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IFABP、LFABP檢測(cè)技術(shù)在小兒腸缺血中的應(yīng)用

2012-01-28 10:43立梁海峰
關(guān)鍵詞:腸管腸梗阻入院

李 立梁海峰

IFABP、LFABP檢測(cè)技術(shù)在小兒腸缺血中的應(yīng)用

李 立1梁海峰2

IFABP;LFABP;小兒腸缺血

2009年2月至2011年4月,我們通過對(duì)臨床腸缺血患兒血清中肝、腸脂肪酸結(jié)合蛋白變化的研究,來探討其臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按入院時(shí)間收集2009年2月 2011年4月間在我院住院的機(jī)械性腸梗阻患兒92例,年齡為5月~9歲,男58例,女34例。嵌頓病32例,男22例,女10例,全部I期行病修補(bǔ)術(shù),因腸壞死行腸切除、腸吻合術(shù)者8例;腸套疊24例,男16例,女8例,全部開腹手術(shù),因腸壞死行腸切除、腸吻合術(shù)者10例;粘連性腸梗阻36例,男20例,女16例,保守治療(胃腸減壓,3:2:1液灌腸,中藥鼻飼)24例,12例開腹手術(shù)松解粘連,其中4例因腸壞死行腸切除、腸吻合術(shù)。

對(duì)于92例機(jī)械性腸梗阻患兒,分為實(shí)驗(yàn)組1(腸壞死手術(shù)切除腸管組)22例;實(shí)驗(yàn)組2(手術(shù)未切除腸管組)46例;實(shí)驗(yàn)組3(未手術(shù)組)24例,取闌尾炎患兒20例作為實(shí)驗(yàn)組4,對(duì)照組為正常兒童20例。

1.2 標(biāo)本采集

對(duì)照組采外周靜脈血1次,實(shí)驗(yàn)組患兒分別于入院時(shí)、術(shù)后(有效治療)第1天、術(shù)后(有效治療)第3天采外周靜脈血3次,分別檢測(cè)血標(biāo)本中I-FABP、L-FABP水平。

1.3 IFABP與LFABP的檢測(cè)方法

IFABP與LFABP的測(cè)定采用美國(guó)RD公司提供的ELISA試劑盒進(jìn)行,具體方法如下:①按照說明將標(biāo)準(zhǔn)品在酶標(biāo)包被板上梯度稀釋,稀釋后各孔加樣量均為50uL,濃度分別為900ng/m L,600ng/m L,300ng/m L,150ng/m L,75ng/m L。②加樣。分別設(shè)空白孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40uL,然后再加待測(cè)樣品l0uL。將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。③溫育。用封板膜封板后置37℃溫育30m in。④配液。將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。⑤洗滌。小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30s后棄去,如此反復(fù)5次,拍干。⑥加酶。每孔加入酶標(biāo)試劑50uL。⑦溫育、洗滌。操作同③、⑤。⑧顯色。每孔先加入顯色劑ASOuL,再加入顯色劑BSOuL,輕輕震動(dòng)混勻,37℃避光顯色15m in。⑨終止。每孔加終止液50uL,終止反應(yīng)。⑩測(cè)定。以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

利用SPSS15.0進(jìn)行資料的輸入和統(tǒng)計(jì)分析,進(jìn)行計(jì)量資料的t檢驗(yàn)及方差分析。P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清IFABP的變化

入院時(shí),實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3血清IFABP水平明顯高于對(duì)照組,以實(shí)驗(yàn)組1最高,其次為實(shí)驗(yàn)組2,實(shí)驗(yàn)組1與實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3之間均有顯著差異,說明血清IFABP水平與腸壞死、腸缺血的程度呈正相關(guān);術(shù)后(有效治療)第1天實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3與對(duì)照組無差異,表明腸壞死、腸缺血糾正后,血清IFABP水平恢復(fù)正常。術(shù)后(有效治療)第3天所有腸梗阻組較前無變化。入院時(shí)實(shí)驗(yàn)組4血清IFABP水平與對(duì)照組無差別,且術(shù)前與術(shù)后無差別,證明單純腸道炎癥并不能引起血清IFABP水平的升高,手術(shù)對(duì)血清IFABP亦無影響。

2.2 血清LFABP的變化

入院時(shí),實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3血清LFABP水平明顯高于對(duì)照組(P均<0.001),實(shí)驗(yàn)組1與實(shí)驗(yàn)組2較實(shí)驗(yàn)組3之間均有顯著差異(P <0.001),實(shí)驗(yàn)組1與實(shí)驗(yàn)組2之間無差異(P>0.05);術(shù)后(有效治療)第1天實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3與對(duì)照組無差異,表明腸壞死、腸缺血糾正后,血清LFABP水平恢復(fù)正常。術(shù)后(有效治療)第3天所有腸梗阻組較前無變化。入院時(shí)實(shí)驗(yàn)組4血清LFABP水平與對(duì)照組無差別,且術(shù)前與術(shù)后無差別,證明單純腸道炎癥并不能引起血清IFABP水平的升高,手術(shù)對(duì)血清LFABP亦無影響。

3 討論

腸梗阻所致的腸缺血可損傷腸道粘膜上皮機(jī)械屏障和免疫屏障,致多種介質(zhì)釋放,如血小板活化因子(PAF)、腫瘤壞死因子(TNF)、心臟抑制因子、IL-2、IL-6等,可并發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合癥(SIRS)。缺血的腸管不能有效阻止腸道內(nèi)細(xì)菌和內(nèi)毒素向腸道外移位而引起菌血癥和內(nèi)毒素血癥。腸缺血還可使血流緩慢和粘附分子表達(dá)的增加致腸管內(nèi)白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和血小板聚集,從而進(jìn)一步損害灌注,加重酸中毒和有利于DIC的發(fā)生。腸道缺氧導(dǎo)致大量氧自由基產(chǎn)生及腸勃膜細(xì)胞的鈣超載,致細(xì)胞死亡。本試驗(yàn)證明所有腸梗阻患兒入院時(shí)血清IFABP水平均明顯高于正常對(duì)照組,且與腸缺血程度呈正相關(guān),以腸壞死組升高最明顯。如果腸梗阻患兒血清IFABP值超過800ng/m L,有絞窄性腸梗阻可能,建議考慮剖腹探查;如果超過1000ng/m L,建議早期剖腹探查,因?yàn)榭赡芤呀?jīng)發(fā)生腸壞死。術(shù)前血清IFABP水平與病變腸管長(zhǎng)度呈正相關(guān)。腸缺血糾正后,IFABP在術(shù)后(有效治療)第1天馬上恢復(fù)到正常水平,證明其提示預(yù)后的敏感性也較好。闌尾炎組無論術(shù)前術(shù)后,血清IFABP水平均與對(duì)照組無明顯差異,證明單純腸道炎癥及開腹手術(shù)對(duì)IFABP無影響。IFABP是早期診斷腸缺血、敏感性和特異性均較高的生物學(xué)指標(biāo),且隨病變腸管程度的加重而增高。本試驗(yàn)顯示所有腸梗阻患兒入院時(shí)血清LFABP較對(duì)照組明顯升高,其中實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2較實(shí)驗(yàn)組3升高明顯(P<0.01),但實(shí)驗(yàn)組1與實(shí)驗(yàn)組2之間無顯著差異(P>0.05),證明LFABP水平與腸缺血程度有一定相關(guān),而三組之間的差異,作者認(rèn)為實(shí)驗(yàn)組2血清LFABP的升高是腸缺血與腸道干細(xì)胞再生分化共同作用的結(jié)果;實(shí)驗(yàn)組1因?yàn)榘l(fā)生腸壞死影響了腸道干細(xì)胞分化,其血清LFABP的升高主要是由腸壞死引起;實(shí)驗(yàn)組3血清LFABP升高可能只是對(duì)腸道勃膜輕度損傷,尚未或輕微激發(fā)腸道干細(xì)胞的分化所致。

[1] 沈滌華,施誠(chéng)仁,吳燕,徐遠(yuǎn)飛. 腸脂肪酸結(jié)合蛋白變化在腸道疾病的臨床意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2009,21(22):2535-2536.

1勝利石油管理局現(xiàn)河衛(wèi)生院 山東東營(yíng) 257068

2山東省東營(yíng)市東營(yíng)區(qū)人民醫(yī)院 山東東營(yíng) 257085

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