郝 穎（綜述），付秀華（審校）

（內蒙古醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院呼吸內科，呼和浩特 010059）

肺癌是威脅人類生命的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率乃居惡性腫瘤之首，其中非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）病例占全部肺癌病例的80%。近些年，針對肺癌綜合治療的研究已取得較大成績，但肺癌總的5年生存率仍只有13%，即使Ⅰ、Ⅱ期 NSCLC患者，術后5年生存率也只有 40% ～ 70%［1，2］，其主要限制因素為肺癌的復發(fā)和遠處轉移，故及早發(fā)現(xiàn)NSCLC患者是否有微轉移存在對疾病的診斷分期、治療方案的選擇及預后評價有積極意義。

1 LunX mRNA與肺癌微轉移

肺特異性X蛋白（lungspecific X protein，LunX）mRNA是日本學者Iwao等運用差異顯示技術通過對人體13種不同組織中分離出來的RNA，該基因定位于20p11.1～ q12，全長 1015 bp，包括一個編碼 26 個氨基酸的768個核苷酸的開放式讀碼框。由它所合成的人LunX的相對分子質量為26.7×103。研究表明，LunX基因僅在肺組織中特異表達，而在肺外組織不表達［3］。LunX的生理功能暫不明確。微轉移是指惡性腫瘤在發(fā)展過程中，播散并存活于血循環(huán)、淋巴道、骨髓及各組織器官中，尚未形成轉移結節(jié)，無臨床表現(xiàn)，CT、B超、骨掃描等常規(guī)檢測方法和臨床病理檢查都難以檢測發(fā)現(xiàn)的一種微量轉移。微轉移是腫瘤多階段、多步驟中的過程之一，最終轉移病灶的形成受到脫落癌細胞的自身生物學特性、機體免疫狀況、局部血供形成等各方面的影響［4］。選擇恰當?shù)陌谢蚴菦Q定檢測結果是否可靠的重要因素，有研究認為，LunX mRNA對肺癌外周血及區(qū)域淋巴結微轉移具有較高的敏感性和特異性［5，6］，且目前研究發(fā)現(xiàn)的其他肺癌特異性基因較少，因此組織特異性mRNA常被用于檢測肺癌的微轉移［7］。

2 LunX mRNA檢測技術及取材部位

反轉錄-聚合酶鏈反應可在106～107個正常細胞中檢出1～10個腫瘤細胞，檢測微轉移的靈敏度比傳統(tǒng)的免疫細胞化學方法高出10～100倍，是目前用于診斷NSCLC微轉移的最常用技術。熒光實時反轉錄-聚合酶鏈反應實現(xiàn)了基因表達定量檢測，其中，絕對定量準確，但操作過程繁瑣;相對定量操作相對簡單，但定量不夠準確［8］，這成為限制LunX mRNA檢測在臨床廣泛應用的瓶頸，有待一種定量更精準、操作更簡易、價格更經濟的檢測技術的問世。肺癌的微轉移研究的常規(guī)取材部位包括區(qū)域淋巴結、外周血、骨髓及胸膜腔微轉移，多數(shù)報道是對NSCLC的外周血及淋巴結微轉移的研究，國內對骨髓、胸腔積液的實驗研究尚不多。Cheng等［9］在NSCLC患者外周血及胸腔積液中均檢測到LunX mRNA的表達，且是良惡性胸腔積液唯一顯著不同的檢測指標。

3 LunX mRNA與NSCLC的病理分型

LunX mRNA在不同病理類型NSCLC患者的陽性表達各家報道不一。莊翔等［10］通過對60例Ⅰ～Ⅲ期手術肺癌患者、20例肺部良性病變手術患者及10例健康人外周血LunX mRNA檢測后認為，不同病理類型肺癌患者外周血的LunX基因陽性表達無統(tǒng)計學差異，可以避免由于肺癌病理類型較多而導致檢測結果的假陰性，獲得較好的敏感性。馮斌等［11］的實驗得出同樣結果，外周血LunX mRNA表達情況在不同病理類型之間差異無明顯統(tǒng)計學意義，說明在中晚期NSCLC患者中不論是腺癌或鱗癌，外周血微轉移發(fā)生的機會可能相似。姚舒洋等［12］的實驗結果，LunX mRNA的淋巴結轉移與肺癌病理組織類型無關。但也有研究認為NSCLC患者LunX mRNA的表達與病理類型有相關性。劉宏偉等［13］通過對54例NSCLC患者、50例肺良性病變和25例健康者外周血的研究發(fā)現(xiàn)，腺癌患者外周血LunX mRNA的陽性率高于非腺癌患者，由此可以預測腺癌更容易發(fā)生遠處轉移;低分化患者外周血微轉移的陽性率高于中分化和高分化患者，說明外周血LunX mRNA的陽性率與患者的細胞分化程度有關，分化程度越低，癌細胞的惡性程度越高，外周血LunX mRNA的陽性檢出率越高。黃同海等［14］的實驗結果也顯示，LunX mRNA在肺腺癌中表達的陽性率高于鱗癌中的陽性表達。

4 LunX mRNA與NSCLC的分期

多數(shù)學者認為，LunX mRNA表達與TNM分期密切相關。姚舒洋等［12］認為，LunX mRNA表達隨著TNM分期的升高而增多，提示LunX mRNA與肺癌的微轉移密切相關。劉宏偉等［13］在研究后發(fā)現(xiàn)，Ⅲ期和Ⅳ期患者LunX mRNA的檢出率明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，TNM分期越高，LunX mRNA的陽性率越高。馮斌等［11］作了更加細致的分析:實驗病例中，Ⅳ期患者陽性率顯著高于Ⅲ期，提示肺癌患者分期越晚，腫瘤負荷越大，轉移越廣泛，外周血癌細胞檢測陽性率越高，為腫瘤的進一步轉移提供條件。莊翔等［10］的研究結果表明，Ⅰ期和Ⅱ期肺癌患者的LunX mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義，Ⅲ期患者與Ⅰ期、Ⅱ期患者的LunX mRNA表達差異有統(tǒng)計學意義，提示LunX mRNA用于檢測早期肺癌微轉移以區(qū)別Ⅰ期與Ⅱ期的敏感性不夠，但對中晚期肺癌患者的微轉移診斷有幫助。朱廣迎等［15］也有同樣的報道，但Mitas等［5］對24例Ⅰ～Ⅳ期肺癌患者的研究后認為，LunX mRNA的表達與肺癌分期的關系并不密切。

5 LunX mRNA與NSCLC患者的治療

通過檢測NSCLC患者LunX mRNA的表達以明確是否有微轉移的存在，從而可對治療方案的制訂提供重要依據(jù)。余小琴等［16］對NSCLC治療前和常規(guī)化療或手術治療后的病例分別進行LunX mRNA檢測，發(fā)現(xiàn)治療前病例陽性率約為0.87%，治療后病例陽性率為0.47%，兩者陽性率有明顯差別，說明LunX mRNA有可能成為考核臨床治療效果，尤其是化療效果的重要參考指標。如上所述，劉宏偉等［13］認為，低分化患者外周血LunX mRNA的陽性率高于中分化和高分化患者，建議臨床上要對病理檢查為細胞分化程度低的NSCLC患者進行全身性化療，防止微轉移的發(fā)生。馮斌等［11］對不同客觀療效的亞組分析發(fā)現(xiàn)，化療療效與外周血LunX mRNA表達顯著相關，部分緩解組和穩(wěn)定組患者陽性率均較化療前顯著降低，分別為23.81%、26.09%，而進展組患者陽性率無明顯降低，與化療前相似，提示化療可使有效或穩(wěn)定患者的外周血癌細胞數(shù)量顯著下降，而對病情進展患者的作用不大;化療過程中多次監(jiān)測外周血中循環(huán)癌細胞的LunX mRNA表達情況:化療1周期后外周血LunX mRNA陽性表達率即顯著下降，繼續(xù)化療2周期后陽性率未發(fā)現(xiàn)繼續(xù)降低，提示在全身化療的初始階段，外周血循環(huán)癌細胞的變化情況已經可以預示化療的客觀療效。Sher等［17］也認為，循環(huán)癌細胞的檢測為快速判定治療效果和改善預后提供了一種新的方法，特別是外周血LunX mRNA表達轉陰的患者從后續(xù)化療中獲益更大，而化療后外周血循環(huán)癌細胞檢測仍陽性的患者提示療效較差，可能從原方案的后續(xù)化療中獲益機會不大，腫瘤細胞可能存在繼發(fā)或原發(fā)耐藥，需要重新制訂治療計劃以充分獲益。

臨床證實，依據(jù)以往的NSCLC TNM分期制訂的治療方案已經不能滿足治療需要運用分子生物學的方法發(fā)現(xiàn)早期肺癌微轉移，有助于更準確地進行TNM分期，對指導肺癌多學科綜合治療、監(jiān)測治療療效有重要的指導意義。［18］

6 LunX mRNA與NSCLC患者預后評價

莊翔等［10］提出，由于LunX基因在2001年才被發(fā)現(xiàn)，LunX的生物學行為尚不明確，目前缺乏長期隨訪的研究來證實其臨床價值。在短期的隨訪中，朱廣迎等［15］通過6～16個月隨訪LunX基因表達陽性組復發(fā)和轉移率為52%，陰性組復發(fā)和轉移率為18%（其缺乏統(tǒng)計學意義，可能與病例數(shù)較少有關），提示LunX mRNA陽性表達與轉移有較為密切的關系。牛瑞等［19］對74例NSCLC患者進行3年的隨訪觀察發(fā)現(xiàn)，年齡、營養(yǎng)指數(shù)、3年內的復發(fā)或轉移率與手術切除區(qū)域淋巴結LunX mRNA檢出率之間有統(tǒng)計學意義上的相關性，可能為患者年齡的增高、機體營養(yǎng)狀況差而導致免疫狀況減低，腫瘤細胞容易形成遠處轉移?；颊叩纳鏁r間與LunX mRNA的表達亦有相關性，對評估預后及個體化治療策略具有重要臨床意義，但存在淋巴結微轉移并非最終一定形成顯性轉移，還與癌細胞自身生物學特性、機體免疫狀況、局部微環(huán)境等多因素有關，提示微轉移的發(fā)生為多基因、多因素、多步驟綜合作用的結果。

7 結語

NSCLC的發(fā)生發(fā)展是一個多因素參與的復雜過程，LunX與NSCLC存在有密切關系，其機制尚不清楚，LunX有望成為早期診斷NSCLC的理想分子標志物。目前，免疫組化技術已經應用于臨床，多是對癌組織、淋巴結等實體組織的檢測，患者必須經過有創(chuàng)操作才能獲取標本，甚至手術。反轉錄-聚合酶鏈反應技術對標本取材部位的要求較低，可以選擇外周血、骨髓、淋巴結、癌組織等多種組織為標本，但因該技術假陰性或假陽性的發(fā)生率較高，限制了其在臨床診斷性檢驗的推廣。故能夠發(fā)明一種取材方便、操作簡易、檢測快捷準確、廉價的新型技術將成為腫瘤研究的新方向。然而，探究LunX與NSCLC預后的關系具有著重大意義。當前與NSCLC相關的分子標志物的研究各家報道不一，LunX能否成為NSCLC的一個獨立的預后指標還值得繼續(xù)研究，有待更多循證醫(yī)學證據(jù)支持。

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