陸繼梅 孟建華 安 立 安紅梅
石家莊市中醫(yī)院 河北石家莊 050051
為了研究中醫(yī)外科臨床常用散劑的體外抗菌譜及抗菌力,通過對傳統(tǒng)方、各醫(yī)院的協(xié)議方檢索,在52首方劑中出現(xiàn)的60味中藥,運用臨床藥敏學(xué)檢驗學(xué)方法,對其體外抗菌作用進行細菌學(xué)研究。
本實驗所用的各種中藥材,均由本院中藥房提供。培養(yǎng)基為水解酪蛋白瓊脂;增菌液;菌株來源(標準質(zhì)控菌株):綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌;藥敏紙片,將化學(xué)分析濾紙以打孔機打制成直徑5mm圓片,高壓滅菌備用。
1.2.1 不易研成細末藥材的制備及抑菌實驗
主要為植物性藥材。將單味中藥粗粉碎后取藥粉3g置試管內(nèi),加入蒸餾水浸入后至液體約3ml,經(jīng)高壓滅菌、離心沉淀后使每毫升藥液含藥量相當生藥1g后備用。將菌株涂于M-H平板上,放入藥敏紙片,紙片中心間隔距離大于24mm。每個藥敏紙片滴入藥液5μl,將培養(yǎng)皿放入35℃孵育箱中24h測抑菌環(huán)。
1.2.2 容易研成細末藥材的制備及抑菌實驗
主要為礦物性、脂性藥材。將藥物粉碎過200目細篩得粉劑,無菌處理。取散劑2mg壓制成直徑約5mm的圓片。將菌株涂于M-H平板上,放入藥片,藥片中心間隔距離大于24mm。放入35℃孵育箱中24h測抑菌環(huán)。
1.2.3 抑菌試驗的結(jié)果判定
耐藥:細菌正常生長,無抑制現(xiàn)象,以(-)表示。中介:在藥敏紙片或藥粉片下無菌生長,邊緣為一抑菌環(huán),其直徑小于6mm,以(+)來表示。敏感:抑菌范圍大于6mm,記錄下其直徑;實驗中出現(xiàn)抑菌環(huán)大于24mm,且抑菌范圍連成一片無法測量其抑菌環(huán)的以“>”表示。
1.2.4 MIC及MBC測定
單味中藥及散劑的藥物制備同前。將藥物配制成3mg/ml原液,以倍比稀釋法將其分別稀釋成每毫升含藥量1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg,分裝于無菌試管中,每管2ml,經(jīng)6h培養(yǎng)的標準質(zhì)控實驗菌株懸液0.01ml,植入上述試管。置35℃孵育箱24h。結(jié)果判定:含中藥量最少且無菌生長的稀釋度為該藥對試驗菌的MIC。將無菌生長試管內(nèi)的培養(yǎng)液再接種血瓊脂培養(yǎng)基24h,無細菌生長的含藥量最少的試管為該藥對試驗菌的MBC,用于中藥體外抗菌作用的定量觀察。
無明顯拮抗現(xiàn)象出現(xiàn),有明顯協(xié)同的作用。輕粉、紅粉、硼砂三種中藥在兩實驗藥片之間出現(xiàn)抑菌范圍連片,形成不對稱抑菌環(huán)。篩選的60味中藥中有32種(53%)對實驗的所有臨床菌株均無抑菌作用。植物類中藥抗菌譜窄、抗菌力低。礦物質(zhì)類除輕粉、紅粉、硼砂外,大多數(shù)抗菌譜窄、抗菌力低,甚至沒有抗菌作用。
經(jīng)過抑菌試驗的初步篩選,針對試驗中的抗菌作用強的紅粉、輕粉、硼砂進行了標準菌株的MIC及MBC測定。三種藥物抗菌譜廣,未出現(xiàn)耐藥,抗菌力強,但其MIC及MBC測定高于常用抗生素值,在10~100倍之間。
表1 不易研成細末中藥對臨床菌株的抑菌范圍(單位:mm)
表2 容易研成細末中藥對臨床菌株的抑菌范圍(單位:mm)
表3 紅粉、輕粉、硼砂對標準質(zhì)控菌株的MIC與MBC結(jié)果(單位:mg/ml)
表4 中醫(yī)外科外用散劑對標準質(zhì)控菌株的MIC與MBC結(jié)果(單位:mg/ml)
活血化瘀類藥物抗菌譜廣,抗菌作用弱;礦物質(zhì)類藥材中的龍骨、滑石、石膏無抗菌作用;清熱解毒藥物類抗菌譜窄,抗菌作用差。
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