張翠蘭
湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院,湖北 恩施 445000
烏金七為馬兜鈴科短尾細(xì)辛Asarum caudigerellum C.Y.Cheng et C.S.Yang的干燥全草,為恩施民族藥物,味辛、苦,性溫。具祛風(fēng)散寒,溫肺化痰,止痛之功效。主治風(fēng)寒頭痛,痰飲咳喘,胃寒痛,腹痛,齒痛,風(fēng)濕痹痛,跌打損傷。[1]為給臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)和進(jìn)一步開發(fā)利用這一民族藥物資源,本實(shí)驗(yàn)對(duì)烏金七進(jìn)行了初步的抗炎作用研究。
1.1 藥材 烏金七由湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院藥劑科提供。
1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠,18~22g,湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.3 藥物與試劑 二甲苯 (AR,北京化學(xué)試劑廠);阿司匹林 (南京第二制藥廠,批號(hào):200110401);0.6%醋酸溶液的配制:取0.6ml冰醋酸 (AR,武漢市江水化學(xué)試劑有限責(zé)任公司)加入100ml蒸餾水中攪勻即得,備用;2%伊文思藍(lán) (Ffluka進(jìn)口分裝,上?;瘜W(xué)試劑供應(yīng)站經(jīng)銷)生理鹽水的配制:取2g伊文思藍(lán)加入100ml生理鹽水中攪勻即得,備用;其它化學(xué)試劑均為分析純。
1.4 供試藥液的制備 取適量烏金七飲片,加水煎煮2次,每次60min,合并煎液,濃縮,G4垂熔玻璃漏斗濾過,使成1g∕ml水溶液。冷藏備用。
1.5 儀器 TU-1901紫外分光光度儀 (北京普析通用儀器有限公司);CQ-250超聲波清洗器 (上海弘興超聲電子儀器有限公司);BS224S型電子分析天平 (北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);6mm打孔器。
1.6 二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn) 按文獻(xiàn)[2]取18~20g小鼠40只,隨機(jī)分為4組,每組10只。A組 (生理鹽水組,給于等體積的生理鹽水);B組 (阿司匹林組,給藥劑量為0.2g/kg);BH組 (烏金七高劑量組);BL組 (烏金七低劑量組);高、低劑量組按10g/kg、5g/kg分別灌胃烏金七水溶液。各組灌胃給藥每天一次,連續(xù)3天,于最后一次給藥30min后,將二甲苯0.3ml涂于小鼠右耳正反兩面,15min后頸錐脫臼處死,用直徑6mm打孔器在左右兩耳廓相同部位打孔取樣,及時(shí)秤重,以左右耳片重量之差為腫脹度,按下式計(jì)算抑制率,并與對(duì)照組進(jìn)行比較。抑制率=(對(duì)照組腫脹度-給藥組腫脹度)÷對(duì)照組腫脹度×100%
1.7 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn) 按文獻(xiàn)[3]取18~20g昆明種小鼠40只,分組及給藥方法同上。末次給藥30min后尾靜脈注射2%的伊文思藍(lán)生理鹽水0.01ml/g,立即腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只,20min后,脫頸處死小鼠,剪開腹腔,用5ml生理鹽水沖洗腹腔數(shù)次,收集洗滌液,2500r/min離心5min,取上清液于590nm處比色,測(cè)定光密度值 (OD值)。
1.8 統(tǒng)計(jì)方法 各組數(shù)據(jù)以x±S表示,組間差異比較用t檢驗(yàn),由spss11.5系統(tǒng)完成。
2.1 烏金七對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見烏金七高、低劑量組對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有抑制作用,與生理鹽水組比較差異有顯著性,烏金七高劑量組與阿司匹林組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05),表明烏金七對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有很好的抑制作用,其作用強(qiáng)度與劑量有關(guān),劑量越大作用越明顯。結(jié)果見表1。
2.2 烏金七對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見烏金七高、低劑量組和阿司匹林組對(duì)0.6%醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性均有抑制作用,與生理鹽水組比較差異有顯著性,烏金七高劑量組與阿司匹林組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p>0.5),表明烏金七對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性有很好的抑制作用,其作用強(qiáng)度與劑量有關(guān),劑量越大作用越明顯。結(jié)果見表2。
表1 烏金七對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響 (n=10x±S)
表2 烏金七對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 (x±S)
二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)和醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)是研究藥物抗炎作用的常用實(shí)驗(yàn)方法,二甲苯可引起耳廓急性炎癥水腫,醋酸可引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加。從抗炎結(jié)果看,烏金七能抑制二甲苯誘發(fā)的小鼠耳廓腫脹和醋酸所致的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高,當(dāng)給藥劑量為10g/kg時(shí)與給藥劑量為0.2g/kg阿司匹林組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明其作用強(qiáng)度相近,因此烏金七具有較好的抗炎作用。其作用機(jī)制推測(cè)是通過抑制毛細(xì)血管的擴(kuò)張,降低通透性,使?jié)B出減少以達(dá)到抗炎作用。
[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草 (第3卷) [M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:487.
[2]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:719.
[3]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:305.