胡錦鵬，陳 萍，朱胤龍，梁馨月

(1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院，陜西 西安 710003；2.西安石油大學(xué)，陜西 西安 710061)

沙棘菌芝化學(xué)成分初探

胡錦鵬1，陳 萍1，朱胤龍1，梁馨月2

(1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院，陜西 西安 710003；2.西安石油大學(xué)，陜西 西安 710061)

目的初步探索沙棘菌芝未知的化學(xué)成分。方法采用系統(tǒng)預(yù)試法，對沙棘菌芝的溶劑提取物進(jìn)行研究，通過多種指示劑和顯色劑的沉淀反應(yīng)或顏色反應(yīng)，確定其可能含有的化學(xué)成分。結(jié)果沙棘菌芝中含有氨基酸、糖、有機(jī)酸、皂苷、黃酮類、酚類、生物堿和揮發(fā)油等化學(xué)成分。結(jié)論初步確定了沙棘菌芝含有多種化學(xué)成分，為今后其活性成分的確定和開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

沙棘菌芝；預(yù)實(shí)驗(yàn)；化學(xué)成分

沙棘菌芝(Fomitiporiarobusta)為嗜藍(lán)孢孔菌屬銹草孔菌科植物Fiasson & Niemela.的干燥子實(shí)體，學(xué)名為稀針嗜藍(lán)孢孔菌。主產(chǎn)于陜西藍(lán)田、周至、寶雞、隴縣等地，主要分布在我省秦嶺北麓海拔2000米左右向陽山地，以沙棘樹為其寄主，故名“沙棘菌芝”，全年可采摘。本品甘溫微苦。歸心、肝、脾、胃經(jīng)。具有扶正固本，健脾消積，化痰利濕功能。用于心悸氣短、飲食積滯、脘腹脹滿、咳嗽氣喘等癥治療。此藥在民間多有使用，但此前還沒有相關(guān)化學(xué)成分的文獻(xiàn)報道，所以本實(shí)驗(yàn)首次對沙棘菌芝的化學(xué)成分進(jìn)行了預(yù)實(shí)驗(yàn)[1-3]，以明確其中可能的化學(xué)成分，為今后該植物生物活性成分的確定、分離、純化提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

電熱恒溫水浴鍋(廣東省汕頭市儀器廠)，電熱真空干燥箱(南京電工科學(xué)機(jī)械制造廠)；AG285型雙量程萬分之一/十萬分之一分析天平(美國梅特勒公司)；TH66025T型超聲波清洗器(上海)。Millipore超純水機(jī)(美國)。

1.2 試劑

氯仿、乙醇、氫氧化鈉、石油醚、α-萘酚、醋酸鎂、茚三酮、硫酸銅、甲基橙、硅鎢酸、高錳酸鉀等均為分析純，水為純化水，其余試液(雙縮脲試劑、Fehling試液、氯化鈉明膠試液、氯化鐵試液、碘化汞鉀試液、碘化鉍鉀試液、硅鎢酸試液、苦味酸試液、鹽酸一鎂粉試液、三氯化鋁試液、醋酸鎂試液、3，5一二硝基苯甲酸，亞硝酰鐵氰化鈉試液、異羥肟酸鐵試液等)自配。

1.3 材料

稀針嗜藍(lán)孢孔菌(沙棘菌芝)，采自陜西寶雞，經(jīng)張小青教授鑒定為Fomitiporia robusta ( P.Karst. ) Fiasson & Niemela[3]。批號：20101111。

2 方法

將沙棘菌芝經(jīng)樣品制備后采用試管預(yù)試法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。根據(jù)供試液可能含有的化學(xué)成分類型，選擇各類成分特有的化學(xué)反應(yīng)如顏色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等做一般定性預(yù)試。

2.1 多糖的理化鑒別

取本品粉末1 g，加水50 ml，回流提取1 h，濾過，即得供試品溶液。取供試品溶液1 ml，加入5%α-萘酚乙醇溶液2～3滴，搖勻，沿試管壁緩慢加入濃硫酸0.5 ml，在試液與硫酸交界面處，立即形成棕褐色環(huán)(即生成糠醛或其衍生物)，經(jīng)振搖后顏色變深并發(fā)熱，冷卻后加水稀釋出現(xiàn)暗紫色沉淀。本反應(yīng)靈敏，專屬性強(qiáng)。

多糖試驗(yàn)方法：取供試品溶液5 ml于蒸發(fā)皿中，水浴濃縮至約1 ml，加入乙醇2 ml，有少量沉淀出現(xiàn)。過濾，并用少量乙醇洗滌沉淀，將沉淀溶解在2 ml水中，按上述方法檢查樣品在水解前后的還原反應(yīng)，Molish反應(yīng)呈陽性。再次表明含有多糖。

2.2 有機(jī)酸顯色試驗(yàn)

取上述酸性乙醇提取液1 ml，用5%氫氧化銨溶液調(diào)節(jié)pH至中性。按圓形濾紙層析法檢查有機(jī)酸，以甲醇為展開劑，以5 ml 0.1%甲基紅乙醇溶液、15 ml 0.1%甲基橙水溶液、20 ml 0.1%石蕊水溶液的混合溶液為顯色劑，展開，顯色，有黃-紅色斑點(diǎn)出現(xiàn)。

2.3 生物堿鑒別鑒定

稱取過二號篩的稀針嗜藍(lán)孢孔菌粉末5 g，加0.5%鹽酸乙醇溶液30 ml，水浴回流提取10 min。趁熱過濾，濃縮，制得每毫升含0.6克的酸性乙醇提取液。取酸性乙醇提取液15 ml于蒸發(fā)皿中，用5%氫氧化銨溶液調(diào)節(jié)pH至中性，水浴蒸干溶劑。加3 ml 5%硫酸溶液溶解，過濾，得棕紅色濾液。取濾液1 ml，加硅鎢酸試劑2～3滴，有灰白色沉淀產(chǎn)生。取濾液1 ml，加碘化鉍鉀試液有紅棕色沉淀。生物堿檢查陽性。

2.4 蒽醌及其苷類鑒別鑒定

稱取過二號篩的稀針嗜藍(lán)孢孔菌粉末10 g，加甲醇70 ml，水浴回流10 min，趁熱過濾，得甲醇提取液。

堿性試驗(yàn)(Borntrager反應(yīng))：取甲醇提取液1ml，加入1 ml 10%氫氧化鈉溶液，產(chǎn)生橙紅色反應(yīng)，加0.5%高錳酸鉀溶液，加熱后紅色稍有褪色。表明可能含有少量蒽醌及其苷類。

醋酸鎂試驗(yàn)：取甲醇提取液1 ml，加入1%醋酸鎂甲醇溶液3滴，開始無反應(yīng)，加熱至沸騰，溶液變?yōu)榻奂t色(可能因濃縮至色深)。重新試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)。

結(jié)果：蒽醌及其苷類檢查不顯著。

2.5 揮發(fā)油、油脂類鑒別

取過二號篩的稀針嗜藍(lán)孢孔菌粉末2 g，加20 ml乙醚，超聲20 min后過濾，濾液(草綠色)，備用。

揮發(fā)油檢查：取乙醚提取液1 ml，置玻璃皿上使在室溫?fù)]發(fā)，有油狀物殘渣并有香味，加熱時油狀物減少。結(jié)果：稀針嗜藍(lán)孢孔菌含有揮發(fā)油。

油脂類檢查：取乙醚提取液10 ml，水浴蒸干，得油狀浸膏。將殘渣與無水硫酸鈉1～2粒直接加熱，產(chǎn)生少量氣泡并有異味，表明含有油脂類化合物。

2.6 為氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)鑒別鑒定

稱取通過二號篩的稀針嗜藍(lán)孢孔菌粉末3 g，加水100 ml，在室溫浸泡過夜，取濾液10 ml，供檢查氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)等。

加熱/加酸沉淀試驗(yàn)：取1 ml冷水提取液，加熱至沸，出現(xiàn)混濁。再取1 ml冷水提取液，加入1 ml 5%硫酸乙醇溶液，亦出現(xiàn)少量沉淀粘于試管壁上。結(jié)果：稀針嗜藍(lán)孢孔菌水提取液中含少量蛋白質(zhì)。

茚三酮試驗(yàn)(Ninhydrin)：取冷水提取液1 ml，加入0.5%茚三酮溶液2～3滴，搖勻，在沸水浴中加熱5 min，冷卻后，呈淺藍(lán)色反應(yīng)。結(jié)果：稀針嗜藍(lán)孢孔菌中含有少量氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)類成分。

雙縮尿試驗(yàn)(Biuret反應(yīng))：取冷水提取液1 ml，加入10%氫氧化鈉溶液2滴，搖勻，滴入0.5%硫酸銅溶液，邊加邊搖，結(jié)果：溶液幾乎無反應(yīng)。不能完全表明含有肽、肽鍵或蛋白質(zhì)分子。尚需做進(jìn)一步深入研究。

3 結(jié)果

經(jīng)系統(tǒng)理化鑒別試驗(yàn)表明，稀針嗜藍(lán)孢孔菌可能含有多糖、糖及其苷類、有機(jī)酸、氨基酸[4]、多肽、蛋白質(zhì)、皂苷、黃酮類、酚類、生物堿等化學(xué)成分，亦含有少量揮發(fā)油。其中多糖含量相對較多[5]，酚性成分檢查不明顯。

4 結(jié)論

本文首次對沙棘菌芝進(jìn)行了化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)，初步確定了其可能的含有的化學(xué)成分并從該真菌中得到孢孔菌多糖提取物，藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)其具有調(diào)血脂及脂代謝、免疫增強(qiáng)作用，是其扶正固本有效成分[6]。除上述成分外，目前對其有效化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)尚不太清楚，還有待進(jìn)一步深入研究。

[1]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中草藥有效成分的研究(第一分冊)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1979.

[2]侯小濤，鄧家剛，戴航，等.銀合歡種子化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)[J].時珍國醫(yī)國藥，2009，20(1)：62-63.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(第一部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[4]柴雪梅，陳萍，力荔.稀針嗜藍(lán)孢孔菌中微量元素與氨基酸的初步分析[J].西北藥學(xué)雜志 2008，23(5)：295.

[5]朱胤龍，陳萍，張亞環(huán).稀針嗜藍(lán)孢孔菌多糖分析方法研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2008，14(9)：1.

[6]張小麗，惠愛武，陳瑞明，等.稀針嗜藍(lán)孢孔菌對高脂血癥金黃地鼠降血脂及調(diào)節(jié)脂代謝作用的研究[J].中藥藥理與臨床，2010，26(5)：63-64.

PreliminaryTestsforChemicalComponentsofFomitiporiarobusta

HUJin-peng1,CHENPing1,ZHUYin-long1,LIANGXin-yue2

(1.Academy of Traditional Chinese Medicine of Shaanxi province,Xi'an,710003; 2.Xi'an Petroleum Institute,Shaanxi, Xi'an,710061)

ObjectiveTo identify the unknown chemical components ofFomitiporiarobusta.MethodsThis experiment adopted precipitation reaction and color reaction of multiple indicators and chemical comprehensive preliminary tests to reveal the unknown chemical components of different solvent extracts ofFomitiporiarobusta.ResultsFomitiporiarobustacontains amino acids,sugar,sapaomins,organic acid,sapaomins,flavonoids,phenol,alkaloids,volatile oil etc.ConclusionThe research identified multiple effective components and provided foundation for further study and application of Fomitiporia robusta.

Fomitiporiarobusta; Preliminary test; Chemical Components

R931

A

1672-2639(2011)04-0030-02

陜西省中醫(yī)管理局中醫(yī)藥科研課題(ZY42)

2011-10-30；責(zé)任編輯徐文梅]