李慧峰,單明輝

復(fù)方白頭翁散抗炎作用的研究

李慧峰1,單明輝2

(1.河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院,河北張家口075000;2.廊坊市大廠縣畜牧局,河北廊坊065300)

目的 研究復(fù)方白頭翁散的抗炎作用.方法 采用小鼠耳廓腫脹法、皮內(nèi)染料滲出法、棉球肉芽腫脹法及大鼠足跖腫脹法觀察復(fù)方白頭翁散對急慢性炎癥的作用.結(jié)果 小鼠耳殼二甲苯致腫實驗結(jié)果顯示,與陰性對照組相比,低劑量組差異不顯著,中劑量組差異顯著P<0.05,高劑量組差異極顯著P<0.01;與陽性對照組相比,低劑量組差異極顯著P<0.01,中劑量組差異顯著P<0.05,高劑量組無顯著性差異.皮內(nèi)染料滲出實驗結(jié)果顯示,中、高劑量組與陰性對照組相比,差異極顯著P<0.01,而與陽性對照組比較無顯著性差異.小鼠棉球性肉芽腫實驗結(jié)果顯示中、高劑量組與陰性對照組相比差異顯著,P<0.05,與陽性對照組相比差異顯著P<0.05.蛋清致大鼠足跖腫脹結(jié)果顯示,高劑量組與陰性對照組相比差異極顯著P<0.01;與陽性對照組相比差異不顯著.中劑量組與陰性對照組及陽性對照組相比差異均顯著,P<0.05.結(jié)論 復(fù)方白頭翁散具有一定的抗炎作用,為臨床用藥提供理論依據(jù).

復(fù)方白頭翁散;抗炎;中藥

抗炎藥是臨床應(yīng)用歷史悠久用途廣泛的一大類藥物,經(jīng)典的抗炎藥物有甾體類和非甾體類兩大類[1],這兩類藥物抗炎、鎮(zhèn)痛作用雖然顯著但近年來在臨床實踐中發(fā)現(xiàn)其有一些明顯甚至嚴(yán)重的副作用,如阿司匹林有過敏反應(yīng)、胃黏膜損傷、出血、溶血、造血功能障礙等[2].而中藥不同于甾體類和非甾體類抗炎藥,它除了治療無菌性炎癥外,還治療感染性疾病,兼具抗炎、免疫、清熱解毒和活血化瘀等藥理作用,可以改變血液循環(huán)和血管功能,有利于多種疾病的恢復(fù).

本課題采用的中藥由白頭翁散加味組成,其成分為白頭翁、黃柏、黃連、秦皮、訶子、烏梅、白芍、大黃等中藥.據(jù)資料顯示,王宏艷[3]等應(yīng)用復(fù)方白頭翁制劑防治仔豬白痢,結(jié)果顯示復(fù)方白頭翁制劑對仔豬白痢的療效極顯著.孫榮華[4]等對復(fù)方白頭翁散對雞大腸桿菌病的療效進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,復(fù)方白頭翁散對雞大腸桿菌病有良好的治療效果,本課題擬通過炎癥模型觀察復(fù)方白頭翁散的抗炎作用,以求能夠開發(fā)具有良好抗炎作用的中藥制劑.

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 實驗動物

清潔級純昆明種小白鼠150只,雌雄各半;SD大鼠50只,雌雄各半.

1.1.2 中藥提取液的制備[5]

按復(fù)方比例取白頭翁、黃柏、黃連、秦皮、訶子、烏梅、白芍、大黃等中藥共300 g加10倍量自來水浸泡10min,大火燒開,小火煎熬1 h,過濾取濾液;藥渣再分別加8倍,6倍水加熱,取濾液;合并3次濾液;用小火濃縮至300 m L(含生藥1 g/mL),6層紗布過濾,取濾液滅菌后于4℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?

1.1.3 實驗試劑

蒸餾水,氫化可的松,二甲苯,1%伊文斯蘭生理鹽水溶液,丙酮生理鹽水(7∶3),乙醚,5 mg重的滅菌棉球,鮮蛋清.

1.1.4 儀 器

721分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司);SZ-93A自動雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠);砂鍋;試管;電子天平(感量0.1 mg);EP管(1 m l).

1.2 實驗方法

1.2.1 二甲苯所致小鼠耳殼腫脹實驗[6]

取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分成5組,每組10只.陰性對照組,按15 g/kg體重灌服蒸餾水;復(fù)方白頭翁散高劑量組、中劑量組和低劑量組,分別以20 g/kg體重、15 g/kg體重、10 g/kg體重灌胃給藥;陽性對照組,按0.005 g/kg體重尾靜脈注射氫化可的松,每組每日給藥一次,連續(xù)3 d,最后一次給藥0.5 h后,每鼠左耳分別滴0.05 m l的二甲苯,右耳作空白對照.于給二甲苯20 min后,處死小鼠,剪下雙耳,迅速用直徑0.7 cm的打孔器在雙耳的相同部位打下雙耳耳片,稱重,以兩耳重量差作為炎癥腫脹程度的指標(biāo).計算公式如下:

腫脹度=左耳重量-右耳重量

1.2.2 皮內(nèi)染料滲出實驗[6]

取小鼠50只,動物分組、給藥劑量、給藥途徑同1.2.1,各組每日給藥1次,于第4 d給藥1 h后,尾靜脈注射1%伊文斯蘭生理鹽水溶液0.02 m l/g,隨即于每只小白鼠背部皮內(nèi)注入二甲苯30μl致炎.20 min后處死小白鼠,切開背部皮膚,將藍(lán)染的皮膚剪下并切碎,放入6 m l丙酮生理鹽水(7∶3)混合液中浸泡24 h,離心(2 000 r/min)10 min,取上清液.用紫外可見分光光度計(λ=610 nm)測定光密度(OD)值,以光密度值表示色素濾出量.

1.2.3 小鼠棉球肉芽腫實驗[6]

取小鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分5組,每組10只.給藥前用乙醚麻醉后,背部切一個0.5 cm的小口,從切口向兩側(cè)腋下各植入一個5 mg重的滅菌棉球.術(shù)后次日開始灌胃給藥,給藥劑量同1.2.1,每天給藥1次,8 d后處死動物,剝離棉球肉芽組織,烘干稱重,減去原棉球的重量,凈得肉芽重量.

1.2.4 蛋清所致大鼠足跖腫脹實驗[7]

取SD大鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)分為5組,每組10只,給藥劑量、給藥途徑同1.2.1,各組每日給藥1次,于第8 d給藥1 h后大鼠右后足跖腱膜下注射1%的蛋清液0.1 m l致炎,30 min后用排水法測致炎前和致炎后右后足的容積并計算腫脹程度.計算公式如下:

足拓腫脹度=致炎后足跖容積-致炎前足跖容積

1.3 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié) 果

2.1 復(fù)方白頭翁散對小鼠耳殼二甲苯致腫的影響

表1 復(fù)方白頭翁散對二甲苯小鼠耳廓腫脹的影響

表1結(jié)果表明,復(fù)方白頭翁散各劑量組均能抑制二甲苯所致的鼠耳廓炎性腫脹,與陰性對照組相比,低劑量組差異不顯著,中劑量組差異顯著P<0.05,高劑量組差異極顯著P<0.01;與陽性對照組相比,低劑量組差異極顯著P<0.01,中劑量組差異顯著P<0.05,高劑量組無顯著性差異.

2.2 復(fù)方白頭翁散對二甲苯所致小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的影響

表2 復(fù)方白頭翁散對皮內(nèi)染料滲出的影響

表2結(jié)果表明,高、中劑量組與陰性對照組相比,差異極顯著P<0.01,與陽性對照組相比差異不顯著;低劑量組與陰性對照組相比,差異不顯著,而與陽性對照組比差異極顯著P<0.01.

2.3 復(fù)方白頭翁散對棉球所致小白鼠肉芽腫的影響

表3 復(fù)方白頭翁散對棉球致炎的影響

表3結(jié)果表明,復(fù)方白頭翁散高,中、高劑量組對小鼠棉球性肉芽腫與陰性對照組相比有抑制作用, P<0.05差異顯著,與陽性對照組相比差異顯著P<0.05;低劑量組對小鼠棉球性肉芽腫與陰性對照組相比無明顯的抑制作用,與陽性對照組相比差異極顯著P<0.01.

2.4 復(fù)方白頭翁散對蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響

表4 復(fù)方白頭翁散對蛋清致炎的影響

表4結(jié)果表明,復(fù)方白頭翁散高劑量組對蛋清致大鼠足跖腫脹與陰性對照組相比有明顯的抑制作用, P<0.01;與陽性對照組相比差異不顯著.中劑量組與陰性對照組及陽性對照組相比差異均顯著,P< 0.05.低劑量組與陰性對照組相比差異不顯著,P>0.05;與陽性對照組相比差異極顯著.

3 討論與結(jié)論

近年來科學(xué)技術(shù)突飛猛進(jìn),高科技的發(fā)展為中草藥的研究提供了難得的機(jī)遇.中草藥高效、無毒或低毒的顯著特點(diǎn),己經(jīng)引起了世界諸多國家的重視,掀起研究開發(fā)中草藥的新浪潮.針對以上常用抗炎藥物的不良反應(yīng),本課題將研究注意力轉(zhuǎn)向中藥復(fù)方,通過炎癥模型觀察其抗炎效果.

本實驗中所研究的復(fù)方白頭翁散,其中白頭翁具有清熱解毒、涼血止痢,尤善清胃腸濕熱和血分熱毒的功效,為君藥.黃連清化濕熱而固大腸;黃柏清熱燥濕;秦皮清肝經(jīng)濕熱以涼血;訶子,烏梅清熱解毒、澀腸止瀉,均為臣藥.經(jīng)現(xiàn)代藥理學(xué)研究,復(fù)方白頭翁散中各味藥的活性成分及作用較為明確,黃連、黃柏中的小檗堿、黃連堿、藥根堿,秦皮中的七葉苷、秦皮苷類,白頭翁中的白頭翁皂苷[8],白芍中的芍藥苷、大黃中的迷迭香酸、訶子中的沒食子酸以及烏梅中的有機(jī)酸、多糖等是有效的抗炎成分,大多有抗菌、消炎、抗疲勞等作用.本研究觀察了不同劑量復(fù)方白頭翁散對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹、皮膚毛細(xì)血管通透性、小鼠棉球肉芽腫以及大鼠蛋清性足腫脹的急慢性炎癥模型的作用,結(jié)果表明復(fù)方白頭翁散對急性、慢性炎癥的過程都具有明顯的對抗作用,這為臨床用藥提供了充分的理論依據(jù),但對于其藥效機(jī)理的研究,仍需進(jìn)一步探討.

[1]楊保峰.藥理學(xué)(第六版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:186-188

[2]李軍婷,李兆申,劉厚環(huán),等.非甾體抗炎藥致上消化道出血的臨床特征[J].中華消化內(nèi)鏡雜志,2001,18 (03):151-154

[3]王宏艷,麻延峰,麻佳蕾.應(yīng)用復(fù)方白頭翁制劑防治仔豬白痢的療效研究[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2005,(11)41

[4]孫榮華,張明琴,陳吉寶,等.復(fù)方白頭翁散對雞大腸桿菌病的療效研究[J].貴州畜牧獸醫(yī),2002,26(01):6-7

[5]時維靜.綜合評分法優(yōu)化白頭翁湯提取工藝[J].中國中醫(yī)藥科技,2009,16(01):25-26

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[8]侯家玉.中藥藥理學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2002:40-120

[責(zé)任編輯:劉守義]

On Anti-inflammatory Effect of Compound Pulsatilla Pulvis

LIHui-feng1,SHAN Ming-hui2

(1.College of Animal Science and Technology,Hebei North University,Zhangjiakou 075000,Hebei,China; 2.Livestock Administration of Dachang County,Langfang 065300,Hebei,China)

Objective To investigate the anti-inflammato ry effect of compound pulsatilla pulvis in animals.Methods The acute-inflammation was examined in rats w hose auricles and intracutaneous suffered from xylene respectively and the chronical-inflammation was examined in rats w hose granuloma were induced by imp lanting cutton ball in the test.Results The study of the effcets of compound pulsatilla on auricles sw elling by xylene in m ice show ed that the low dose group w as not significant,the medium(p< 0.05)and high(p<0.01)dose group w ere significant compared w ith the negative group.The study of the effects of the compound pulsatilla on capillary permeability rising by xylene in m ice show ed that the medium dose group(p<0.01)and the high dose group(p<0.01)could effectively dep ress the permeability of capillary rasied by xylene compared w ith the negative group.The study of the effects of the compound pulsatilla on granuloma induced by p lanting cotton ball in m ice showed that the medium dose group (p<0.05)and the high dose group(p<0.05)could effectively reduce the amount of the granuloma compared w ith the negative group.The study of the effcets of compound pulsatilla on edema of rat hind paw induced by egg albumen show ed that the high dose group(p<0.01)and the medium dose group(p< 0.05)were significant compared w ith the negative group and the medium dose group was significant(p< 0.05)compared w ith the positive group.Conclusion The investigation show s the compound pulsatilla pulvis has anti-inflammatory effect and p rovides theoretical basis for clinic medication.

compound pulsatilla pulvis;anti-inflammatory;Chinese medicin

S 853.75

A

1673-1492(2011)02-0072-04

來稿日期:2011-03-07

李慧峰(1978-),女,河北涿鹿人,河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院藥學(xué)教研室講師,碩士.