高詠莉 李國(guó)鋒 王淑紅 李軍

復(fù)方感冒靈片為復(fù)方制劑，主要由金銀花、三叉苦等六味中藥材和對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏三種化學(xué)成分組成。現(xiàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十二冊(cè)，含量測(cè)定項(xiàng)為滴定法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚含量。而處方中以馬來酸氯苯那敏的含量最低，有效控制該成分的投料量及制劑工藝，以保證其含量的穩(wěn)定性及均勻性是非常必要的。本文建立了馬來酸氯苯那敏定量分析方法，并進(jìn)行了含量均勻度檢查，所采用的流動(dòng)相有效改善了色譜峰的拖尾現(xiàn)象，從而保證了定量分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，具體過程如下。

1 儀器與試藥

1.1儀器 XS205電子天平(Sartorius 0.01 mg);LC-20AD(島津)高效液相色譜儀;SPD-M20A(島津)二極管陣列檢測(cè)器。

1.2藥品與試劑 馬來酸氯苯那敏對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào)100047-200606，純度99.7%)。復(fù)方感冒靈片由3個(gè)生產(chǎn)廠家提供共8個(gè)批次樣品。乙腈為色譜純(Merck公司生產(chǎn))，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1對(duì)照品溶液的制備 精密稱取馬來酸氯苯那敏對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml含馬來酸氯苯那敏0.05 mg的溶液，搖勻，即得。

2.2供試品溶液的制備 取本品20片(包衣片除去包衣)，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于馬來酸氯苯那敏1.34 mg)，精密加入三氯甲烷25 ml，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜?0 ml量瓶中，搖勻，即得。

2.3色譜條件 色譜柱:Shiseido C18(5 μm，250 mm×4.6 mm);流動(dòng)相:乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫銨11.5 g，加水適量使溶解，加磷酸1 ml，用水稀釋至1000 ml)(25∶75);流速:1.0 ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng):262 nm;柱溫:30℃。

2.4專屬性實(shí)驗(yàn) 分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各10 μl進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果表明:在此試驗(yàn)條件下，馬來酸氯苯那敏的色譜峰分離良好，且陰性對(duì)照無干擾(見圖2)。

圖1 HPLC色譜圖

2.5方法學(xué)考察 ①線性關(guān)系的考察:精密稱取馬來酸氯苯那敏對(duì)照品適量，用甲醇配制成濃度分別為0.1、0.25、0.5、1.0、2.5 mol/ml的溶液。精密吸取上述對(duì)照品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度(μg)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=8.8883×10-7X-7.8906×10-4，r=0.9999，說明馬來酸氯苯那敏在0.1003 ～2.595 μg內(nèi)線性關(guān)系良好;②回收率:取同一批(廠家A，批號(hào)1002)已知含量的供試品(每片含馬來酸氯苯那敏為標(biāo)示量的94.3%)9份，分別精密加入馬來酸氯苯那敏對(duì)照品，依法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為102.7%，RSD=1.84%(見表1);③精密度:取同一批供試品6份，按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定，結(jié)果重復(fù)性良好，RSD=0.90%(n=6);④穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一份供試品溶液，分別在 0、2、4、6、8、10、12 h 進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積積分值。結(jié)果RSD=0.56%，表明供試液在12 h內(nèi)測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。

2.6樣品測(cè)定 取3個(gè)廠家、共8批樣品，按照“2.3”項(xiàng)下供試品溶液制備方法試驗(yàn)，分別精密吸取供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，依法測(cè)定，結(jié)果見表2。

2.7含量均勻度檢查 取含量測(cè)定結(jié)果合格的1個(gè)批次樣品(廠家A，批號(hào)1002)進(jìn)行均勻度檢查。分別取本品10片，研細(xì)，照“2.2”及“2.3”項(xiàng)下的方法，依法測(cè)定，計(jì)算每片的含量。結(jié)果顯示，馬來酸氯苯那敏的含量均勻性存在一定的差異，含量范圍為84.5% ～105.0%，A+1.80S=18.0。

表1 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果表

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果表

3 討論

3.1文獻(xiàn)曾報(bào)道了幾種流動(dòng)相色譜條件:甲醇-庚烷磺酸鈉醋酸混合液(600∶400)［2］，甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶2.5［3］)，乙腈-1% 冰醋酸溶液(內(nèi)含0.08% 的三乙胺)(50∶50)［4］。按照上述條件試驗(yàn)，馬來酸氯苯那敏色譜峰均有較嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不穩(wěn)定，無法準(zhǔn)確定量。本試驗(yàn)采用乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，結(jié)果顯示，色譜峰形較好，拖尾因子可以達(dá)到1.1，符合藥典要求。

3.2含量測(cè)定結(jié)果顯示，除廠家A的2批樣品外，其余樣品的含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于標(biāo)示量;含量均勻度檢查結(jié)果顯示，制劑中馬來酸氯苯那敏的均勻性存在一定的差異。目前全國(guó)約有70多個(gè)廠家生產(chǎn)該品種，本品又為復(fù)方制劑，有效控制處方中化學(xué)成分的投料量及制劑工藝，以保證其含量的穩(wěn)定性及均勻性是非常必要的。因此，藥品生產(chǎn)企業(yè)及監(jiān)管部門應(yīng)對(duì)該產(chǎn)品的質(zhì)量研究與質(zhì)量控制引起足夠重視。

［1］劉鄉(xiāng)鄉(xiāng)，康志英，黃曉玲，等.復(fù)方感冒靈斤質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.中藥材，2003，26(4):282-283.

［2］朱炳輝，陸惠文，梁藝英，等.重感片中安乃近及馬來酸氯苯那敏的固相萃取高效液相色譜法測(cè)定.中成藥，2001，23(4):246.

［3］吳靜.高效液相色譜法測(cè)定維C銀翹片中馬來酸氯苯那敏的含量.現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2004，18(6):40.

［4］曹艷芳，黃夏敏，馮倩玲，等.對(duì)復(fù)方感冒靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量測(cè)定.今日藥學(xué)，2009，19(3):19-22.