彭湘君　李銀?！±钋嗨?/p>

摘要：山豆根（ＲａｄｉｘＳｏｐｈｏｒａｅＴｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ）多糖是山豆根中主要活性成分之一。山豆根多糖在免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗腫瘤等方面具有顯著活性。對山豆根多糖提取工藝﹑分離純化方法﹑化學(xué)組成結(jié)構(gòu)﹑生理活性以及近幾年在動物試驗(yàn)中的研究結(jié)果等進(jìn)行了分析，并展望了山豆根多糖今后的主要研究方向。

關(guān)鍵詞：山豆根（ＲａｄｉｘＳｏｐｈｏｒａｅＴｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ）；多糖；提?。环蛛x純化；生理活性

中圖分類號：Ｓ８５３．７２ 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）24－5559-03

山豆根（ＲａｄｉｘＳｏｐｈｏｒａｅＴｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ）又名廣豆根、苦豆根、山大豆根，為豆科植物越南槐（ＳｏｐｈｏｒａｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓＧａｐｎｅｐ.）的干燥根及根莖，為《中國藥典》（２０１０版）收載品種，主要分布于廣西、貴州等地［１］。山豆根功效始見于《開寶本草》：“主解諸藥毒、止痛、消皰腫毒”，２０１０版《中國藥典》載本品歸肺、胃經(jīng)，具有清火、解毒、消腫、止痛之功效。范健等［２］、蘭艷素等［３］研究證明山豆根中主要活性成分為生物堿、多糖、黃酮等。多糖是一切生命的有機(jī)體必不可少的成分，對人類健康起著舉足輕重的作用，它具有增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、抗氧化、降血糖、抗病毒等活性作用，是理想的、天然、安全、有效的藥品和保健食品，為人類健康展示了光明的領(lǐng)域［４］。近年來，隨著多糖研究的不斷發(fā)展，山豆根多糖的研究受到重視，本文對山豆根多糖方面的研究情況作簡要綜述，以期為山豆根多糖資源的開發(fā)和利用提供參考。

１ 山豆根多糖的提取工藝研究

植物多糖可分為水溶和堿溶兩部分，水溶性多糖有較強(qiáng)的生物活性，山豆根多糖屬于水溶性的多糖。傳統(tǒng)的多糖提取一般采用水提醇沉法、酸提法、堿提法。尹龍萍等［５］以山豆根多糖得率為考察指標(biāo)，采用正交設(shè)計法對山豆根粗多糖提取工藝中水提取次數(shù)、提取時間、乙醇沉淀濃度３個因素進(jìn)行優(yōu)化研究，山豆根粗多糖提取，以水提?。泊危看危叮埃恚椋?，７５％（體積分?jǐn)?shù)）乙醇的最終沉淀為最優(yōu)化工藝。但采用傳統(tǒng)的水提醇沉方法所需溫度高、得率低，而隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了更多科學(xué)有效的分離提取方法，如微波法和超聲法等。帥學(xué)宏等［６］分別用水提醇沉法和微波處理法提取山豆根多糖進(jìn)行比較。微波法提取效果更好，最適條件為料液比為1∶１５，提取溫度為９０℃，提取時間為９０ｍｉｎ。山豆根多糖的得率從傳統(tǒng)的３．２６％提高到５．５４％，山豆根多糖總糖含量達(dá)到６５．４１％，精制后的多糖中總糖含量達(dá)到８８．４８％，且山豆根多糖得率隨著微波處理時間延長而升高，山豆根多糖的得率較傳統(tǒng)水提醇沉法顯著提高。

２ 山豆根多糖的分離純化方法

李志孝等［７］水提山豆根多糖洗滌干燥后，經(jīng)ＤＥＡＥ－纖維素柱層析，收集后進(jìn)行ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱層析，ＮａＣｌ洗脫得到精制多糖。董群等［８，９］將山豆根用沸水提取后濃縮、透析，沉淀，洗滌，真空干燥后得到多糖粗品ＳＳａ。殘渣繼續(xù)用稀堿提取，經(jīng)酸中和，透析，離心后，上清液沉淀后得到ＳＳｂ，殘渣中加入濃堿提取，按與稀堿提取時同樣的方法處理得到多糖ＳＳｃ。ＳＳａ，ＳＳｂ溶解于蒸餾水中，除去不溶物，上清液進(jìn)行ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５柱（５ｃｍ×４２ｃｍ，Ｃｌ－）層析，先用蒸餾水洗脫，再用ＮａＣｌ梯度洗脫，分部收集，旋光法檢測糖含量，將各峰位分別合并收集。ＳＳｃ溶于水，進(jìn)行ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５柱（５ｃｍ×４２ｃｍ，Ａｃ－）層析，用蒸餾水洗脫得到ＳＳｃ－１。以上各組分分別用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００或ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００進(jìn)行凝膠過濾層析進(jìn)一步純化，用ＮａＣｌ作為溶劑和洗脫劑。

３ 山豆根多糖的化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)

目前，從山豆根中提取的多糖組分有８種。張嵐等［１０］從山豆根中得到總糖，經(jīng)進(jìn)一步分離得到一種中性多糖ＳＳａ，相對分子質(zhì)量為１．９×１０６，組成為Ｄ－半乳糖∶Ｄ－葡萄糖＝１∶１。董群等［１１］用水提醇沉法從山豆根中分離得到水提多糖粗品ＳＳａ，從ＳＳａ的進(jìn)一步分離中得到ＳＳａ－ｌ、ＳＳａ－２、ＳＳａ－３、ＳＳａ－４共４個組分；用堿提醇沉法分離得到棕色粉末狀粗多糖ＳＳｂ，再進(jìn)一步分離純化得到ＳＳｂ－１ＦＡ、ＳＳｂ－２、ＳＳｂ－３、ＳＳｃ－１４個組分，其相對分子質(zhì)量分別為９．１×１０３，３．３×１０５，＞２．０×１０６，＞２．０×１０６，２．６×１０４，４．４×１０５，５．３×１０５，８．１×１０４。根據(jù)組成和性質(zhì)，可分成５種結(jié)構(gòu)類型。淀粉類多糖（ＳＳａ－１），阿拉伯半乳葡聚糖（ＳＳａ－２），木葡聚糖（ＳＳｂ－１ＦＡ，ＳＳｃ－１），異木聚糖（ＳＳｂ－２）和果膠類多糖（ＳＳａ－３，ＳＳａ－４，ＳＳｂ－３），其中淀粉的含量最多，其次為果膠類多糖。

４ 山豆根多糖的生理活性

４．１ 免疫調(diào)節(jié)作用

Ｔａｙｌｏｒ等［１２］、帥學(xué)宏等［１３，１４］通過以地塞米松（Ｄｅｘ）為免疫抑制劑建立小鼠免疫抑制模型，以不同劑量的山豆根多糖（ＳＳＰ）腹腔注射。Ｄｅｘ對小鼠ＭＰ０活性沒有顯著性影響，ＳＳＰ與Ｄｅｘ合用可顯著降低小鼠ＭＰ０活性；Ｄｅｘ能降低小鼠胸腺組織中Ｘ０活性，ＳＳＰ配合Ｄｅｘ使用能極顯著地降低Ｘ０活性；ＳＳＰ與Ｄｅｘ配合使用后可顯著增強(qiáng)其ＧＰ活性，且有一定的量效關(guān)系，顯著提高脾臟指數(shù)，血清中ＩＬ－６、ＴＮＦα水平和胸腺中的ＧＳＨ水平，對胸腺中的ＮＯ水平有調(diào)節(jié)作用，表明ＳＳＰ可拮抗Ｄｅｘ所致的免疫抑制。

帥學(xué)宏等［１５］報道了山豆根多糖與雞脾臟淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)后能顯著提高環(huán)磷酸腺苷、６－酮－前列腺素Ｆ１a和血檢素B2水平，山豆根多糖對ＮＯ分子水平隨時間的變化有不同程度的升高，影響環(huán)磷酸腺苷／環(huán)磷酸鳥苷和６－酮－前列腺素Ｆ１／血栓素Ｂ２的信號體系從而影響免疫細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致機(jī)體的免疫功能受到影響。陳愛葵等［１６］探討了山豆根提取液對小白鼠免疫功能的影響。結(jié)果表明，山豆根多糖對激活小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，以及對提高淋巴細(xì)胞的Ｅ玫瑰花環(huán)形成率都有明顯的促進(jìn)作用，進(jìn)一步證明山豆根多糖具有很好的免疫調(diào)節(jié)作用。山豆根多糖不僅刺激淋巴細(xì)胞增殖，促進(jìn)ＰＷＭ誘導(dǎo)的抗體產(chǎn)生，而且還能夠刺激小鼠淋巴細(xì)胞分泌ＩｇＧ［１７］。

４．２ 抗氧化作用

胡庭俊等［１８］采用鄰二氮菲－Ｆｅ２＋氧化法測定了山豆根多糖（ＳＳＰ１）清除羥自由基（·ＯＨ）的作用，應(yīng)用鄰苯三酚自氧化反應(yīng)體系為產(chǎn)生超氧陰離子自由基（Ｏ２－·）模型觀察了ＳＳＰ１對超氧陰離子的清除作用，選擇辣根過氧化物酶－酚紅法測定了山豆根多糖對Ｈ２Ｏ２的清除作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，山豆根多糖具有清除羥自由基的作用，且呈明顯的量效關(guān)系；對鄰苯三酚自氧化具有抑制作用，對調(diào)理酵母多糖誘導(dǎo)的小鼠脾臟淋巴細(xì)胞釋放Ｈ２Ｏ２具有抑制作用而具有抗氧化作用。山豆根多糖能對抗環(huán)磷酰胺引起的損傷，通過提高小鼠脾臟和胸腺還原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平，提高免疫系統(tǒng)的抗氧化能力水平并能降低ＬＰＯ，防止超氧化物自由基對免疫組織細(xì)胞的損傷。山豆根多糖對雞血漿中超氧化物歧化酶活力有升高作用，對機(jī)體的總抗氧化能力在一定時間內(nèi)能夠明顯提高，能升高雞血漿中ＭＤＡ的水平，對還原型ＧＳＨ在前期具有升高作用，從而在清除自由基、提高抗氧化能力方面有促進(jìn)作用。

４．３ 抗腫瘤作用

肖正明等［１９］研究表明，山豆根水提取物能抑制體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞的增殖，降低線粒體代謝活性。張良等［２０］報道復(fù)方山豆根注射液對Ｂ１６黑色素瘤、ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤有較好的抑瘤作用，顯著地延長小鼠生存期效果。黃明宜［２１］研究表明山豆根對Ｅｃａ－１０９細(xì)胞株生長有抑制和殺傷作用，對脫氫酶有影響作用。帥學(xué)宏［６］也報道了山豆根多糖能顯著提高脾臟指數(shù)和血清中ＩＬ、ＴＮＦＱ水平及胸腺中谷胱甘肽水平，能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。小鼠被地塞米松免疫抑制后，對ＴＮＦ的水平影響不明顯，高劑量的山豆根多糖可極顯著地升高腫瘤壞死因子水平。據(jù)研究表明ＴＮＦ能夠殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞，提高中性粒細(xì)胞的吞噬能力，增加過氧化物陰離子產(chǎn)生，刺激細(xì)胞脫顆粒和分泌髓過氧化物酶。由此可推測山豆根多糖具有抗腫瘤活性，山豆根中的苦參堿和氧化苦參堿也有類似的抗腫瘤作用。

５ 展望

山豆根化學(xué)成分含量豐富，藥用價值高。其中山豆根多糖生物活性作用的研究已取得一定進(jìn)展，其作為一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑為學(xué)者廣泛重視，但由于其所含化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，其作用機(jī)制﹑構(gòu)效關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。山豆根的水提液具有抗腫瘤的作用，到目前為止，其水提液中的云芝多糖、豬苓多糖、香菇多糖、裂褶多糖、茯苓多糖等在治療腫瘤方面顯示了誘人的前景，期望進(jìn)一步研究山豆根水提液中多糖成分的抗腫瘤作用及其作用機(jī)制，拓展其在臨床方面的應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

［１］譚成明，房慧伶，胡庭俊．山豆根生物活性成分及藥理作用的研究進(jìn)展［Ｊ］．廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００９，４０（１１）：１４９４－１４９７．

［２］范 健，呂建峰．山豆根的化學(xué)成分與藥理研究進(jìn)展［Ｊ］．實(shí)用醫(yī)技雜志，２００３，１０（１１）：１２５４－１２５５．

［３］蘭艷素，楊瑞云，李 遠(yuǎn)，等．山豆根的化學(xué)成分與藥理活性研究進(jìn)展［Ｊ］．滁州學(xué)院學(xué)報，２０１０，１２（２）：４８－５１．

［４］田庚元，馮宇澄，林 穎．植物多糖的研究進(jìn)展［Ｊ］．中國中藥雜志，１９９５，２０（７）：４４１－４４３．

［５］尹龍萍，鄧 毅，賈 偉，等．山豆根粗多糖最優(yōu)化提取工藝研究［Ｊ］．中藥材，２００７，３０（３）：３５１－３５３．

［６］帥學(xué)宏．山豆根多糖提取工藝及免疫學(xué)活性研究［Ｄ］．蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，２０１０．

［７］李志孝，黃成鋼，陳耀祖．山豆根多糖的研究［Ｊ］．西北植物學(xué)報，２０００，２０（２）：２９４－２９８．

［８］董 群，丁思煒，方積年．山豆根木葡聚糖的研究［Ｊ］．中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)報，１９９８，１４（６）：７４６－７５０．

［９］ＤＯＮＧＱ，ＤＩＮＧＳＷ，ＹＡＮＧＸ．ＳｔｒｕｃｔｒｕａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆａｈｅｔｅｒｏｘｙｌａｎｆｒｏｍＳｏｐｈｏｒａｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａｒｏｏｔｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９９，５０（１）：８１－８４．

［１０］張 嵐，任麗娟，顧玉誠．山豆根中性多糖ＳＳＡ的分離純化和性質(zhì)［Ｊ］．中草藥，１９９３，２４（１）：８－９．

［１１］董 群，方積年．山豆根多糖的性質(zhì)和化學(xué)組成［Ｊ］．中國藥學(xué)雜志，２００１，３６（２）：８５－８７．

［１２］ＴＡＹＬＯＲＲＬ，ＣＯＮＲＡＤＨＥ．Ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｉｃｄｅｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｕｒｏｎｉｄｅｓａｎｄｇｌｙｃｏａｍｉｎｏｇｙｌｃｕｒｏｎａｎｓｔｏｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｒｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｃａｒｂｏｘｙｌｇｒｏｕｐ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７２，１１（８）：１３８３－１３８８．

［１３］帥學(xué)宏，胡庭俊，曾 蕓，等．山豆根多糖對免疫抑制模型小鼠免疫器官指數(shù)和自由基相關(guān)酶活性的影響［Ｊ］．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，２００９，３２（２）：１７０－１７２．

［１４］帥學(xué)宏，胡庭俊，曾 芒，等．山豆根多糖對小鼠免疫功能的影響［Ａ］//中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會中獸醫(yī)學(xué)分會２００８年學(xué)術(shù)年會．華東區(qū)第十八次中獸醫(yī)科研協(xié)作與學(xué)術(shù)研討會暨獸藥發(fā)展論壇論文集［Ｃ］．２００８．

［１５］帥學(xué)宏，蘇子杰，胡庭俊，等．山豆根多糖對雞脾臟淋巴細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)分子水平的影響［Ｊ］．動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，２０１０，３１（１）：３６－４１．

［１６］陳愛葵，高麗松，黃清松，等．山豆根對動物免疫功能的影響［Ｊ］．中國現(xiàn)代醫(yī)藥科技，２００３，３（１）：５２－５４．

［１７］趙武述，張玉琴，任麗娟，等．山豆根多糖刺激抗體產(chǎn)生的作用［Ｊ］．中日友好醫(yī)院學(xué)報，１９９２，６（１０）：２００－２０２．

［１８］胡庭俊，程富勝，陳昊然，等．山豆根多糖體外清除自由基作用的研究［Ｊ］．中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，２００４，２３（５）：６－７．

［１９］肖正明，宋景貴．山豆根水提取物對體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞增殖及代謝的影響［Ｊ］．山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，２０００，２４（１）：６２－６４．

［２０］張 良，張萬峰，王日芝，等．復(fù)方山豆根注射液對荷瘤小鼠Ｂ１６、ｌｅｗｉｓ抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究［Ｊ］．中醫(yī)藥信息，２００１，１８（６）：５３－５４．

［２１］黃明宜．不同濃度山豆根對Ｅｃａ－１０９細(xì)胞株生長的抑制和殺傷作用［Ｊ］．河南職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報，２００２，１４（３）：１９３－１９４．