(廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥藥理實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510006)

高良姜為姜科植物高良姜 Alpinia of ficinarum Hance的干燥根莖，主產(chǎn)于廣西、廣東、云南以及臺(tái)灣等地區(qū)，具有溫胃散寒、消食止痛等功效，臨床常用于胃寒嘔吐、脘腹冷痛等病癥的治療[1]。筆者觀察了高良姜對(duì)小鼠痛閥值、小鼠扭體次數(shù)和家兔離體腸管運(yùn)動(dòng)功能的影響，以期為其臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與儀器

本試驗(yàn)所用高良姜來(lái)自廣東雷州半島產(chǎn)地，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院張丹雁老師鑒定并提供。高良姜切成碎片后加水，用10倍量的水煎煮2次，然后濃縮至質(zhì)量濃度為1 g/mL，并分別制成高、中、低 3 種劑量溶液(1.0，0.5，0.25 g/mL);羅通定注射液(成都市湔江制藥廠，批號(hào)為H51021203);硫酸阿托品注射液(天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號(hào)為0907091);乙酰膽堿(上海三愛思試劑有限公司，批號(hào)為100960321);乙酸(汕頭市光華化學(xué)廠，批號(hào)為20030423)。

KM小鼠，體重18～22 g，雌雄各半，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)[SCXK(粵)2008－0020];新西蘭白兔，2.5～3.0 kg，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)[SCXK(粵)2008－0020]。

YLS－6A型智能熱儀板(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)設(shè)備站);HW－410型平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司);BL－420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 鎮(zhèn)痛作用

2.1.1 小鼠扭體試驗(yàn)[2－4]

選取雄性KM小鼠，體重18～22 g，隨機(jī)分為空白組，羅通定組，高良姜低、中、高劑量組。羅通定組和高良姜組小鼠每只按0.2 mL/10 g灌胃給藥，連續(xù)給藥2次，第1次給藥間隔4 h，空白組給予等量蒸餾水。末次給藥后2 h，各組小鼠腹腔注射0.8%醋酸+0.9%氯化鈉注射液，觀察20 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。比較各組間的差異，結(jié)果見表1。結(jié)果表明，與空白組比較，高良姜高、中劑量組和羅通定組的KM小鼠扭體次數(shù)明顯減少(P＜0.01)，而高良姜低劑量組的扭體次數(shù)沒有顯著性差異(P＞0.05)。

表1 小鼠扭體試驗(yàn)結(jié)果(X ± s，n=10)

2.1.2 小鼠熱板試驗(yàn)[2－4]

選取雄性KM小鼠，體重18～22 g，分組方法同2.1.1項(xiàng)，使用智能熱板儀衡溫(55±0.5)℃測(cè)定篩選，重復(fù)2次。測(cè)定其正常痛閾值，選取基礎(chǔ)痛閾為5～30 sec的小鼠，取2次痛閾的平均值作為該小鼠的基礎(chǔ)痛閾值。給藥方法同2.1.1項(xiàng)，觀察30，60，120 min時(shí)小鼠的反應(yīng)。如1 min仍無(wú)反應(yīng)，其痛閾值以1 min計(jì)。計(jì)算痛閾提高百分率，痛閾提高百分率=(藥后痛閾－基礎(chǔ)痛閾)/基礎(chǔ)痛閾×100%，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，與空白組比較，高良姜高劑量組的痛閾提高百分率在給藥后1，2 h具有顯著性差異(P＜0.05);中劑量組、羅通定組的痛閾值提高百分率在給藥后 0.5，1，2 h 具有顯著性差異(P ＜0.01);低劑量組的痛閾提高百分率在給藥后 0.5，1，2 h 無(wú)顯著性差異(P ＞0.05)。

表2 小鼠熱板試驗(yàn)結(jié)果(X ± s，n=10)

2.2 對(duì)離體兔腸管運(yùn)動(dòng)的影響

2.2.1 對(duì)正常離體兔腸管運(yùn)動(dòng)的影響[5－6]

選取新西蘭白兔，隨機(jī)分為空白組，阿托品組和高良姜高、中、低劑量組，均禁食24 h，空氣栓塞處死，剖腹取出空腸和回腸上段，置冷臺(tái)試劑中，將腸管剪成每段5～9 cm，洗去內(nèi)容物，置冰箱備用。試驗(yàn)時(shí)剪1～2 cm腸段，置于含有15 mL 37℃臺(tái)式液的恒溫平滑肌水浴槽中，緩慢持續(xù)通空氣，腸段兩端分別固定于通氣鉤和張力換能器上，待腸段自發(fā)性舒縮穩(wěn)定后描記腸正常運(yùn)動(dòng)曲線。往浴槽中分別加入阿托品及高良姜液各劑量組藥液，每次給藥體積為0.2 mL，描記腸管舒縮曲線，完成后立即使用新鮮臺(tái)氏液沖洗2～3次，待腸段舒縮恢復(fù)正常后才可進(jìn)行下一次給藥，無(wú)法恢復(fù)舒縮的腸管棄去，試驗(yàn)結(jié)束后保存記錄文件，用區(qū)間測(cè)量法測(cè)量給藥前1 min和給藥后5 min的平均張力，并根據(jù)平均張力值計(jì)算抑制率，抑制率=(給藥前張力－給藥后張力)/給藥前張力×100%。結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，高良姜低、中、高劑量組均可升高正常離體兔腸運(yùn)動(dòng)抑制率，與空白對(duì)照組比較，差異有顯著性(P ＜0.05或 P ＜0.01)。

表3 高良姜對(duì)正常離體兔腸運(yùn)動(dòng)的影響(X ± s，n=10)

2.2.2 對(duì)乙酰膽堿所致離體兔腸痙攣的影響[7－8]

選取新西蘭白兔，分組方法同2.2.1項(xiàng)，各組均加入0.2 mL 1.5 g/mL乙酰膽堿致痙攣后，空白組加入蒸餾水，阿托品組加入阿托品注射液，高良姜低、中、高劑量組分別加入 0.25，0.5，1.0 g/mL質(zhì)量濃度的高良姜溶液。分別記錄給蒸餾水和乙酰膽堿前1 min和后第6分鐘的平均張力，和給予不同劑量高良姜液前1 min和后第3分鐘的平均張力，計(jì)算抑制率并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表4。結(jié)果顯示，高良姜低、中、高劑量液均可升高乙酰膽堿所致痙攣性兔腸的抑制率，與空白組比較，差異均有顯著性(P＜0.01)，而且顯示出量效關(guān)系。

表4 高良姜對(duì)乙酰膽堿所致兔腸痙攣的影響(X ± s，n=10)

3 討論

疼痛是炎癥的常見癥狀[9]，常用的致痛方法有物理性和化學(xué)性刺激法。小鼠的扭體試驗(yàn)和熱板試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，高良姜對(duì)物理性和化學(xué)性刺激所致疼痛有顯著作用，提示該藥用于臨床上脘腹冷痛等病癥的治療，可明顯緩解癥狀;在與中樞神經(jīng)、體液調(diào)控脫離的條件下，高良姜液對(duì)離體腸管有顯著抑制作用。乙酰膽堿是一種神經(jīng)遞質(zhì)，能激動(dòng)M膽堿能受體，興奮胃腸道，從而增加腸道的收縮幅度和張力[5]。高良姜液對(duì)乙酰膽堿所致痙攣有明顯解痙作用，說(shuō)明高良姜液具有拮抗膽堿能受體的作用，而不是單純通過(guò)擬制膽堿酯酶或直接影響膽堿酯酶的功能來(lái)起作用。綜上所述，高良姜具有明顯的鎮(zhèn)痛和抑制正常和痙攣離體兔腸管運(yùn)動(dòng)的作用，這為其在臨床上用于胃寒嘔吐、脘腹冷痛、噯氣吞酸等的治療提供了一定的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].廣州:廣東科技出版社，1995:255.

[2]陳 奇，鄧文龍，張世瑋，等.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:355.

[3]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:377－379.

[4]張明發(fā)，范榮培，郭慧玲，等.溫里藥鎮(zhèn)痛作用研究[J].陜西中醫(yī)，1989，10(5):231.

[5]吳清和，榮向路，黃 萍，等.高良姜素的藥效學(xué)研究[J].中藥材，2000，23(11):699－701.

[6]操電群.胃腸運(yùn)動(dòng)神經(jīng)調(diào)節(jié)與高良姜胃腸解痙的可能途徑[J].甘肅中醫(yī)，2004，17(4):7－9.

[7]張明發(fā)，范榮培，郭慧玲，等.溫里藥對(duì)小鼠胃排空及離體兔小腸活動(dòng)的影響[J].中醫(yī)雜志，1984，25(12):943.

[8]吳清和，林 蕊，曾曉會(huì).高良姜超臨界萃取物腸管解痙作用膽堿能機(jī)制的研究[J].中藥材，2004，27(10):739－741.

[9]吳清和，林 蕊，曾曉會(huì).高良姜超臨界萃取物對(duì)兔離體腸管解痙作用機(jī)制的研究[J].中藥藥理與臨床，2004，20(4):22－23.