楊水兵，劉 偉，劉成梅，劉瑋琳，鄭會(huì)娟，周 偉，陰婷婷

(南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西南昌330047)

中鏈脂肪酸-維生素C凍干脂質(zhì)體的制備研究

楊水兵，劉 偉，劉成梅*，劉瑋琳，鄭會(huì)娟，周 偉，陰婷婷

(南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西南昌330047)

以脂溶性藥物中鏈脂肪酸(MCFAs)和水溶性藥物維生素C(Vit.C)為模型藥物，采用復(fù)乳-高壓法制備中鏈脂肪酸-維生素C復(fù)方脂質(zhì)體，并用冷凍干燥技術(shù)制備成固體脂質(zhì)體。通過研究脂質(zhì)體的形態(tài)、粒徑分布和包封率，對(duì)預(yù)凍溫度、預(yù)凍時(shí)間、干燥時(shí)間、適宜的凍干保護(hù)劑種類、凍干保護(hù)劑與卵磷脂的質(zhì)量比分別進(jìn)行單因素考察。優(yōu)選脂質(zhì)體適宜的預(yù)凍溫度為-80℃，預(yù)凍時(shí)間為5h，總干燥時(shí)間48h，適宜的凍干保護(hù)劑為蔗糖，蔗糖與卵磷脂的質(zhì)量比為1.5∶1。最優(yōu)凍干工藝條件下制得的中鏈脂肪酸-維生素C復(fù)合脂質(zhì)體的維生素C包封率為62.25%，MCFAs包封率為46.30%，平均粒徑為115.5nm。并考察了復(fù)方脂質(zhì)體凍干前后粒徑、Zeta電位、顆粒形態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)粒徑和Zeta電位變化不大，表明復(fù)方脂質(zhì)體具有較好的物理穩(wěn)定性。

中鏈脂肪酸，維生素C，復(fù)方脂質(zhì)體，復(fù)乳法，高壓微射流法

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

大豆卵磷脂 PC，北京美亞斯磷脂技術(shù)有限公司;膽固醇 分析純，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司;中鏈脂肪酸 辛酸與癸酸總含量＞96%，美國進(jìn)口分裝;正已烷 色譜級(jí)，純度＞97%，天津市大茂化學(xué)試劑廠;維生素C、固藍(lán)B鹽 分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;吐溫-80 分析純，上海申字醫(yī)藥化工有限公司;無水乙醇、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、維生素E等 均為分析純。

NCJJ 0.2/150納米超高壓均質(zhì)機(jī) 廊坊通用機(jī)械有限公司;6890N氣相色譜儀 美國Agilent公司; RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;Zeta Potential/Partical Sizer Nicomp/380 ZLS超細(xì)微粒粒度分析儀 Santa barbara，California，USA;H-600透射電鏡 日本日立公司;T6紫外-可見分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限公司;Forma-86c超低溫冰箱 美國Thermo Electron公司;Labconco FreeZone真空冷凍干燥機(jī) 美國LABCONCO公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 中鏈脂肪酸-維生素C(MCFAs-Vit.C)復(fù)方凍干脂質(zhì)體的制備工藝［14-15］分別稱取一定量的大豆卵磷脂、膽固醇、維生素E(Vit.E)和MCFAs，在55℃水浴下溶解于適量的乙醇中，加入適量蒸餾水，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去部分乙醇，形成油相。配制一定濃度的Vit.C溶液，將其加入油相，在減壓的條件下旋轉(zhuǎn)洗膜20min，得到復(fù)方脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)分散體加入到超高壓均質(zhì)機(jī)中，在一定的壓力條件下超微乳化處理2次后。加入適量冷凍保護(hù)劑后，將脂質(zhì)體混懸液凍結(jié)，再置于冷凍干燥機(jī)內(nèi)干燥約48h，使樣品中殘余水分含量低于5%，凍干后的樣品置干燥器中室溫避光密閉保存。凍干脂質(zhì)體粉末加入蒸餾水至凍干前的體積，充分溶解即得重建脂質(zhì)體。復(fù)乳-高壓法制備MCFAs-Vit.C復(fù)方凍干脂質(zhì)體的工藝流程如圖1。

1.2.2 MCFAs-Vit.C復(fù)方凍干脂質(zhì)體凍干工藝優(yōu)化

1.2.2.1 預(yù)凍溫度的選擇 選用兩個(gè)預(yù)凍溫度，分別為-20℃和-80℃，按相同的處方和相同的制備條件制得復(fù)方脂質(zhì)體，對(duì)產(chǎn)品的外觀、復(fù)水性、藥物包封率進(jìn)行檢測。

圖1 復(fù)乳-高壓法制備復(fù)方凍干脂質(zhì)體的工藝流程圖

1.2.2.2 冷凍干燥預(yù)凍時(shí)間的選擇 本實(shí)驗(yàn)中選三個(gè)預(yù)凍時(shí)間，按相同的處方和相同的制備條件制得液體脂質(zhì)體分成三份，分別預(yù)凍3、6、9h，再通過冷凍干燥制得凍干脂質(zhì)體，考察預(yù)凍時(shí)間的影響。

1.2.2.3 干燥時(shí)間的選擇 在真空度為10Pa，預(yù)凍溫度-80℃下，以凍干脂質(zhì)體外觀和藥物包封率作為指標(biāo)考察了干燥時(shí)間(24、36、48、60h)對(duì)凍干脂質(zhì)體的影響。

1.2.2.4 凍干保護(hù)劑種類和用量的確定 a.凍干保護(hù)劑的篩選:本實(shí)驗(yàn)按大豆卵磷脂與保護(hù)劑質(zhì)量比1∶2內(nèi)加固定，對(duì)凍干保護(hù)劑的種類進(jìn)行了篩選。同時(shí)以不加任何凍干保護(hù)劑的脂質(zhì)體凍干品作為對(duì)照。以凍干制品的外觀、復(fù)水性、粒徑、包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察了各種保護(hù)劑(蔗糖、葡萄糖、甘露醇)對(duì)凍干制品的保護(hù)作用。b.凍干保護(hù)劑用量的確定:按蔗糖與大豆卵磷脂的質(zhì)量比分別為0.5∶1、1.0∶1、1.5∶1、2.0∶1、2.5∶1，以內(nèi)加的方式在脂質(zhì)體懸浮液中加入蔗糖，以凍干產(chǎn)品的外觀、藥物包封率和水化后粒徑為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察了蔗糖用量對(duì)凍干制品的保護(hù)作用。

1.2.3 MCFAs-Vit.C復(fù)合脂質(zhì)體的性質(zhì)測定

1.2.3.1 MCFAs包封率測定 取重建后的凍干脂質(zhì)體10mL置于已處理過的透析袋(cut off 8000～14000)中，封口，將其置于燒杯中，于室溫下透析12h。取出1mL透析內(nèi)液，采用氣相色譜法［16-17］測量MCFAs含量，計(jì)算出包封的MCFAs含量，從而計(jì)算出MCFAs的包封率。包封率按下式計(jì)算:

式中:W包、W總分別表示包封于脂質(zhì)體的藥量及投藥量。

1.2.3.2 維生素C(Vit.C)包封率測定(透析-分光光度法) 取重建后的凍干脂質(zhì)體10mL置于已處理過的透析袋(cut off 8000～14000)中，封口，將其置于燒杯中，于室溫下透析9h。取出1mL透析內(nèi)液，測定波長420nm處的吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出包封的Vit.C含量，從而計(jì)算出Vit.C的包封率［18］。包封率計(jì)算公式如下:

式中:W包、W總分別表示包封于脂質(zhì)體的藥量及投藥量。

1.2.3.3 脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位測定［2］將復(fù)方脂質(zhì)體以蒸餾水稀釋后，用NICOMP380/ZLS激光納米粒度分析儀測定其Zeta電位、粒徑及粒徑分布。測試角度90°，測試溫度為(25±0.1)℃，測試光波長為632.8nm。

1.2.3.4 脂質(zhì)體的顯微形態(tài)觀察［19-20］將復(fù)方脂質(zhì)體凍干粉加水復(fù)溶，以水適當(dāng)稀釋后，置于銅網(wǎng)上，自然晾干，用透射電鏡觀察脂質(zhì)體外觀形態(tài)。

表1 預(yù)凍溫度對(duì)復(fù)方凍干脂質(zhì)體質(zhì)量的影響

表2 預(yù)凍時(shí)間對(duì)復(fù)方凍干脂質(zhì)體質(zhì)量的影響

表3 干燥時(shí)間對(duì)復(fù)方凍干脂質(zhì)體的影響

1.2.3.5 差示掃描量熱分析［21-22］取8.0～10.0mg待測樣品放入鋁質(zhì)樣品盤中，另放一空盤為參照。在氮?dú)猸h(huán)境下掃描，掃描溫度范圍20～200℃，升溫速率10℃/min，氮?dú)饬髁?0mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 MCFAs-Vit.C復(fù)方凍干脂質(zhì)體凍干工藝優(yōu)化

2.1.1 預(yù)凍溫度的考察 對(duì)于易結(jié)晶的樣品而言，預(yù)凍溫度應(yīng)低于脂質(zhì)體的最低共熔點(diǎn)溫度，否則樣品凍結(jié)不實(shí)，會(huì)引起藥液噴瓶。實(shí)驗(yàn)表明，在預(yù)凍時(shí)間(6h)及其他條件均相同的情況下，不同的預(yù)凍溫度得到的凍干產(chǎn)品有區(qū)別，本文考察了不同預(yù)凍溫度(-20℃和-80℃)對(duì)凍干產(chǎn)品的影響，結(jié)果如表1。

從表1中可以看出，-80℃預(yù)凍溫度制得的脂質(zhì)體的藥物包封率大大高于-20℃預(yù)凍溫度下制得的脂質(zhì)體，外觀和復(fù)水性也均較好?？赡芤?yàn)?20℃預(yù)凍溫度高于一般脂質(zhì)體的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，在預(yù)凍時(shí)不能形成玻璃態(tài)，致使預(yù)凍時(shí)產(chǎn)生較多結(jié)晶而破壞脂質(zhì)膜，大大降低了包封率。所以應(yīng)該選擇-80℃作為預(yù)凍的溫度，以保證樣品凍實(shí)。

2.1.2 預(yù)凍時(shí)間的考察 適當(dāng)?shù)念A(yù)凍時(shí)間能確保抽真空之前所有樣品均已凍實(shí)，不致因抽真空而噴出。有研究表明，根據(jù)預(yù)凍物料的性質(zhì)，一般預(yù)凍時(shí)間都需要3～4h才能凍結(jié)完全。本實(shí)驗(yàn)中選三個(gè)預(yù)凍時(shí)間，按相同的處方相同的制備條件制得液體脂質(zhì)體分成三份，分別預(yù)凍3、5、7h，再冷凍干燥得到凍干脂質(zhì)體。結(jié)果如表2所示。

由表2可知，當(dāng)預(yù)凍3h時(shí)，凍干脂質(zhì)體外觀較差，復(fù)水性也不好，中鏈脂肪酸和維生素C的包封率較低，并且樣品容易噴出，而預(yù)凍5h和7h的凍干脂質(zhì)體外觀均平整飽滿，復(fù)水性良好，中鏈脂肪酸和維生素C的包封率較高，且無顯著差異。在保證樣品能凍實(shí)的前提下，從縮短實(shí)驗(yàn)周期和經(jīng)濟(jì)成本角度考慮，最終選擇預(yù)凍時(shí)間為5h。

2.1.3 干燥時(shí)間的考察 為了保證凍干產(chǎn)品有盡量低的含水量，提高長期穩(wěn)定性，必須有足夠的干燥時(shí)間。在真空度為10Pa，預(yù)凍溫度-80℃下，同批脂質(zhì)體(加入蔗糖保護(hù)劑預(yù)凍5h)，考察了不同干燥時(shí)間(24、36、48、60h)對(duì)凍干產(chǎn)品的影響。

如表3所示，干燥時(shí)間對(duì)凍干產(chǎn)品質(zhì)量有較大的影響。當(dāng)干燥時(shí)間為24h時(shí)，樣品明顯具有相對(duì)較高的水分含量，且外觀較差，復(fù)水難，藥物的包封率較低。隨著干燥時(shí)間的增加，外觀和復(fù)水性都能得到改善，維生素C和中鏈脂肪酸的包封率得到極大地提高。當(dāng)干燥時(shí)間達(dá)到48h時(shí)，凍干脂質(zhì)體具有較好的復(fù)水性和外觀，此時(shí)維生素C和中鏈脂肪酸的包封率分別從32.86%增加到55.85%，21.52%增加到46.12%。48h以后產(chǎn)品外觀和包封率等無顯著差別。因此綜合考慮，最終確定48h作為適宜的干燥時(shí)間。

2.1.4 凍干保護(hù)劑的種類和用量的確定

2.1.4.1 凍干保護(hù)劑的篩選 對(duì)于脂質(zhì)體的凍干，一般用糖類物質(zhì)作保護(hù)劑［23］。不同種類和不同濃度的糖類保護(hù)劑對(duì)凍結(jié)過程中脂質(zhì)體的保護(hù)效果不同。凍干保護(hù)劑主要為糖類，包括乳糖、蔗糖、麥芽糖、海藻糖(均為二糖)、葡萄糖(單糖)，另有醇類，包括甘露醇、山梨醇［24-25］。選擇糖/醇類作為凍干保護(hù)劑，是由其結(jié)構(gòu)(含羥基，易與磷脂基團(tuán)間形成氫鍵)和物理性質(zhì)(易于玻璃化)所決定的。其中公認(rèn)保護(hù)效果最好的是海藻糖。但是由于海藻糖價(jià)格較高，實(shí)驗(yàn)中沒有使用海藻糖作為凍干保護(hù)劑。本文按固定大豆卵磷脂與保護(hù)劑質(zhì)量比1∶2內(nèi)加凍干保護(hù)劑，對(duì)凍干保護(hù)劑的種類進(jìn)行了篩選。同時(shí)以不加任何凍干保護(hù)劑的脂質(zhì)體凍干品作為對(duì)照。以凍干制品的外觀、復(fù)水性、粒徑、以及藥物包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究各種保護(hù)劑對(duì)復(fù)方凍干脂質(zhì)體的保護(hù)作用。

從表4可以看出，加入凍干保護(hù)劑后，產(chǎn)品質(zhì)量得到一定的提高。即凍干品既可以維持原體積，不塌陷，表面光潔，可整塊脫落又具有較高的包封率。蔗糖是容易形成無定形的保護(hù)劑，可以使凍干制品得到很好的微觀形態(tài)［26］。其次是甘露醇，葡萄糖的效果最差。原因可能與保護(hù)劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理特性有關(guān)，如糖類保護(hù)劑中羥基的數(shù)量、保護(hù)劑的粘度都可能影響脂質(zhì)體囊泡的粒徑。其中低聚糖中的雙糖保護(hù)作用最強(qiáng)。葡萄糖具有還原性，高溫下這些糖可與蛋白質(zhì)活性部位的氨基酸殘基發(fā)生羰氨反應(yīng)，使蛋白質(zhì)變性失活，故保護(hù)作用有時(shí)較差［27］。Tanaka［28］研究了多元醇對(duì)凍干保護(hù)作用的效果，結(jié)果表明，多元醇的凍干保護(hù)作用均比二糖差。因此，本文考慮將蔗糖作為凍干保護(hù)劑以達(dá)到滿意的包封率及外觀效果。

表4 不同凍干保護(hù)劑對(duì)復(fù)方凍干脂質(zhì)體質(zhì)量的影響

表5 蔗糖與大豆卵磷脂的比對(duì)復(fù)方脂質(zhì)體凍干品質(zhì)量的影響

2.1.4.2 凍干保護(hù)劑用量的確定 凍干保護(hù)劑以分子形式與卵磷脂作用，因此其保護(hù)作用決定于其與卵磷脂的比例，而不是單純的保護(hù)劑的濃度，這是良好的凍干保護(hù)劑處方的關(guān)鍵。本文按卵磷脂與保護(hù)劑的質(zhì)量比對(duì)保護(hù)劑的量進(jìn)行了考察。對(duì)于保護(hù)脂質(zhì)體微觀結(jié)構(gòu)來說，蔗糖的保護(hù)作用要比甘露醇更強(qiáng)一些。在無甘露醇的情況下，單獨(dú)使用一定量的蔗糖，亦能獲得粒徑基本不變的脂質(zhì)體凍干產(chǎn)品。只是不能很好地保證凍干品的外觀，同時(shí)穩(wěn)定性也不滿足要求。實(shí)驗(yàn)中以內(nèi)加的方式，考察蔗糖與大豆卵磷脂質(zhì)量比分別為0.5∶1、1.0∶1、1.5∶1、2.0∶1、2.5∶1時(shí)對(duì)凍干品的影響。

一定量蔗糖作為凍干保護(hù)劑所得凍干品重建后脂質(zhì)體粒徑基本上仍然保持了凍干前的粒徑和藥物的包封率，其中蔗糖與磷脂比例1.5∶1時(shí)，既能保護(hù)脂質(zhì)體的粒子形態(tài)無變化又能保護(hù)被包封脂肪酸不會(huì)析出，外觀也很好，中鏈脂肪酸和維生素C包封率均較高。蔗糖比例再小則不能完全保護(hù)脂質(zhì)體內(nèi)包封藥物，有脂肪酸的析出，蔗糖比例過大則產(chǎn)品外觀又會(huì)變差。所以最后確定凍干保護(hù)劑與卵磷脂的比例為1.5∶1，即蔗糖∶大豆卵磷脂為1.5∶1。

2.2 MCFAs-Vit.C復(fù)方凍干脂質(zhì)體性質(zhì)測定

2.2.1 凍干前后粒徑及粒度分布 室溫條件下，取復(fù)方脂質(zhì)體混懸液適量加水稀釋到一定濃度，用Zeta Potential/Partical Sizer NICOMP 380/ZLS納米粒度分析儀測得凍干前后復(fù)方脂質(zhì)體平均粒徑。

凍干前脂質(zhì)體平均粒徑為98.3nm，粒度分布如圖2所示，重建后的脂質(zhì)體平均粒徑為115.5nm，粒度分布如圖3所示，結(jié)果表明凍干后粒徑稍有增大，但是復(fù)水前后脂質(zhì)體的粒度分布都比較均勻，粒徑較小并且分布范圍窄。和我們前期關(guān)于中鏈脂肪酸凍干脂質(zhì)體的研究［15］的結(jié)果相符，凍干過程中，凍干保護(hù)劑、凍干時(shí)間和脂質(zhì)體粒徑等都可能對(duì)脂質(zhì)體的粒徑分布有較大影響。

圖2 復(fù)方脂質(zhì)體凍干前粒度分布

圖3 復(fù)方脂質(zhì)體凍干后粒度分布

2.2.2 凍干前后形態(tài)的變化 在透射電鏡下觀察凍干前和重建后的脂質(zhì)體的外觀形態(tài)。

在透射電鏡下觀察凍干前和重建后的脂質(zhì)體的外觀形態(tài)，如圖4和圖5所示，可見凍干前和重建后的脂質(zhì)體為分散個(gè)體且呈球形或橢圓形。凍干前脂質(zhì)體的粒度較小，比較圓整，分布均勻;凍干后脂質(zhì)體的平均粒徑略有增加。

圖4 凍干前復(fù)方脂質(zhì)體電鏡圖(×12000)

2.2.3 凍干前后復(fù)方脂質(zhì)體包封率和Zeta電位的測定 脂質(zhì)體凍干前后的粒徑變化和對(duì)藥物的包封率的變化，是衡量凍干過程優(yōu)劣的兩個(gè)重要指標(biāo)。如果脂質(zhì)體粒徑經(jīng)凍干后增大了，說明在凍干過程中脂質(zhì)體囊泡發(fā)生融合現(xiàn)象，以致包封藥物發(fā)生了泄漏;如果藥物包封率經(jīng)凍干后減少了，也說明在凍干過程中脂質(zhì)體囊泡發(fā)生破裂現(xiàn)象?？疾靸龈蛇^程對(duì)包封率的影響。最佳凍干工藝制備的復(fù)方脂質(zhì)體的維生素 C和中鏈脂肪酸包封率分別為61.37%、44.26%，與凍干前包封率62.39%、46.28%相比稍有降低，差別不大，表明凍干后脂質(zhì)體仍保留了脂質(zhì)體懸液的理化性質(zhì)。

圖5 凍干后復(fù)方脂質(zhì)體電鏡圖(×25000)

室溫條件下，取復(fù)方脂質(zhì)體混懸液適量加水稀釋到一定濃度，用納米粒度分析儀分別測定復(fù)方脂質(zhì)體混懸液和凍干品重建后的Zeta電位。結(jié)果表明，制得的復(fù)方脂質(zhì)體表面荷負(fù)電，凍干復(fù)水之后其Zeta電位絕對(duì)值略有降低，凍干前與凍干復(fù)水后的脂質(zhì)體的Zeta電位分別為-25.43、-25.72mV，也表明凍干脂質(zhì)體具有良好的穩(wěn)定性。

2.2.4 差示掃描量熱分析 脂質(zhì)體雙層膜的物理性質(zhì)和溫度有較大關(guān)系。當(dāng)溫度升高時(shí)，脂質(zhì)雙分子層中?；鶄?cè)鏈從有序排列變?yōu)闊o序排列，這種變化引起脂膜的物理性質(zhì)一系列變化，可由“膠晶態(tài)”變?yōu)椤耙壕B(tài)”，膜的橫切面增加，雙分子層厚度減小，膜流動(dòng)性增加，這種轉(zhuǎn)變時(shí)的溫度稱為相變溫度(Tm)。因此，可用DSC分析測定脂質(zhì)體膜的Tm值，當(dāng)達(dá)到Tm時(shí)，膜的流動(dòng)性增加，被包裹的藥物具有最大釋放速率，因而膜的流動(dòng)性直接影響脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，從而影響脂質(zhì)體的藥用載體性質(zhì)。大豆卵磷脂和復(fù)方脂質(zhì)體的相變曲線如圖6和圖7所示。

圖6 大豆卵磷脂的相變圖

從圖6和圖7可以看出，卵磷脂以及復(fù)方脂質(zhì)體的Tm分別為130℃、136.08℃。由結(jié)果可知，將磷脂制備成復(fù)方脂質(zhì)體后，Tm升高了，原因可能是膽固醇增加了磷脂雙分子層膜的剛性，降低了膜的流動(dòng)性，從而升高了Tm值，膜的穩(wěn)定性增加，藥物更穩(wěn)定地包裹于磷脂雙層膜中，與Zeta電位的結(jié)論相符合。

3 結(jié)論

圖7 復(fù)乳-高壓法制備的復(fù)方脂質(zhì)體相變圖注:Onset=133.85℃，Peak=136.08℃，Area=174.078mJ，Delta H=15.9704J/g。

本文考察了中鏈脂肪酸-維生素C復(fù)方脂質(zhì)體的冷凍干燥工藝，結(jié)合實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)預(yù)凍溫度、預(yù)凍時(shí)間、干燥時(shí)間、不同凍干保護(hù)劑種類(蔗糖，葡萄糖，甘露醇)、蔗糖的用量進(jìn)行了考察，并以樣品的外觀、水化后粒徑、包封率等為考察指標(biāo)，確定了最佳凍干工藝。結(jié)果表明，預(yù)凍時(shí)間5h，預(yù)凍溫度為-80℃，冷凍干燥48h，較優(yōu)的凍干保護(hù)劑為蔗糖，蔗糖與大豆卵磷脂比為1.5∶1，所得凍干產(chǎn)品外觀飽滿致密、平滑、緊實(shí)，再分散性較好，粒子形態(tài)也保護(hù)的比較好，能基本保持凍干前的各項(xiàng)理化指標(biāo)。并對(duì)復(fù)方脂質(zhì)體的DSC曲線進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體具有良好的穩(wěn)定性。

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Study on preparation and characteristics of medium chain fatty acids-Vitamin C freeze-dried liposomes

YANG Shui-bing，LIU Wei，LIU Cheng-mei*，LIU Wei-lin，ZHENG Hui-juan，ZHOU Wei，YIN Ting-ting
(State Key Laboratory of Food Science and Technology，Nanchang University，Nanchang 330047，China)

The medium chain fatty acids-vitamin C(MCFAs-Vit.C)complex liposomes were prepared by double emulsion-high pressure microfluidization with lipophilic drugs medium chain fatty acids(MCFAs)and hydrophilic drug vitamin C(Vit.C)as the core material，and solid liposomes were further made by lyophilization.The effects of pre-freezing temperature，pre-freezing time，total freeze-dried time，types of lyoprotectant and the mass ratio of lyoprotectant to lecithin were investigated by taking liposomes shape，size distribution and drugs entrapment efficiency as indexes.The suitable preparation conditions of liposomes were as follows:pre-freezing temperature -80℃，pre-freezing time 5h，total freeze-dried time 48h，sucrose as suitable lyoprotectant，the ratio of sucrose to lecithin(w/w)1.5∶1.Under these conditions，the MCFAs-Vit.C complex liposome had 46.30%MCFAs encapsulation efficiency and 62.25%Vit.C encapsulation efficiency with a mean particle size of 115.5nm.In addition，the changes of particle size，Zeta potential and morphology of liposomes before and after lyophilization were studied.The results showed that the complex liposome had better physical stability with little changes in particle size and Zeta potential.

medium chainfattyacids;VitaminC;complexliposomes;doubleemulsion;highpressure microfluidization

TS201.2

B

1002-0306(2011)11-0244-06

中鏈脂肪酸(MCFAs)是碳原子數(shù)為8～10的飽和脂肪酸。與長鏈脂肪酸相比，MCFAs分子小，在小腸吸收后經(jīng)門靜脈進(jìn)入線粒體進(jìn)行β氧化，代謝速度快、效率高?？蓽p少體內(nèi)脂質(zhì)蓄積，有防治肥胖的作用［1-2］。但MCFAs水溶性差，性質(zhì)不穩(wěn)定，過多攝入MCFAs易導(dǎo)致惡心及胃腸道的不適、刺激膽囊收縮素的分泌等癥狀［3-4］。維生素C(Vit.C)可合成黏多糖和膠原蛋白，減少自由基對(duì)皮膚的損害，延緩衰老，被廣泛應(yīng)用在化妝品中［5］。但 Vit.C性質(zhì)不穩(wěn)定，在儲(chǔ)藏和加工過程中受熱、見光易分解，導(dǎo)致其利用率顯著降低［6-7］。脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類似生物膜，能夠攜帶親水性、疏水性和兩親性物質(zhì)，并能有效提高藥物的吸收率和滲透性［8］。將MCFAs與Vit.C復(fù)合，既能提高M(jìn)CFAs和Vit.C的利用度和穩(wěn)定性，同時(shí)也能提高脂質(zhì)體本身的穩(wěn)定性。制備脂質(zhì)體的常用方法有薄膜法、逆相蒸發(fā)法、復(fù)乳法、乙醇注入法、動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)等［9-12］，這些方法只適用于包封水溶性或脂溶性的藥物，目前對(duì)于制備同時(shí)包封水溶性和脂溶性藥物的復(fù)合脂質(zhì)體研究較少。而普通脂質(zhì)體混懸液，在儲(chǔ)存的過程中可能發(fā)生化學(xué)和物理變化，如磷脂氧化和水解;同時(shí)由于溫度、光線等影響產(chǎn)生凝聚、融合、粒徑變大等現(xiàn)象。為解決脂質(zhì)體在貯存過程中穩(wěn)定性的問題，將其進(jìn)一步制成固體脂質(zhì)體［13］。本文以大豆卵磷脂和膽固醇作為膜材，采用復(fù)乳-高壓法制備MCFAs-Vit.C復(fù)合脂質(zhì)體，再通過冷凍干燥技術(shù)制備凍干脂質(zhì)體，并對(duì)其凍干工藝、水合重建前后的粒徑和Zeta電位，形貌變化等進(jìn)行研究，從而得到包封率高且穩(wěn)定性良好的MCFAs-Vit.C復(fù)方凍干脂質(zhì)體。

2011-08-25 *通訊聯(lián)系人

楊水兵(1984-)，男，在讀博士研究生，研究方向:食物(含生物質(zhì))資源的開發(fā)與利用。

國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室目標(biāo)導(dǎo)向項(xiàng)目(SKLF-MB-201004)。