楊收平，李海英

（江蘇省連云港市東方醫(yī)院：1.內(nèi)科；2.檢驗科 222042）

原發(fā)性肝癌（primary hepatic carcinoma，PHC）是嚴重威脅我國人民健康的惡性腫瘤之一，在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食道癌位于第3位，在部分地區(qū)的農(nóng)村中則僅次于胃癌位于第2位［1］，近年來在我國PHC發(fā)病率還有上升趨勢，肝癌患者的5年生存率不到10%。甲胎蛋白（AFP）是目前全世界應用最廣泛的一種肝癌標志物，2005年美國肝病協(xié)會提出對肝癌高?；颊叩谋O(jiān)測方案，即每6個月進行AFP和超聲檢查。但是應用AFP診斷PHC其敏感度和特異度不高，存在很多不足，容易造成漏診。隨著基因技術、蛋白質(zhì)組學等的飛速發(fā)展，篩選出了一些新的腫瘤標志物，其中以高爾基體蛋白73（GP73）在PHC中的診斷價值最值得期待。本文通過對AFP和GP73在PHC患者血清中的水平進行測定，探討單獨檢測和聯(lián)合檢測對PHC的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2009年1月至2010年9月住院（24例）及門診（17例）PHC患者41例（PHC組），其中，男30例，女11例；年齡32～79歲，平均56.82歲。均經(jīng)病理、B超、CT等檢查，符合中國常見腫瘤診治規(guī)范PHC的診斷標準［2］。同期住院（17例）及門診（15例）的肝硬化患者32例（肝硬化組），其中，男24例，女8例；年齡28～80歲，平均57.25歲。同期健康體檢者共45例（對照組），男29例，女16例；年齡33～75歲，平均59.67歲，排除心肝腎肺等器官病變。

1.2方法

1.2.1標本采集 3組均于清晨空腹采取靜脈血5mL，37℃放置30min后，3 000r/min離心15min，分離血清，－20℃保存待測。

1.2.2測定方法 AFP測定采用化學發(fā)光法，儀器為美國貝克曼公司生產(chǎn)ACCESS全自動化學發(fā)光儀，試劑為儀器配套試劑。GP73測定采用雙抗體夾心ELISA法，儀器為北京普朗新技術有限公司生產(chǎn)NDM－9602G酶標分析儀，試劑由北京熱景公司提供。

1.3統(tǒng)計學處理 應用PEMS3.1軟件處理，實驗數(shù)據(jù)以s表示，組間比較采用t檢驗，性能指標采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.13組AFP和GP73水平比較 PHC組、肝硬化組AFP和GP73水平較對照組均顯著增高（P＜0.05）；PHC組AFP和GP73水平較肝硬化組明顯增高（P＜0.05），見表1。

2.2AFP和GP73對PHC診斷的敏感度及特異度 AFP診斷PHC的敏感度為48.78%，特異度為66.67%；GP73診斷PHC的敏感度為73.17%，特異度為86.67%，GP73在診斷PHC的敏感度和特異度均高于AFP（P＜0.05）。二者聯(lián)合檢測診斷PHC其敏感度為92.68%，特異度為93.33%，敏感度與單測AFP和GP73比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表1 3組血清中AFP、GP73水平比較（s，ng/mL）

表1 3組血清中AFP、GP73水平比較（s，ng/mL）

a：P＜0.05，與對照組比較；b：P＜0.05，與肝硬化組比較。

AFP GP73 PHC組 41 359.23±341.96ab 166.64±88.30組別 n ab肝硬化組 32 34.77±30.05a 82.67±57.49a對照組45 11.01±8.79 47.20±27.60

表2 AFP和GP73對PHC診斷的敏感度及特異度［%（n/n）］

2.3GP73和AFP檢測PHC的 ROC曲線分析 GP73的ROC曲線下面積為0.908，AFP的ROC曲線下面積為0.795。根據(jù)ROC曲線以及“敏感度＋特異度”取最大值的原則，確立GP73用于診斷PHC的臨界值為84.25ng/mL，AFP用于診斷PHC的臨界值為14.29ng/mL。

3 討 論

AFP是一種特殊糖蛋白，它是單一多聚體肽鏈的糖蛋白，在哺乳動物的胚胎期由肝臟實質(zhì)細胞和卵黃囊細胞合成，來源于內(nèi)胚層的胃腸道黏膜細胞也可以少量合成，肝細胞癌變時AFP顯著升高。AFP是目前診斷PHC的首選指標，但是其特異度只有60.00%～75.00%［3］，存在一定的假陽性和假陰性，有27.70%的良性肝病患者血清AFP水平升高，另有文獻報道約有30.00%的肝細胞癌患者AFP不升高，其原因可能是此類癌腫肝細胞分化程度接近正?；蜃冃詨乃莱潭葒乐兀┙M織中結締組織成分過多，以致合成AFP量較低所致［4］。所以僅檢測AFP易造成PHC的漏診和誤診，從而耽誤患者的治療。

GP73是存在于高爾基體的一種跨膜蛋白，Kladney等［5］于2000年首次從人類巨大細胞性肝炎患者肝細胞基因文庫中篩選出一個cDNA克隆，編碼相對分子質(zhì)量為7.3×104糖蛋白，該蛋白的編碼基因位于第9號染色體上，全長3 042bp。提出了在健康人體的肝組織中，GP73主要存在于膽管上皮細胞，是高爾基體順面膜囊上的一種整合膜蛋白，肝細胞中含量很少，在肝硬化、肝癌時GP73從高爾基體順面膜囊上循環(huán)出來并到達細胞內(nèi)體以及細胞表面，其水平明顯增加。進一步的研究證實，GP73可以作為診斷肝細胞癌的一個可靠的標志物［6－7］。Iftikhar等［8］通過研究發(fā)現(xiàn)急性肝炎、肝硬化患者GP73水平明顯增高，認為GP73的表達途徑有兩種：（1）由急性肝細胞損傷觸發(fā)；（2）存在于慢性肝臟疾病的進展過程中。Block等［9］于2005年用HBV感染土撥鼠建立PHC模型，應用糖蛋白組學手段分析了PHC組和正常對照組血清中蛋白表達差異，提出GP73與肝癌之間關系密切。Marrero等［10］通過對352例肝病患者血清行蛋白印跡技術分析，發(fā)現(xiàn)GP73診斷肝癌的敏感度為69.00%，特異度為75.00%，也證實PHC患者血清中GP73水平顯著高于肝硬化患者，其早期發(fā)現(xiàn)PHC的敏感度明顯較AFP高，提示GP73可能成為一種有潛在價值的PHC標記物。Gu等［11］也發(fā)現(xiàn)肝病患者血清GP73水平高于健康人和其他疾病患者。

本文結果發(fā)現(xiàn)PHC組AFP、GP73水平均明顯高于對照組（P＜0.05），表明血清 AFP、GP73是PHC的標志物和診斷的可靠指標，這主要是因為PHC時肝癌細胞合成大量的AFP和GP73，并分泌到血液中，從而引起PHC患者血清中AFP、GP73水平升高。本文肝硬化組的AFP、GP73水平與對照組比較也有所增高（P＜0.05），這與 Kladney等［5］的研究一致。本文通過分析發(fā)現(xiàn)GP73診斷PHC的敏感度為73.17%，特異度為86.67%，較單測AFP診斷PHC的敏感度、特異度高（P＜0.05），也證實了GP73在診斷PHC中的作用優(yōu)于AFP。二者聯(lián)合檢測診斷PHC其敏感度為92.68%，特異度為93.33%。GP73的ROC曲線下面積為0.908，AFP的ROC曲線下面積為0.795，這與文獻［12－14］結果一致。

綜上所述，本文認為血清AFP與GP73聯(lián)合檢測可避免AFP單項檢測出現(xiàn)的漏檢，提高PHC檢測的敏感性，對PHC的早期診斷、早期治療具有重要的臨床價值。

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