劉冬青，趙蓮英，樊瑞芬，瞿 峰

(1邯鄲市第一醫(yī)院，河北邯鄲 056002;2河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院)

近年來，我國(guó)原發(fā)性高血壓發(fā)病率逐漸升高，腎臟是其重要的靶器官。近幾年大量的研究證實(shí)，尿液中出現(xiàn)足細(xì)胞是診斷腎臟早期微小病變最有效的方法，但其檢查方法繁瑣、臨床應(yīng)用受限。2011年11月～2012年3月，我們對(duì)92例原發(fā)性高血壓患者尿液中足細(xì)胞標(biāo)志蛋白Podocalyxin(PCX)、微量白蛋白(mALB)進(jìn)行了檢測(cè)及對(duì)比分析，旨在探討PCX在早期腎損害診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期于我院就診的原發(fā)性高血壓患者92例(高血壓組)，男54例，女38例;年齡40～76歲。均符合1999年WHO及中國(guó)高血壓防治指南高血壓病診斷標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)規(guī)定，收縮壓(SBP)≥140 mmHg和(或)舒張壓(DBP)≥90 mmHg。排除冠心病、糖尿病及腎血管性、慢性腎臟病性高血壓。另選取我院體檢中心的健康體檢者30例作為對(duì)照組，兩組一般資料具有可比性。

1.2 尿液中PCX、mALB檢測(cè) 兩組均收集清晨首次清潔中段尿10 mL，2 500 r/min離心10 min后取上清，一部分用免疫比濁法測(cè)定mALB，試劑盒為英國(guó)朗道廠家提供，所用儀器為日立7170全自動(dòng)生化分析儀。另一部分保存于－80℃低溫冰箱中(避免反復(fù)凍融)待檢 PCX:取人足細(xì)胞標(biāo)志蛋白PCX ELISA試劑盒(美國(guó)R＆D公司提供)，用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，向包被單抗的微孔中依次加入PCX抗原、生物素化的抗人PCX抗體、辣根過氧化物標(biāo)記的抗生物素蛋白，經(jīng)過徹底洗滌后用底物四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色，用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，計(jì)算樣品濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料用±s表示，正態(tài)分布的兩組均數(shù)間比較用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。指標(biāo)間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析法。

2 結(jié)果

2.1 尿液PCX、mALB水平 高血壓組和對(duì)照組尿液 PCX 分別為(4.816 ±1.769)、(2.032 ±0.652)ng/mL，mALB 分別為(46.6 ±10.3)、(11.2 ±5.9)mg/L，組間比較P均 ＜0.01。

2.2 尿液PCX、mALB陽性率 高血壓組和對(duì)照組尿液 PCX 陽性率分別為 45.6%(42/92)、0，mALB陽性率分別為28.3%(26/92)、0，組間比較P分別＜0.01、0.05;高血壓組PCX陽性率顯著高于mALB陽性率(P＜0.05)。

2.3 高血壓組尿液中PCX水平與mALB水平的關(guān)系 Pearson相關(guān)分析顯示，高血壓組尿液中PCX水平與 mALB水平呈顯著正相關(guān)，P＜0.05(r=0.749)。

3 討論

足細(xì)胞即腎小球臟層上皮細(xì)胞，呈趾狀交叉覆蓋于腎小球基底膜最外層，連同基底膜和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞一起，構(gòu)成腎小球血液濾過屏障。腎小球損傷時(shí)足細(xì)胞首當(dāng)其沖，故足細(xì)胞損傷和脫落是腎病最早期的病理改變。目前尿液中mALB作為腎早期損傷的常用檢測(cè)指標(biāo)已在臨床廣泛應(yīng)用。PCX又稱為Podocalyxin相似蛋白1，位于足細(xì)胞頂端區(qū)，近期研究顯示其為腎臟足細(xì)胞表達(dá)的帶有大量負(fù)電荷的唾液酸黏蛋白，其主要表達(dá)在腎小球上皮細(xì)胞而不表達(dá)于其他的尿道上皮細(xì)胞，該蛋白缺乏或改變將最終影響腎小球?yàn)V過膜的功能［1］。Hara等［2］證實(shí)，腎臟疾病患者尿中排泄的足細(xì)胞及其裂解碎片均能反映足細(xì)胞損傷程度。Vogelmann等［3］研究提示，即使是凋亡的足細(xì)胞仍然表達(dá)PCX。因此，目前臨床已將PCX作為檢測(cè)各種腎小球疾病患者足細(xì)胞的標(biāo)志分子［4］，用PCX代表和定量尿中足細(xì)胞的脫落情況對(duì)評(píng)價(jià)腎小球疾病中足細(xì)胞的損傷具有臨床意義。

大量文獻(xiàn)證實(shí)，尿中mALB是早期發(fā)現(xiàn)腎病最敏感、最可靠的檢測(cè)指標(biāo)［5］。本研究顯示，高血壓組尿液中PCX、mALB水平及陽性率均顯著高于對(duì)照組，高血壓組PCX陽性率顯著高于mALB陽性率;Pearson相關(guān)分析顯示，高血壓組尿液中PCX水平與mALB水平呈顯著正相關(guān)。表明原發(fā)性高血壓患者存在足細(xì)胞受損的狀態(tài)，即高血壓導(dǎo)致足細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和相關(guān)分子表達(dá)異常，進(jìn)而引起腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)和功能的異常，促使蛋白尿形成;PCX檢測(cè)比mALB能更早發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓患者的微小腎損傷，二者聯(lián)合檢測(cè)可以相互彌補(bǔ)、提高早期腎損傷檢出率［4，6］。筆者認(rèn)為，對(duì)于尿液中 PCX 或者mALB陽性的高血壓患者應(yīng)及時(shí)采取干預(yù)措施，如運(yùn)用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑、腎上腺皮質(zhì)激素保護(hù)足細(xì)胞、保護(hù)腎功能，減少終末期腎病的發(fā)生和發(fā)展，此對(duì)于保護(hù)龐大的原發(fā)性高血壓人群的健康具有重要臨床意義。

［1］Barisone L，Kopp JB.Update in podocyte biology:putting ones best foot forward［J］.Curr Opin Nephrol Hypirtens，2003，12(3):251-259.

［2］Hara M，Yanagibara T，Kihara I，et al.Apical cell membranes are shed into urine froom injured podocytes:a novel phenomenon of podocyte injuy［J］.J Am Soc Nephrol，2005，16(2):408-416.

［3］Vogelmann SU，Nelson WJ，Myers BK，et al.Urinary excretion of viable podoccytes in health and renal disease［J］.Am J Physiol，2003，285(1):40-48.

［4］Petemann A，F(xiàn)loege J.Podocyte damage resulting in podocyturea A potential diagnostic markerto assess glomerulat disease activity［J］.Nephmn Clin Pmct，2007，106(2):61-66.

［5］韋景勇.尿微量白蛋白檢測(cè)在高血壓早期腎損害診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.臨床合理用藥，2011，4(7):33-34.

［6］陳立平.足細(xì)胞及其相關(guān)分子在糖尿病腎病中的作用［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2006，8(16):2478-2483.