国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

大蒜和生姜提取物體外聯(lián)合抑菌效果的研究

2012-07-03 02:53:40楊夏雨浦淑林
大理大學(xué)學(xué)報(bào) 2012年12期
關(guān)鍵詞:提取液大蒜生姜

陳 映,楊夏雨,浦淑林,周 超,張 雷

(大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,云南大理 671000)

大蒜和生姜均屬于天然食用香辛料,是一類含有各種揮發(fā)性香氣成分,能賦予食品香味的一類天然物質(zhì)。他們除具有增香作用外,還含有多種營(yíng)養(yǎng)成分和藥用價(jià)值,其抗菌作用可被用作保鮮液和防腐劑〔1〕。隨著化學(xué)防腐劑的安全性受到挑戰(zhàn),尋求天然食品防腐劑已引起人們的極大重視。為滿足各種保健食品、綠色食品生產(chǎn)的需求,開發(fā)廣譜、高效、安全、低廉且抑菌性能較好的天然防腐劑具有重要的現(xiàn)實(shí)意義〔2〕。本文通過對(duì)大蒜和生姜兩種提取物的總活性成分進(jìn)行數(shù)種代表菌的抑菌效果研究,為其作為藥物臨床應(yīng)用或作為食品添加劑提供理論參考。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)菌株、試劑和主要儀器標(biāo)準(zhǔn)菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、大腸桿菌(ATCC 25922)和白色念珠菌(ATCC 90029);臨床分離耐藥株:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(1420)和耐β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌(1616)均由大理學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科惠贈(zèng)。

大蒜由大理菜市場(chǎng)購(gòu)買;生姜提取物(生姜精油ZXX1001,超臨界CO2萃取工藝生產(chǎn))由鄭州雪麥龍惠贈(zèng)。營(yíng)養(yǎng)瓊脂(批號(hào):111007)、MH瓊脂(批號(hào):20021101)、MH肉湯(批號(hào):20020903)和沙保弱培養(yǎng)基(批號(hào):20070227)等均由杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)。

恒溫水浴箱(上海一恒科技,DKB-600B)、低速平衡離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠,LDZ5-2)、立式高壓滅菌器(上海博訊,YXQ-LS-50S)、生化培養(yǎng)箱(常州偉嘉儀器,WJ-250B)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海藍(lán)旭,RE-2000)。

1.2大蒜提取物供試樣品的制備稱取50 g大蒜洗凈去皮,搗碎,在40℃下存放讓其自身酵解30 min后,按料液比1∶4的比例加入95%乙醇,在35 ℃下萃取90 min,4 000 r/min離心10 min,取上清液在壓強(qiáng)為0.015 MPa,75 r/min下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮30 min去除乙醇,用濾紙過濾,再用0.2 μm微孔濾膜過濾定容至25 mL,即得到相當(dāng)于2 g原料的提取物/mL的供試樣品原液〔3-5〕。

1.3藥物紙片制備將直徑為6.35 mm的圓形濾紙片,吸水量為20 μL,放入EP管中121℃下滅菌30 min,按每片圓形濾紙片加20 μL稀釋為0.7 g/mL的大蒜提取物原液,制成含大蒜提取物原液14 mg的濾紙片。同法制備含生姜提取液的藥物濾紙片〔6〕。

1.4體外抑菌試驗(yàn)制備0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙海訩-B法〔6〕分別檢測(cè)大蒜和生姜提取物對(duì)標(biāo)準(zhǔn)株ATCC 25923、ATCC 25922和ATCC 90029以及臨床分離株1420和1616的抑菌作用。

1.5最低抑菌濃度測(cè)定以宏量稀釋法〔6-7〕分別檢測(cè)大蒜和生姜提取物對(duì)ATCC 25923、1420和ATCC 90029的最低抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration,MIC)。37 ℃培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果,以完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低提取物濃度為其MIC。

1.6聯(lián)合抑菌試驗(yàn)以微量法檢測(cè)大蒜和生姜提取物對(duì)ATCC 25923、1420和ATCC 90029的聯(lián)合抑菌效果。用無(wú)菌的96孔板,在第1~6行沿X軸方向(從左到右)每孔中依次加入普通肉湯、1/2倍的MIC、1倍的MIC、2倍的MIC、4倍的MIC、8倍的MIC的大蒜提取物各25 μL,以同樣的方法在第A~F列沿Y軸方向(從上到下)每孔中依次加入8倍的MIC、4倍的MIC、2倍的MIC、1倍的MIC、1/2倍的MIC的生姜提取物和普通肉湯各25 μL,加入制備好的0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌懸液50 μL,蓋上消毒玻板,振蕩混勻,放入墊有濕紗布的方盤內(nèi),37℃培養(yǎng)18~24 h,觀察結(jié)果,計(jì)算部分抑菌(Fractional inhibitory concentration,F(xiàn)IC)指數(shù)。FIC指數(shù)=大蒜提取物聯(lián)用時(shí)MIC/大蒜提取物單用時(shí)MIC+生姜提取物聯(lián)用時(shí)MIC/生姜提取物單用時(shí)MIC。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn):FIC指數(shù)≤0.5為協(xié)同作用;0.5~1為相加作用;1~2為無(wú)關(guān)作用;>2為拮抗作用〔6-8〕。

2 結(jié)果

2.1 K-B法檢測(cè)體外抑菌作用的結(jié)果與分析通過t檢驗(yàn)分析表明:大蒜提取物對(duì)各實(shí)驗(yàn)菌株的抑菌作用均強(qiáng)于生姜提取物,其差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,大蒜和生姜提取物對(duì)同一菌株的抑菌作用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;大蒜提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株的抑菌作用由強(qiáng)到弱依次為:ATCC 90029,1420,ATCC 25923,ATCC 25922,1616,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;生姜提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株的抑菌作用由強(qiáng)到弱依次為:ATCC 25923,ATCC 25922,1616,ATCC 90029,1420,其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 大蒜和生姜提取物抑菌效果的比較

2.2最低抑菌濃度檢測(cè)結(jié)果大蒜提取物對(duì)ATCC 25923、1420和ATCC 90029的MIC均小于生姜提取物。見表2。

2.3微量稀釋法檢測(cè)大蒜和生姜提取物聯(lián)合抑菌效果與分析大蒜提取物與生姜提取物對(duì)ATCC 25923的FIC為1.125,其聯(lián)合抑菌效果為無(wú)關(guān)作用,大蒜提取物與生姜提取物對(duì)1420的FIC為0.375,其聯(lián)合抑菌效果為協(xié)同作用,大蒜提取物與生姜提取物對(duì)ATCC 90029的FIC為0.625,其聯(lián)合抑菌效果為相加作用。

表2 大蒜提取物與生姜提取物的MIC

3 討論

大蒜是一種藥食同源的食物,大蒜具有抑菌、殺菌、殺病毒和提高免疫力等功效〔9〕,其主要的功能性成分是大蒜新素、大蒜辣素、蒜氨酸、蒜酶、超氧化物歧化酶〔10〕。生姜具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗腫瘤、抗缺氧、抗病原體、抗?jié)兒透纳凭植垦貉h(huán)等藥理作用〔11〕,生姜的抗菌成分主要是姜黃素和揮發(fā)油,姜黃素不但可以調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞的活性,還可以抑制病毒、真菌、細(xì)菌〔12〕。王琣等的研究也發(fā)現(xiàn)大蒜、生姜復(fù)配提取液的抑菌效果優(yōu)于苯甲酸鈉,用復(fù)配提取液浸泡果蔬后可延長(zhǎng)貨架期,復(fù)配提取液對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、黑曲霉和啤酒酵母菌的抑菌作用均強(qiáng)于其單一提取液〔13〕。

本研究選用耐甲氧西林金黃色葡萄球菌臨床分離株(1420)和非耐藥金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC 25923)作為革蘭陽(yáng)性菌的代表,選用耐β-內(nèi)酰胺酶的大腸桿菌臨床分離株(1616)和非耐藥的大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC 25922)作為革蘭陰性菌的代表,選用白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC 90029)作為真菌的代表,研究結(jié)果表明:大蒜和生姜的提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)中的革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌和真菌均有抑菌活性,對(duì)耐藥細(xì)菌也有很好的抑菌活性;大蒜提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)中的革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌和真菌的抑菌效果都優(yōu)于生姜提取物,它們抑菌作用的不同主要是由于其不同的抗菌成分所造成的。而且大蒜與生姜提取物聯(lián)合使用時(shí),可增強(qiáng)對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌1420和白色念珠菌ATCC 90029的抑菌效果,從而減少藥物用量,節(jié)約成本。在聯(lián)合抑菌試驗(yàn)中,并未發(fā)現(xiàn)大蒜和生姜的提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株有拮抗效應(yīng),這與王琣等對(duì)大蒜和生姜復(fù)配液抑菌效果的研究結(jié)果是一致的〔13〕。本研究通過FIC指數(shù)的測(cè)算,明確了大蒜和生姜復(fù)配提取液對(duì)各實(shí)驗(yàn)菌株的聯(lián)合抑菌效果,為大蒜和生姜抑菌制品的聯(lián)合使用及其在臨床和食品防腐劑的開發(fā)應(yīng)用方面提供了更進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)室王濤老師、藥學(xué)院有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室李龍星老師和病原生物學(xué)研究生劉蓉華同學(xué),對(duì)本研究給予了大力幫助,謹(jǐn)致謝意。

〔1〕江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典:下冊(cè)〔M〕.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1977:25-70.

〔2〕馬同鎖,張紅兵,劉月英,等.十三種天然香辛料的抑菌作用的研究〔J〕.山西食業(yè),2005,16(1):8-10.

〔3〕曾東方,陳玢,曾麟,等.大蒜素對(duì)三種農(nóng)作物病原真菌的抑制作用〔J〕.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,51(11):2248-2249.

〔4〕薛福連.大蒜素提取技術(shù)〔J〕.杭州食品科技,2003(3):23-24.

〔5〕時(shí)威,張巖,白陽(yáng),等.大蒜素的抑菌作用及其穩(wěn)定性〔J〕.研究食品與發(fā)酵,2011,47(3):76-78.

〔6〕倪語(yǔ)星,尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011.

〔7〕孟小亮,田甜,賀中華,等.MIC法測(cè)定9種抗生素對(duì)不同血清型副溶血孤菌的抑菌作用〔J〕.齊魯漁業(yè),2009,26(6):24.

〔8〕姚火春.獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)〔M〕.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2004.

〔9〕劉紫全,黃群蓮,何光風(fēng).大蒜的藥用研究〔J〕.食品與藥品,2006,8(8):24-26.

〔10〕張柯,張浩玉.大蒜的功能性成分及保健功能〔J〕.廣西輕工業(yè),2010(9):3-4.

〔11〕劉雪梅.生姜的藥理作用研究進(jìn)展〔J〕.中成藥,2002,24(7):539.

〔12〕鄧開野,周海鈺,邢盼盼.生姜的抗菌及抗氧化作用的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)調(diào)味品,2012,37(2):28-30.

〔13〕王珺,吳曉,霍乃蕊.大蒜、生姜復(fù)配提取液抑菌防腐及其對(duì)果蔬保鮮效果的研究〔J〕.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2011(2):363.

猜你喜歡
提取液大蒜生姜
種植大蒜要注意啥
夏吃生姜益健康
亞麻木脂素提取液滲透模型建立與驗(yàn)證
大蒜養(yǎng)生法
金橋(2018年1期)2018-09-28 02:24:48
地龍生姜平喘
特別健康(2018年9期)2018-07-17 15:29:08
種大蒜
防病抑咳話大蒜
海峽姐妹(2018年5期)2018-05-14 07:37:15
穿山龍?zhí)崛∫翰煌兓椒ǖ谋容^
中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:20:06
山香圓葉提取液純化工藝的優(yōu)化
中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:28
生姜拌醋治腿關(guān)節(jié)疼
飲食保健(2017年10期)2017-03-08 04:19:26
即墨市| 旬阳县| 沙雅县| 读书| 大方县| 山东省| 莲花县| 贡山| 将乐县| 台南县| 临清市| 玉田县| 通许县| 剑川县| 调兵山市| 彭山县| 昂仁县| 庆阳市| 鄂尔多斯市| 罗田县| 永善县| 台南县| 原平市| 肃南| 云龙县| 台山市| 赣州市| 石景山区| 特克斯县| 申扎县| 武隆县| 朝阳县| 景洪市| 泰安市| 岗巴县| 张家界市| 托克逊县| 凤城市| 云和县| 田林县| 慈利县|