劉鋒
血細胞分析儀[1]由于具有較為良好的重復(fù)性、準確性、快速方便特性,使臨床檢驗工作得到大幅度上升,顯著提高了工作效率;由于血小板體積較小,容易受到干擾發(fā)生粘附、聚集和變性等情況,使得血小板檢測難以準確計數(shù),其檢測結(jié)果變化、且很不穩(wěn)定,計數(shù)結(jié)果與實際值出現(xiàn)顯著的差異,為了能夠提高血細胞分析儀對血小板檢測的精確度,我們對血細胞分析儀血小板檢測異常影響因素進行分析,具體報告如下。
1.1 儀器 血細胞分析儀采取Sysmex KX-21型(日產(chǎn))及相應(yīng)配套試劑;顯微鏡使用CX31光學顯微鏡(日本奧林巴斯公司生產(chǎn))。
1.2 檢測方法 ①血細胞分析儀檢測:采靜脈血2.0 ml于EDTA-K2真空抗凝管,充分搖勻上機進行檢測。②顯微鏡檢測:采取手工顯微鏡檢測計數(shù)按照“全國臨床檢驗操作規(guī)程”(草酸銨法:血液20 μl加入0.38 ml血小板稀釋液,進行充分混勻、充液、進行鏡檢)對每個樣本進行3次計數(shù),取血小板計數(shù)的平均值;取經(jīng)抗凝血樣進行血片推制,采取瑞士染色,推制血膜符合標準具有顯著的舌狀,頭、體、尾,經(jīng)瑞氏染色,后在顯微鏡下觀察血小板的大小、形態(tài)、有無凝集,以及血片中白細胞及紅細胞的大小、形態(tài)和碎片。③觀察內(nèi)容:對4862標本進行血細胞分析儀檢測發(fā)現(xiàn)412例標本出現(xiàn)血小板檢測異常,并進行手工顯微鏡檢測,血小板無異常,對血細胞分析儀檢測血小板發(fā)生異常情況影響因素進行總結(jié)。
4862標本進行血細胞分析儀檢測發(fā)現(xiàn)412例標本出現(xiàn)血小板檢測異常,并進行手工顯微鏡檢測,血小板無異常,對血細胞分析儀檢測血小板發(fā)生異常情況影響因素進行總結(jié),影響因素具有較為多的情況,具體見表1。
表1 412例檢測血小板發(fā)生異常影響因素(例,%)
在外周血細胞中血小板是體積最小的細胞,它具有較多的功能的細胞,主要參與機體自行止血整個過程,在內(nèi)外凝血系統(tǒng)中具有較為重要的作用,由于其具有特性容易被破壞和發(fā)生附、聚集、變性等其他因素的干擾。
采血因素占影響因素中很大份額,老人、兒童、嚴重營養(yǎng)不良及體質(zhì)較差患者由于靜脈血管不明顯常常發(fā)生采血困難,經(jīng)過多次反復(fù)穿刺使得局部組織發(fā)生水腫及皮下出血,引起血小板發(fā)生聚集[2]、使得血小板消耗以及引起的組織凝血因子進入采集的血樣標本,形成微小凝血塊,進一步消耗血小板,是導(dǎo)致血細胞分析儀產(chǎn)生的結(jié)果偏低最長見到的因素。
溶血劑在血細胞分析儀試劑中非常重要,可以對血樣標本中紅細胞進行破壞達到溶解效果[3],并且使白細胞體積變化更有規(guī)律性,便于血細胞分析儀檢測,但溶血不充分,對紅細胞碎片不能夠徹底進行沖洗,使得血細胞分析儀檢測出現(xiàn)假陽性,導(dǎo)致對血小板計數(shù)值假性增高。
EDTA抗凝是臨床上采血最常用的抗凝劑,文獻報道在室溫條件下EDTA抗凝血,血小板會出現(xiàn)EDTA依賴性凝集[4],發(fā)生血小板EDTA依賴性凝集可能與血清中抗心磷脂抗體的滴度,血小板表面相關(guān)抗原的自身抗體有關(guān),發(fā)生EDTA依賴性凝集后血細胞分析儀不能夠?qū)δw的結(jié)構(gòu)確認,導(dǎo)致血小板計數(shù)值假性減少。
經(jīng)混合后的標本放置較長時間,由于溶解試劑具有滲透壓,對血小板具有破壞作用,血小板的體積隨時間的延長而發(fā)生變化,血小板的數(shù)量隨時間的延長而降低。
血液分析儀是利用電阻抗原理計數(shù)血小板[5],血小板的數(shù)量變化與體積變化密切相關(guān);紅細胞和血小板的計數(shù)是在同一通道中進行,它們之間僅以體積大小來區(qū)別,因此,血小板的計數(shù)易受小紅細胞數(shù)量或紅細胞碎片的影響[6];大體積血小板導(dǎo)致血小板計數(shù)減少,由于分析儀不能對巨大血小板進行識別,將大體積血小板誤計入紅細胞,而導(dǎo)致血小板假性減少。
[1] 李輝.血細胞分析儀對血小板的影響因素.中華臨床醫(yī)學研究雜志,2005,11(17):2557.
[2] 魯力.淺談血細胞分析儀計數(shù)血小板的影響因素及其質(zhì)量控制.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2008,24(5):751.
[3] 李莉玲.探討血細胞分析儀測量血小板異常的因素.實用醫(yī)技雜志,2008,15(18):2370.
[4] 陳夢珍.血細胞分析儀測定血小板影響因素的探討.江西醫(yī)學學報,2005,23(3):243-244.
[5] 鐘素萍,馬粵健.Svsmex KX-21型血細胞分析儀計數(shù)血小板的影響因素的探討.海南醫(yī)學,2007,18(8):132.
[6] 廖忠.血細胞分析儀測定血小板的影響因素分析.廣東醫(yī)學院學報,2005,23(5):611-619.