張振強(qiáng)，宋軍營，賈亞泉

（河南中醫(yī)學(xué)院 科研實(shí)驗(yàn)中心，河南 鄭州 450003）

缺血性腦血管疾病（Cerebrovascular disease，CVD）亦稱卒中，因其發(fā)病率、致殘率、致死率都很高，所以受到人們的特別關(guān)注。目前，缺血性腦血管疾病與心臟病、惡性腫瘤構(gòu)成人類的三大致死病因，在我國為第二大致死病因，也是最主要的致殘?jiān)?。缺血性腦血管疾病約占全部腦血管患者的70%～80%，每年增加約150萬以上新的腦血管病患者，給社會(huì)、國家及個(gè)人帶來沉重的負(fù)擔(dān)［1］。

腦的能量主要來源于葡萄糖的有氧代謝，幾乎無能量儲(chǔ)備，雖然腦的重量僅為體重的2%左右，但其耗氧量約為總耗氧量的20%。因此，腦組織對(duì)缺血缺氧性損害非常敏感。缺血缺氧4min即可造成神經(jīng)元死亡。腦組織缺氧后由于能量耗竭等多種因素引起神經(jīng)細(xì)胞腫脹、變性、壞死、凋亡以及膠質(zhì)細(xì)胞腫脹、增生等，尤其以神經(jīng)元死亡和進(jìn)行性受損為顯著特征。蔡紫峰等［2］通過對(duì)腦缺血性損害的分布規(guī)律分為腦缺血核心區(qū)（壞死區(qū)）、缺血半暗區(qū)（半影區(qū)）和遠(yuǎn)離病灶區(qū)3個(gè)區(qū)域。

目前，在腦缺血的早期治療和預(yù)防方面已經(jīng)取得了一些突破性的進(jìn)展，但其致殘率與死亡率仍然有上升的趨勢(shì)。我國已逐步進(jìn)入老齡化社會(huì)，因此，對(duì)腦血管疾病的研究具有非常重要的意義。現(xiàn)就近年來對(duì)腦缺血疾病的基礎(chǔ)研究做以總結(jié)概述。

1 缺血性腦血管疾病基礎(chǔ)研究

1.1 興奮性氨基酸（EAA）與缺血性腦血管病的關(guān)系

氨基酸作為生命的基礎(chǔ)物質(zhì)，在人體的生長、發(fā)育、營養(yǎng)和代謝等生命活動(dòng)中起著重要作用。興奮性氨基酸（Excitatory amino acids，EAAs）是以谷氨酸（Glutamate，Glu）和天冬氨酸（Aspartate，Asp）為代表，存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起傳遞興奮性信息作用的一種神經(jīng)毒素，在腦缺血缺氧及缺血再灌注后的腦組織損傷中起重要作用［3］。通過一系列實(shí)驗(yàn)研究證明，EAA升高的程度與腦損傷的程度有關(guān)。損傷越嚴(yán)重則EAA升高越顯著，持續(xù)的時(shí)間也越長。在腦缺血缺氧損傷時(shí)，腦內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量的興奮性氨基酸，作用其受體，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載及一系列的變化，最終使神經(jīng)細(xì)胞代謝衰竭而死亡。有研究者［4］認(rèn)為，在腦缺血的過程中，EAA的神經(jīng)毒性作用在腦組織損傷過程中起著引導(dǎo)和直接的作用。

1.2 鈣離子（Ca2＋）與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

在正常的生理狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)外的Ca2＋濃度相差較大，其主要是通過N－甲基－D－天冬氨酸（N－methyl－D－aspartic aci d receptor，NMDA）受體通道、電壓依賴性鈣通道、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣通道、線粒體Na＋／Ca2＋交換系統(tǒng)、Ca2＋和鈣調(diào)蛋白（Calmodulin，CaM）等維持正常的濃度梯度。目前認(rèn)為胞內(nèi)Ca2＋濃度的升高通過4條途徑來加重腦缺血損傷：①大量Ca2＋沉積于線粒體，干擾氧化磷酸化。②胞內(nèi)鈣超載可使胞質(zhì)內(nèi)或溶酶體內(nèi)Ca2＋依賴性酶類激活，特別是中性蛋白酶的病理性增加，可使細(xì)胞結(jié)構(gòu)分解，神經(jīng)元骨架破壞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。③胞內(nèi)Ca2＋濃度增加，激活磷脂酶A2和PLC，使膜磷脂降解，產(chǎn)生大量的游離脂肪酸，特別是花生四烯酸（AA），進(jìn)一步代謝產(chǎn)生大量血栓素、白三烯和自由基，并可激活血小板，形成微血栓，加重腦缺血損傷。④腦血管平滑肌內(nèi)皮細(xì)胞Ca2＋內(nèi)流，促進(jìn)血管收縮痙攣，加重腦缺血損傷。

1.3 細(xì)胞調(diào)亡與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

細(xì)胞凋亡（Apotosis）是由體內(nèi)外因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細(xì)胞死亡過程，所以又被稱為程序性死亡（Programmed cell death，PCD）。凋亡是腦缺血后神經(jīng)元死亡的重要方式。腦缺血后，神經(jīng)細(xì)胞死亡的方式分為凋亡和壞死。其中，在缺血中心區(qū)主要是壞死的細(xì)胞，缺血周圍區(qū)主要為凋亡細(xì)胞。Li等［5］認(rèn)為，凋亡是一個(gè)復(fù)雜的由Caspase家族成員介導(dǎo)的蛋白級(jí)聯(lián)反應(yīng)。Caspase－3是細(xì)胞凋亡信號(hào)途徑中最關(guān)鍵的效應(yīng)酶，處于凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)通路的核心位置，發(fā)揮非常重要的作用，凋亡的最后實(shí)施通過Caspase－3的激活而實(shí)現(xiàn)。陳蓉等［6］通過實(shí)驗(yàn)證明，缺血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡與Caspase－3的表達(dá)密切相關(guān)。Ni等［7］發(fā)現(xiàn)，大鼠短暫性全腦缺血后海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元可見caspase－3、mRNA表達(dá)，在缺血24h時(shí)最顯著，持續(xù)72h、96h后顯著下降。提示腦缺血早期是疾病治療的最佳時(shí)期，可通過各種手段抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生。Kumihashi等［8］證實(shí)，沙土鼠全腦缺血10min后給予乙酰水楊酸可以顯著減少海馬齒狀回的Brdu陽性標(biāo)記細(xì)胞，認(rèn)為環(huán)氧化酶和前列腺素在沙土鼠腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞增殖中起重要作用。Ekdahl等［9］研究認(rèn)為，caspase通路的抑制劑可降低DG細(xì)胞凋亡的發(fā)生，同時(shí)可以增加該區(qū)增殖細(xì)胞的數(shù)量。

1.4 一氧化氮與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

一氧化氮（Nitric oxide，NO）是一種細(xì)胞內(nèi)信使物質(zhì)和效應(yīng)分子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)作為一種信息分子，行使多種生理功能，在發(fā)育與再生的過程中起著十分重要的作用。還與神經(jīng)軸突生長、突觸建立、神經(jīng)遷移和細(xì)胞增殖調(diào)控等過程有關(guān)。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，NO具有神經(jīng)保護(hù)和毒素的雙重作用。Moreno－Lopez等［10］研究認(rèn)為，在生理?xiàng)l件下，腦內(nèi)神經(jīng)元的再生，NO起著一定的作用。Zhu等［11］認(rèn)為，腦缺血后的神經(jīng)元死亡與NO有著密切的關(guān)系。但很多關(guān)于NO對(duì)腦缺血作用的研究仍存在爭議—既有保護(hù)作用又有破壞作用。Zhang等［12］報(bào)道，給予正常成年大鼠一氧化氮供體（Diethylenetriamine NONOate，DETA NONOate）可明顯增加室管膜下區(qū)（Subependymal ventricular zone，SVZ）和 DG的細(xì)胞增殖和遷移。此外，腦缺血后給予DETA／NONOate亦能明顯增加SVZ和DG的細(xì)胞增殖和遷移，并且大鼠的神經(jīng)功能缺損明顯改善。Keynes等［13］通過研究認(rèn)為，腦缺血后環(huán)磷酸鳥苷（cyclic Guanosine monophosphate，Cgmp）的上調(diào)水平與NO的增加有關(guān)，使腦血流量增加、促進(jìn)腦內(nèi)血管新生、神經(jīng)細(xì)胞的凋亡得到抑制和促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生等作用，進(jìn)一步說明了給予NO可以改善腦缺血后的治療。

1.5 基質(zhì)金屬蛋白酶與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases，MMPs）是由腦血管內(nèi)皮細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元和中性粒細(xì)胞以無活性的酶原形式分泌的一類依賴鋅離子的蛋白水解酶，其底物為W型膠原等細(xì)胞外基質(zhì)成分［14］。Chakraborti等［15］研究認(rèn)為，MMPs的分子結(jié)構(gòu)從N端至C端依次為信號(hào)膚、前膚、催化區(qū)（含高度保守的Zn2＋結(jié)合位點(diǎn)、交聯(lián)區(qū)和血紅素結(jié)合蛋白區(qū)）。根據(jù)分子結(jié)構(gòu)和作用底物的不同，MMPs分為5種類型：明膠酶、膠原酶、基質(zhì)溶解素、膜型金屬蛋白酶和其他未分類的MMPs。Mandal等［16］證實(shí)，MMPs廣泛參與了組織重塑、血管發(fā)生、胚胎發(fā)育和創(chuàng)傷愈合等生理學(xué)過程。Magnoni等［17］研究發(fā)現(xiàn)，明膠酶 A（MMP－2）和明膠酶B（MMP－9）在腦缺血再灌注損傷早期與血腦屏障（Blood Brain Barrier，BBB）破壞關(guān)系最為密切。Rosenberg等［18］研究發(fā)現(xiàn)，缺血再灌注后3hBBB開放與MMP－2相關(guān)，而缺血再灌注后48hBBB開放由 MMP－9所致。Zhao等［19］研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦缺血后7～14dMMP－9在梗死區(qū)域的表達(dá)升高。Wang等［20］通過聯(lián)合培養(yǎng)大鼠的SVZ神經(jīng)祖細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，以及重組促紅細(xì)胞生成素（Erythropoietin，EPO）處理的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MMP－2和 MMP－9的表達(dá)將會(huì)顯著提高。

1.6 膠質(zhì)細(xì)胞與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

血腦屏障結(jié)構(gòu)的重要組成部分是腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，其中99%以上的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞被星形膠質(zhì)細(xì)胞包裹［21］。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）中，星形膠質(zhì)細(xì)胞約占細(xì)胞總體積的1／2，其數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了神經(jīng)元，能夠控制神經(jīng)突觸的數(shù)量和功能［22-23］以及調(diào)節(jié)腦血流量［24］。在提供CNS代謝和營養(yǎng)支持、維持正常神經(jīng)元功能、調(diào)節(jié)突觸活性等方面起著重要的作用。在缺血缺氧時(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞往往會(huì)發(fā)生活化反應(yīng)，稱為反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞。主要表現(xiàn)為：①細(xì)胞增生和形態(tài)學(xué)的改變，包括細(xì)胞胞體肥大、腫脹和突起增多、延長以及反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞化。②相關(guān)蛋白表達(dá)的增加。在正常生理情況下，腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞起到了誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能，維護(hù)了腦微環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。錢貽裕等［25］研究發(fā)現(xiàn)，在腦缺血發(fā)生時(shí)，神經(jīng)元的再生和修復(fù)，星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)其有著極其重要的影響。星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元通過縫隙連接相互作用，釋放出神經(jīng)營養(yǎng)因子（Neurotrophic factor，NTF），對(duì)神經(jīng)元的存活至關(guān)重要。Chen等［26］研究發(fā)現(xiàn)，星形膠質(zhì)細(xì)胞能夠在損傷區(qū)形成一道保護(hù)屏障，促進(jìn)神經(jīng)元軸突的生長，提供神經(jīng)元軸突再生所需的營養(yǎng)。因此，星形膠質(zhì)細(xì)胞活化被認(rèn)為是一種自身保護(hù)性的調(diào)節(jié)，通過一系列生理過程發(fā)揮星形膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用。張敬軍等［27］通過實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為，活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌出大量的NO等毒性物質(zhì)，刺激生成活性氧，對(duì)神經(jīng)元的生存具有一定的毒性作用。所以，現(xiàn)在認(rèn)為對(duì)缺血導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷，星形膠質(zhì)細(xì)胞有著正面和負(fù)面的雙向作用。

1.7 單核細(xì)胞趨化蛋白－1、腫瘤壞死因子、C－反應(yīng)蛋白與缺血性腦血管疾病的關(guān)系

單核細(xì)胞趨化蛋合－l（Monocyte chemotactic protein－1，MCP－l）是一種可以將 G蛋白及 CCR2受體在靶細(xì)胞上連接的趨化因子［28］。MCP－1是T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞／巨噬細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞（Natural killer cell，NK）細(xì)胞的化學(xué)引誘物［28］。最近有研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠短暫性的大腦中動(dòng)脈阻塞再灌注實(shí)驗(yàn)中，持續(xù)再灌注超過3d，誘使MCP－1的表達(dá)可以激活小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的持續(xù)吸入。另外，有研究認(rèn)為，遷移的神經(jīng)母細(xì)胞在腦缺血中可以表達(dá) MCP－1受體CCR2，而 MCP－1和CCR2可以在大腦中動(dòng)脈閉塞后顯著降低祖細(xì)胞的遷移［29-33］。

腫瘤壞死因子－α（Tumor necrosis factor－α，TNF－α）是一種細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)功能，參與機(jī)體的免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)，在腦缺血再灌注后造成的損傷中起著比較重要的作用［34］。在體內(nèi)，主要是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF－α細(xì)胞。另外，還有受到刺激后神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的TNF－α。腦缺血再灌注后TNF－α的表達(dá)參與了腦缺血再灌注損傷的病理過程，具有損傷、保護(hù)及修復(fù)多重作用。由于神經(jīng)元的不可逆性，TNF－α的損害作用相比較而言更為明顯［35］。近來有人［36］研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血時(shí)ICAM－1 mRNA的表達(dá)與TNF－α表達(dá)是和炎癥細(xì)胞的作用時(shí)間成正比。在腦缺血中，TNF－α、mRNA 和ICAM－l mRNA的表達(dá)增加呈正相關(guān)［37］。在短暫性腦缺血時(shí)，TNF－α和IL－β也可以誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)ICAM－1［38-42］。

對(duì)于C反應(yīng)蛋白（C reactive protein，CRP），多數(shù)研究者認(rèn)為，CRP可以作為缺血性事件發(fā)生、發(fā)展中的一種獨(dú)立評(píng)價(jià)指標(biāo)［43］，CRP與缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。CRP被認(rèn)為是心血管疾病發(fā)生、發(fā)展標(biāo)志性因子。缺血性腦血管病的主要病因之一是動(dòng)脈粥樣硬化。大量的研究［44］表明，炎癥及炎性血清標(biāo)志物在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展中起著非常重要的作用，有可能直接參與了動(dòng)脈粥樣硬化形成的病理過程。

2 缺血性腦中風(fēng)的病因病機(jī)

缺血性腦中風(fēng)屬傳統(tǒng)“中風(fēng)”范疇。亦稱“卒中”，對(duì)缺血性腦中風(fēng)昏迷有“仆擊”、“大厥”、“煎厥”、“薄厥”等說法。對(duì)半身不遂又有“偏枯”、“偏風(fēng)”、“身偏不用”、“風(fēng)痱”等不同的名稱。如早在《內(nèi)經(jīng)》里已認(rèn)識(shí)到中風(fēng)病位在頭，其記載“大怒則形氣絕，血莞于上，使人薄厥……汗出偏沮，使人偏枯”。這個(gè)“上”指的就是頭部，菀者，盛而上沖也?？?，就是不用的意思，偏枯就是半身不利或不遂。《素問調(diào)經(jīng)論》曰：“氣血未并，五臟安定，肌肉蠕動(dòng)，命曰微風(fēng)。”《靈樞·刺節(jié)真邪第七十五》篇指出：“虛邪偏客于身半，其人深，內(nèi)居營衛(wèi)，營衛(wèi)稍衰，則真氣去，牙卜氣獨(dú)留，發(fā)為偏枯?！贝恕捌荨钡陌l(fā)生，乃因氣虛血癖；發(fā)失濡養(yǎng)而成?！端貑枴そ?jīng)脈篇》中記載：“氣絕則脈不通，脈不通則血不流?！币陨暇醪斤@現(xiàn)了氣虛血瘀的病機(jī)認(rèn)識(shí)。另外，《素問·脈解篇》曰：“內(nèi)奪而厥，則為癱，此腎虛也。”《素問·靈蘭秘典論》又道：“腎者，作強(qiáng)之官，伎巧出焉?！庇捎谀赀~而腎精虧虛，不能作強(qiáng)，筋骨失濡養(yǎng)，遂伎能失精巧。提出腎虛亦為中風(fēng)發(fā)生的要因。

張仲景繼承了《內(nèi)經(jīng)》中“氣虛血瘀”及“腎虛”論的思想，在《金遺要略·中風(fēng)歷節(jié)病脈證并治》寫到：“夫風(fēng)之為病，當(dāng)半身不遂，或但臂不遂者，此為痹。脈微而數(shù)，中風(fēng)使然”、“絡(luò)脈空虛，賊邪不瀉?！敝倬八浴氨浴睘槟I精虧虛所致，“脈微”則為氣虛血瘀結(jié)果?！吨T病源候論》亦有“風(fēng)偏枯者，由血?dú)馄?，則腠理開，受于風(fēng)濕”、“半身不遂，脾胃虛弱，血?dú)馄?，為風(fēng)邪所乘”的記載。此屬內(nèi)虛邪中的“外風(fēng)論”，對(duì)后世認(rèn)識(shí)缺血性腦中風(fēng)產(chǎn)生了很大的影響?！短绞セ莘健ぞ淼诙伟c疾風(fēng)諸方》曰：“肝腎久虛，氣血不足，揍理疏泄，風(fēng)邪易侵?！狈磻?yīng)了肝腎陰虛、氣虛的致病作用?！端貑枴げC(jī)氣宜保命集》中指出：“中風(fēng)者，俱有先兆之證。凡人如覺大拇指及次指麻木不仁，或手足不用，或肌肉蠕動(dòng)者，三年內(nèi)必有大風(fēng)之至?！薄兜は姆ǜ接唷ぶ酗L(fēng)》中指出“中風(fēng)之證，多是老年因怒而成。蓋老年腎水真陰衰，火寡于畏，適因怒動(dòng)肝火，火無所制，得以上升，心火得助，痰熱暴甚，所以僵仆不知人事?；疠d疾上，所以舌強(qiáng)不語，口眼歪斜，痰涎塑盛也?！?/p>

張景岳創(chuàng)造性提出了缺血性腦中風(fēng)并非屬于外感而是內(nèi)傷，倡導(dǎo)“非風(fēng)”的說法，提出“內(nèi)傷積損”的觀點(diǎn)。《景岳全書·非風(fēng)》中指出“凡病此者，多以素不能慎，或七情內(nèi)傷，或酒色過度，先傷五臟之陰……”李中梓提出了“閉證”、“脫證”的概念。葉天士認(rèn)為“精血衰耗，水不涵木……肝陽偏亢，內(nèi)風(fēng)時(shí)起”等一系列的觀點(diǎn)，體現(xiàn)了歷代醫(yī)家對(duì)缺血性腦中風(fēng)認(rèn)識(shí)上的逐漸深化及系統(tǒng)化。

明代李時(shí)珍提出“腦為元神之腑”學(xué)說，對(duì)腦的作用有了較深刻的認(rèn)識(shí)。“元神”即人的真神、主神，元神主宰人的一切活動(dòng)，為今天的腦中風(fēng)病名確定莫定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。王清任在《醫(yī)林改錯(cuò)》中進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到腦的作用，腦為生命之中樞，腦主神明，統(tǒng)管思維、運(yùn)動(dòng)、語言、功能協(xié)調(diào)等一切活動(dòng)。故此現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中醫(yī)學(xué)界已經(jīng)形成“缺血性腦中風(fēng)”的診斷病名?，F(xiàn)在，“中風(fēng)”通常是指包括腦出血、腦梗死、蛛網(wǎng)膜下腔出血在內(nèi)的一組急性腦血管疾病的總稱。腦梗死又稱為缺血性中風(fēng)或缺血性腦卒中。

3 缺血性腦血管疾病的主要?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)研究模型

3.1 全腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?/h3>

全腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭饕譃樗难荛]塞和雙血管閉塞缺血實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停难荛]塞缺血?jiǎng)游锬Ｐ妥钤缬蒔ulsineli和 Brierley等［45-46］通過阻斷實(shí)驗(yàn)大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈和椎動(dòng)脈而引起全腦缺血。該實(shí)驗(yàn)方法能夠?qū)е麓竽X嚴(yán)重缺血并有較高的可重復(fù)性，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅容^穩(wěn)定。此外，還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是可通過頸動(dòng)脈夾的開閉控制缺血與再灌時(shí)間，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)不同程度的腦缺血損傷。因此，該模型在一些比較重要的生理代謝研究，尤其是腦缺血的實(shí)驗(yàn)研究方面有著較為廣泛的用途。另外一種方法是Levene等［47］研究發(fā)現(xiàn)，沙土鼠缺乏完整的Willis環(huán)，如果結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈（Common caroti d artery，CCA）就可以造成全腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，若要觀察沙土鼠的缺血再灌注（暫時(shí)腦缺血），則以通過無創(chuàng)微血管夾夾閉動(dòng)脈，3h后解除夾閉，進(jìn)行再灌注。此模型的優(yōu)點(diǎn)是操作方便、簡單易行，現(xiàn)在被廣泛用于對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞不可逆的遲發(fā)死亡（Delaye d neuronal death，DND）的研究和對(duì)新的神經(jīng)保護(hù)劑的篩選。雙血管閉塞缺血?jiǎng)游锬Ｐ陀蒃klof等［48］采用阻斷實(shí)驗(yàn)大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈聯(lián)合血壓下降（放血或使用降壓藥物）的方法建立可逆性腦缺血。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，重復(fù)性好，并且容易控制再灌注的時(shí)間，在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)用比較廣泛。

3.2 局灶性腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)研究模型

局灶性腦缺血模型主要是以大腦中動(dòng)脈閉塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）而形成的大鼠局灶性腦缺血模型，在腦缺血的實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)用比較廣泛。1981年Tamura等［49］應(yīng)用開顱的方法首先建立該模型，后來不斷得到改進(jìn)。該方法在直視下操作，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的梗死成功率高，缺血效果好，并且適用于腦缺血后長期神經(jīng)功能缺損的康復(fù)及介入治療策略的研究。但是，由于此種方法造成的創(chuàng)傷面大，在手術(shù)過程中容易感染，并且需要較高的外科手術(shù)技巧，無法再灌注等缺點(diǎn)限制了此種方法的推廣應(yīng)用。1986年Koizumi等［50］采用線栓的方法建立中灶性腦缺血模型。研究者們不斷摸索，提出了許多改良方法。最具有代表性的是Koizumi和Longa法，Koizumi是將40號(hào)尼龍線前段5mm長的部分涂上一層硅樹脂，使其直徑增至0.25～0.30mm；Longa是將40尼龍線頭端燒成圓頭，圓頭直徑稍大于尼龍線本身直徑。后來不斷有研究者將此兩種方法進(jìn)行對(duì)比，Laing等［51］研究認(rèn)為，Koizumi法比Longa法在梗塞效果和模型成功率上有更好的效果。用尼龍線栓塞的方法不需要開顱，制作的模型重復(fù)性好。模型造成功后形成的腦梗死范圍大小的差異比較小，且缺血部位比較穩(wěn)定，并且能夠準(zhǔn)確的控制腦缺血－再灌注的時(shí)間，適用于藥效的評(píng)價(jià)及腦缺血－再灌注多方面的研究，是目前制作局灶性腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷睦硐敕椒ā?982年Kudo等［52］應(yīng)用自體血栓注入腦動(dòng)脈形成腦栓塞的大鼠模型。栓塞法制作的MCAO模型與臨床腦血栓和腦栓塞病理過程最為接近，并且制作方法簡單，缺血效果穩(wěn)定、可靠。尤其是適用于纖維蛋白原激活系統(tǒng)血栓效應(yīng)的研究和溶栓治療的觀察等方面。但是，由于在制做模型時(shí)每位研究者所用的栓子比較隨意，無法預(yù)測栓塞的部位及大小。還有，側(cè)支循環(huán)的影響使組織缺血程度也不一樣。種種因素使線栓法制做的局灶性腦缺血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒焕谏窠?jīng)癥狀的觀察和組織定量分析。

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