余 淵

湖北省黃石市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，湖北 黃石 435002

番茄紅素 (lycopene)是番茄中的紅色素，是胡蘿卜素的母體化合物，是迄今為止自然界中被發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)抗氧化劑之一［1］。番茄紅素可以有效地清除人體內(nèi)的自由基，使機(jī)體的器官和組織免受傷害，增強(qiáng)機(jī)體免疫力［2］。黃芪(Leguminosae)有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效?，F(xiàn)代藥理研究證明，黃芪有顯著的免疫增強(qiáng)作用。近年將番茄紅素與黃芪常常配伍使用 (如保健食品番茄紅素膠囊)，本實(shí)驗(yàn)探討了番茄紅素黃芪顆粒對(duì)氣虛小鼠免疫功能的影響，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

昆明種小白鼠，體重20±2 g，購(gòu)于湖北省疾控中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心 (批號(hào):SCXK(鄂)2008－0005)。番茄紅素 (Lycored公司生產(chǎn)，110363)，黃芪顆粒 (江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào):1106196)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與給藥

100只小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型組、番茄紅素黃芪高劑量組、番茄紅素黃芪中劑量組、番茄紅素黃芪低劑量組共5組。每組20只，10只供對(duì)臟器指數(shù)及血清溶血素形成的影響實(shí)驗(yàn)使用，另外10只供小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定實(shí)驗(yàn)使用。按照60kg人體計(jì)算，藥物用量分為番茄紅素黃芪高劑量組 (黃芪30g、番茄紅素150mg)、番茄紅素黃芪中劑量組 (黃芪15g、番茄紅素75mg)、番茄紅素黃芪低劑量組 (黃芪3g、番茄紅素15mg)，小鼠用量按體重計(jì)算，為處方中人體用量的10倍。用純凈水稀釋成高、中、低濃度分組灌胃，空白對(duì)照組只灌胃給予等量的純凈水，每天1次，灌胃給藥14d，第5～10d，除空白組外，給藥物同時(shí)，皮下注射氫化可的松(50mg/kg)，后4d停止造模，空白組和模型組給于生理鹽水，其他各組給予藥物。

1.2.2 對(duì)臟器指數(shù)的影響［3］

治療組末次給藥后，小鼠稱重，頸椎脫臼處死，解剖，稱取脾臟、胸腺濕重，計(jì)算臟器指數(shù)。

臟器指數(shù)=臟器重量 (mg)/體重 (g)。

1.2.3 對(duì)血清溶血素形成的影響［4］

給藥第12d小鼠腹腔注射5% 雞紅細(xì)胞生理懸液0.2 mL進(jìn)行免疫，第14天取血分離血清。取血清0.2 mL加入裝有1 mL生理鹽水的反應(yīng)管中，隨后加入5% 雞紅細(xì)胞0.5 ml和10% 豚鼠血清1 mL。37℃溫育30 min，移至冰上終止反應(yīng)，離心取上清液1 mL加都氏試劑3 mL，搖勻放置10min，用分光光度計(jì)于540 nm波長(zhǎng)讀取吸光度值。

1.2.4 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定［3］

小鼠第14d給藥后腹腔注射1%雞紅細(xì)胞溶液，1～1.5h后將小鼠斷椎處死，腹腔注射1ml生理鹽水，按摩腹腔，在腹部中央將皮膚剪一小口，吸取約0.2ml腹腔液滴于載玻片上，水平涂片，將玻片放在濕盒內(nèi)，37℃孵育30min后，用生理鹽水沖洗，自然晾干后用Giemsa－wright染液染5min。再用生理鹽水淋洗。晾干后油鏡下觀察，計(jì)數(shù)200個(gè)巨噬細(xì)胞中吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)。

吞噬百分率=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/200巨噬細(xì)胞。

吞噬指數(shù)=被吞噬雞紅細(xì)胞數(shù)/200巨噬細(xì)胞。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)臟器指數(shù)的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組胸腺和脾臟臟器指數(shù)均明顯減低 (P＜0.01)。與模型對(duì)照組相比較，番茄紅素黃芪高、中劑量組胸腺和脾臟臟器指數(shù)均明顯增加 (P＜0.01，P＜0.05)，番茄紅素黃芪低劑量組胸腺和脾臟臟器指數(shù)有增加，但差異不明顯 (P＞0.05)，見表1。

表1 各組小鼠胸腺和脾臟臟器指數(shù)比較 (mg/g，x±SD)

2.2 番茄紅素黃芪對(duì)血清溶血素形成的影響

番茄紅素黃芪對(duì)血清溶血素形成的影響結(jié)果見表2。與空白組比較，模型組溶血素下降明顯 (P＜0.05)。番茄紅素黃芪高、中、低劑量組明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。番茄紅素黃芪高、中劑量組已恢復(fù)到正常水平，與正常組比較，P＞0.05。

表2 番茄紅素黃芪對(duì)血清溶血素形成的影響結(jié)果(x±SD)

2.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定結(jié)果

番茄紅素黃芪對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響結(jié)果見表3。與模型組比較，番茄紅素黃芪各組均能增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能，中、高劑量組效果更明顯，低劑量組P ＜0.05，中、高劑量組P ＜0.01。

表3 番茄紅素黃芪對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 (x±SD)

3 討論

胸腺與脾臟是機(jī)體重要的免疫器官，巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)中最先對(duì)抗原產(chǎn)生反應(yīng)的細(xì)胞之一，巨噬細(xì)胞吞噬功能是反映非特異性免疫功能的常用指標(biāo)之一。溶血素能間接反應(yīng)抗體生成的多少，而抗體是血清殺滅病原體的重要活性物質(zhì)，是體液免疫的標(biāo)志。

番茄紅素和黃芪單用均具有增強(qiáng)免疫的作用，本實(shí)驗(yàn)選用免疫器官、血清溶血素、巨噬細(xì)胞吞噬功能三種測(cè)定免疫功能的方法來研究番茄紅素黃芪配伍對(duì)免疫低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示番茄紅素黃芪顆粒能明顯提高小鼠免疫器官增長(zhǎng)指數(shù)、增加巨噬細(xì)胞吞噬功能、提高血，(3g、15mg)也有調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)為番茄紅素和黃芪增強(qiáng)免疫的臨床應(yīng)用提供了客觀實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］梅曉巖，孟憲軍，梁婧婧．番茄紅素抗氧化活性的研究［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34(11):2315－2317．

［2］張?jiān)氯A，韓婷，蔡頌文．番茄紅素的生理功能及其臨床意義［J］．公共衛(wèi)生與臨床醫(yī)學(xué)，2009，5(3):211－216．

［3］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部．保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范［S］．2003．

［4］羅曉麗，楊侃，孫明．黃芪扶正湯對(duì)免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)功能［J］．中南大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版)，2009，34(6):555－558．