰決定著人體的健康狀況。腎氣充盛，則五臟六腑功能正常，人體正氣充盛則健康無?。?］。所謂正氣就是人體的功能活動和對外界環(huán)境的適應(yīng)能力，是抗病能力和康復(fù)能力，是機體識別和排除外源性異物維持自身生理平衡與穩(wěn)定的能力。而現(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為，人體的免疫功能表現(xiàn)為防御、自穩(wěn)、監(jiān)視3個方面。因此，正氣與現(xiàn)代免疫理論密切相關(guān)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎為先天之本，為正氣之根，說明了腎與免疫功能關(guān)系更為密切。大量研究表明，腎虛患者常有免疫功能的紊亂，而補腎藥有一定的免疫調(diào)節(jié)作用［4］。

人體免疫是人體對外界的病原微生物等的防御機能，或者說是防御系統(tǒng)。在正常情況下，它能夠保證人體不受外界病原微生物的侵害。通常說的人體免疫力就是指人體的免疫系統(tǒng)抵御外來病原微生物等侵害的能力。在人體免疫力正常的情況下，人體自身能夠抵御相當(dāng)多的病菌的侵害，避免對人體造成損傷［5］。

機體的免疫系統(tǒng)是由非特異性免疫、體液免疫和細(xì)胞免疫共同構(gòu)成的防御系統(tǒng)，它通過識別、吞噬、呈遞和分泌細(xì)胞因子或形成抗體來清除外來病原微生物和體內(nèi)的異常細(xì)胞，對于維護體內(nèi)環(huán)境具有十分重要的意義［6］。脾、胸腺是小鼠重要的免疫器官，觀察其質(zhì)量的變化，可以直接地反應(yīng)小鼠免疫功能的變化;碳粒廓清實驗是通過靜脈注射一定大小的顆粒物質(zhì)，其迅速被肝、脾等器官內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬而使其在血漿濃度降低，從而可以了解整個單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能［7］。

脾在胚胎期是重要的造血器官，出生后造血功能停止，但仍然是血細(xì)胞尤其是淋巴細(xì)胞的再循環(huán)場所，脾還是發(fā)生免疫應(yīng)答的重要基地。此外，脾還有兩個顯著的特點:(1)產(chǎn)生抗體，脾富含B細(xì)胞和漿細(xì)胞，因此是全身最大的抗體產(chǎn)生器官，尤其是產(chǎn)生IgM和IgG，其數(shù)量對調(diào)節(jié)血清抗體水平起很大作用;(2)分泌體液因子，脾可以合成補體 (C5和C8等)和備解素等重要的免疫效應(yīng)分子。長期以來人們對胸腺的功能不甚了解，直到60年代初Miller和Good分別用切除新生小鼠和家兔胸腺的辦法證明了胸腺的免疫功能。胸腺能訓(xùn)化T細(xì)胞、分泌胸腺激素、促進(jìn)肥大細(xì)胞發(fā)育、調(diào)節(jié)機體的免疫平衡，維持自身的免疫穩(wěn)定性，是重要的中樞免疫器官，也是T淋巴細(xì)胞分化成熟的場所。

本實驗結(jié)果顯示，扶正固本膏可增加正常小鼠脾臟質(zhì)量，能增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能，加速碳粒的清除。提示，扶正固本膏對小鼠體液免疫和非特異性免疫均有一定增強作用。

［1］岑曉江，侯思名等．海楓藤水煎液對小鼠免疫功能的影響［J］．細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2011，27(6)．

［2］沈自尹．從腎本質(zhì)研究到證本質(zhì)研究的思考與實踐［J］．上海中醫(yī)藥雜志，2000(4):44－47．

［3］顏亭祥，李震，陶漢華等．“勞倦過度房室不節(jié)”腎陽虛模型小鼠免疫功能的觀察［J］．山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2007，31(1):79－81．

［4］魯珽，潘永明．抗衰老片對實驗性腎陽虛小鼠免疫功能的影響［J］．甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，28(2)．

［5］徐志毅．復(fù)方枸杞袋泡茶對免疫力低下小鼠免疫功能的影響［J］．臨床合理用藥，2011，4(3C):27．

［6］韓峰，陳建萍，謝婷等．益甘顆粒劑對小鼠免疫功能的影響［J］．時珍國醫(yī)國藥，2004，15(4):124－126．

［7］吳克楓等．不同劑量環(huán)磷酰胺對小鼠的免疫毒性研究［J］．貴州醫(yī)藥，1999，23(2):92－93．