何志杰 張?jiān)?/p>
摘要:選取SD雄性大鼠30只,體重為185~225 g。將雄性大鼠隨機(jī)分成3組:銀杏葉提取物組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、安靜對(duì)照組,每組10只。銀杏葉提取物組與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組進(jìn)行6周的試驗(yàn),最后1 d訓(xùn)練至力竭,力竭后取血并進(jìn)行樣本處理,測(cè)定運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練大鼠血清乳酸脫氫酶(LDH)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和肌酸激酶(CK)活性。結(jié)果表明,銀杏葉提取物組比運(yùn)動(dòng)對(duì)照組LDH、AST、ALT、CK活性均有所下降,銀杏葉提取物可延緩大鼠運(yùn)動(dòng)疲勞的發(fā)生。
關(guān)鍵詞:銀杏葉提取物;血清酶;大鼠
中圖分類(lèi)號(hào):G804.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2012)20-4586-03
銀杏樹(shù)最早在1.5億年以前就出現(xiàn)在地球上。銀杏葉提取物(Extract of ginkgo biloba,EGb)是由多種分子組成的,EGb中含有多種成分,其中黃酮類(lèi)占24%,萜類(lèi)占6%[1,2]。從EGb化學(xué)成分可以看出,它包含大量對(duì)氧自由基清除能力很強(qiáng)的黃酮類(lèi)化合物,銀杏葉提取物的抗氧化作用和其他藥理作用與其抗氧化成分有關(guān)[3-5],但對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的研究目前尚不多見(jiàn)。本試驗(yàn)擬通過(guò)測(cè)定運(yùn)動(dòng)大鼠在力竭運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后血清酶活性的變化,為銀杏葉提取物作為新型運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。
1試驗(yàn)方法
1.1試驗(yàn)材料
銀杏葉提取物(EGb),它的種子介于孢子植物和種子植物之間。銀杏葉提取物溶液是由陜西省昌岳植化技術(shù)有限公司提供。SD雄性大鼠由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.2試驗(yàn)動(dòng)物及分組
選SD雄性大鼠30只,體重為185~225 g。將雄性大鼠隨機(jī)分成3組:銀杏葉提取物組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、安靜對(duì)照組,每組10只。各組每天自由攝食和飲水,同時(shí)加藥訓(xùn)練組按照100 mg/(kg·d)濃度的銀杏葉提取物溶液進(jìn)行灌胃(灌胃時(shí)間為11∶00,開(kāi)始運(yùn)動(dòng)時(shí)間為18∶00),運(yùn)動(dòng)對(duì)照組和安靜對(duì)照組灌胃同體積的生理鹽水。
1.3試驗(yàn)方法
試驗(yàn)時(shí)間為6周,每周6 d,休息1 d。銀杏葉提取物組和運(yùn)動(dòng)對(duì)照組大鼠采用Benford[6]跑臺(tái)進(jìn)行訓(xùn)練(表1)。先進(jìn)行為期1周的適應(yīng)性訓(xùn)練,逐漸提高運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度至最大攝氧量的80%(VO2max)以上,最后1 d訓(xùn)練至力竭。
1.4取材及樣品制備
第六周的最后1 d進(jìn)行完力竭訓(xùn)練后即刻用20%烏拉坦(0.5 mL/kg體重)腹腔麻醉后,在眼眶取血1 mL,再用抗凝全血3 mL分離血清。最后對(duì)大鼠進(jìn)行斷髓處死,立即取其心肌、肝臟放置于冰生理鹽水中洗凈血液,再用濾紙吸干后放置于冰箱保存?zhèn)溆茫囟葹?20 ℃)。
1.5測(cè)試指標(biāo)及方法
血清肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)活性用北京中生生物工程高技術(shù)公司提供的試劑盒測(cè)定,ALT、AST活性由溫州東甌生物工程有限公司提供的試劑盒測(cè)定;儀器主要為ACE全自動(dòng)生化分析儀和721型可見(jiàn)光分光光度計(jì)。
1.6數(shù)據(jù)處理
試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”來(lái)表示。
2結(jié)果與分析
2.1銀杏葉提取物對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)至力竭時(shí)間的影響
由表2可知,銀杏葉提取物組的力竭時(shí)間比訓(xùn)練組的明顯要長(zhǎng),說(shuō)明銀杏葉提取物能顯著提高大鼠力竭的時(shí)間,力竭延緩率達(dá)到了24.52%,說(shuō)明銀杏葉提取物具有較強(qiáng)的抗疲勞功效。
2.2銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練大鼠血清ALT、AST、
LDH、CK活性的影響
由表3可知,力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠血清ALT、AST、LDH、CK活性顯著高于安靜組(P<0.01);銀杏葉提取物組大鼠血清ALT、AST、CK活性相對(duì)于運(yùn)動(dòng)對(duì)照組都有所降低,并達(dá)到顯著水平(P<0.05),銀杏葉提取物組大鼠血清LDH活性相對(duì)于訓(xùn)練組有所降低,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3小結(jié)與討論
3.1銀杏葉提取物對(duì)大強(qiáng)度耐力訓(xùn)練大鼠運(yùn)動(dòng)能力的影響
通過(guò)外源性補(bǔ)充銀杏葉提取物后,大鼠力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)間相比運(yùn)動(dòng)對(duì)照組明顯延長(zhǎng)了24.52%。這充分說(shuō)明銀杏葉提取物可以顯著提高大鼠機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力。能夠達(dá)到延緩疲勞的機(jī)理是:①銀杏葉提取物補(bǔ)充了大鼠體內(nèi)的糖分,提高了大鼠的肌糖原、肝糖原含量,增加了大鼠的運(yùn)動(dòng)能力和運(yùn)動(dòng)時(shí)間。②銀杏葉提取物中富含糖類(lèi)和酯類(lèi)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),這些物質(zhì)可顯著降低大強(qiáng)度力竭訓(xùn)練對(duì)大鼠肝臟、心臟以及肌肉的傷害作用。
3.2銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練大鼠血清ALT、AST、
LDH、CK活性影響的機(jī)制探討
運(yùn)動(dòng)可以對(duì)機(jī)體血清酶活性造成一定的影響,造成血清酶活性會(huì)有所上升,這是因?yàn)樵谶\(yùn)動(dòng)時(shí)細(xì)胞膜的通透性發(fā)生了改變,細(xì)胞內(nèi)的酶會(huì)更多地進(jìn)入血液,從而造成血液中酶的濃度增大,活性上升。而攝取了銀杏葉提取物的大鼠在進(jìn)行了大強(qiáng)度訓(xùn)練后,發(fā)現(xiàn)可以使血清ALT、AST、CK活性明顯降低,這就說(shuō)明銀杏葉提取物中的成分物質(zhì)可以保護(hù)機(jī)體在進(jìn)行大運(yùn)動(dòng)量時(shí)的肝臟、腎臟機(jī)能水平,減緩大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)機(jī)體機(jī)能造成的傷害,提高機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力,延緩機(jī)體的疲勞。
銀杏葉提取物可以明顯降低大鼠在進(jìn)行大強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)后的血清酶活性的提高,保護(hù)了大鼠重要器官的機(jī)能水平,延緩了機(jī)體的疲勞。這為銀杏葉提取物可以作為大強(qiáng)度耐力訓(xùn)練后體能恢復(fù)的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑提供了一定的科學(xué)試驗(yàn)依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1] 邵繼平,王伯初,陳欣,等.銀杏葉提取物藥用價(jià)值的研究進(jìn)展[J].重慶大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2003,26(1):130-134.
[2] PICEMAIL J,DUPUIS M N,HANS P H,et al. Superoxide anionscavenging effect and superoxide dismutase activity of Ginkgo bilobaextract[J].Experintia,1989,45:708-713.
[3] CHEN C,WEI T T,ZHAO B L,et al. Different effects of the constitu-ents of EGb-761 on apoptosis in rat cerebellar granule cells induced by hydroxyl radicals[J].Biochem Mol Biol Intern,1999,47:397-405.
[4] NI Y C,ZHAO B L,HOU J W,et al. Protection of cerebellar neuronby ginkgo bilobaextract against apoptosis induced by hydroxyl radicals[J].Neuron Science Letter,1996,214:115-118.
[5] 曹春玲,朱建偉,任寧,等.銀杏提取物對(duì)自然衰老大鼠腦組織和心肌組織的抗氧化作用[J].中國(guó)醫(yī)療前沿,2009,4(2):7-8.
[6] BEDFORD T G, TIPTON C M, WILSON N C, et al. Maximum oxygen consumption of rats and its changes with various experimental procedures[J].App Physiol,1979,47(6):1278-1283.