張紅銀，吳映蓉

(昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院·云南省腫瘤醫(yī)院，云南 昆明 650118)

紫杉醇(paclitaxel)是從紅豆杉科紅豆杉屬植物的樹皮中提取的二萜類化合物，是一種新型微管穩(wěn)定劑，具有獨(dú)特的抗癌活性。紫杉醇作為晚期卵巢癌的二線治療藥，至今已在40多個(gè)國(guó)家獲準(zhǔn)上市，并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃腸道癌及介入治療后的血管再狹窄等治療上顯示了令人鼓舞的效果[1]。由于難溶于許多藥用溶劑，且水中溶解度僅為0.06 g/L，紫杉醇口服幾乎不吸收，臨床應(yīng)用的主要為紫杉醇注射液，是用Cremophor EL(聚氧乙基蓖麻油－無水乙醇，50∶50，V/V)制成的無色黏稠狀濃溶液，以改善紫杉醇的水溶性，使用前用生理鹽水或5%葡萄糖注射液稀釋。目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)供輸血、輸液用的塑料容器均以軟聚氯乙烯(PVC)為主要原料，并添加有增塑劑鄰苯二甲酸二(2－乙基)己酯(DEHP)和穩(wěn)定劑等[2]，以改善PVC的加工性、柔韌性和可塑性。PVC輸液軟袋對(duì)所接觸的藥物有一定的吸附作用，從而降低藥物含量，影響其療效[3－4]。紫杉醇的助溶劑Cremophor EL與PVC軟包裝輸液袋接觸時(shí)，能溶出增塑劑DEHP，而DEHP進(jìn)入人體后對(duì)機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)均有毒性作用，產(chǎn)生毒性反應(yīng)的程度與DEHP的溶出量有關(guān)，且溶出的DEHP對(duì)紫杉醇有吸附作用，但溶出的DEHP的量與接觸PVC塑料的時(shí)間、溫度等的關(guān)系未見報(bào)道。筆者通過模擬臨床使用紫杉醇的條件，考察使用過程中紫杉醇的濃度變化和DEHP溶出量與時(shí)間、溫度的關(guān)系，為臨床工作提供參考。

1 儀器與試藥

LC－2010型高效液相色譜儀(日本島津);電子分析天平(德國(guó)賽多利斯)。紫杉醇對(duì)照品(本實(shí)驗(yàn)室自制，由面積歸一化法得其含量大于98%);紫杉醇注射液(規(guī)格為16.7 mL∶100 mg，揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)生產(chǎn)，批號(hào)為08031301);Cremophor EL溶劑(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)分裝，批號(hào)為08072501);DEHP(美國(guó)生產(chǎn)，批號(hào)為L(zhǎng)B58194);5%葡萄糖注射液(上海百特醫(yī)療用品有限公司提供，批號(hào)為S0812005);甲醇為色譜純，乙醇為分析純，水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:島津 C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:甲醇 －水(82∶12，用于測(cè)定紫杉醇)，甲醇 －水(98∶2，用于測(cè)定 DEHP);流速:1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):224 nm;進(jìn)樣量:10 μL;室溫操作。

2.2 溶液配制

從1袋100 mL的5%葡萄糖注射液中抽出60 mL，往里加入10 mL紫杉醇注射液，即得紫杉醇輸液。精密稱取紫杉醇對(duì)照品5.988 mg，置10 mL量瓶中，加乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，得598.8 μg/mL的紫杉醇對(duì)照品溶液。取DEHP對(duì)照品1滴，置10 mL量瓶中，精密稱定，加乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，得6.47 g/L的對(duì)照品貯備液，精密量取該貯備液0.9 mL，置25 mL量瓶中，加乙醇溶液至刻度，搖勻，得232.9 μg/mL的DEHP對(duì)照品溶液。以上溶液進(jìn)樣前均取適量過0.45 μm微孔濾膜。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:分別取紫杉醇對(duì)照品溶液 5，10，15，20，25 μL和 DEHP 對(duì)照品溶液 1，5，10，15，20，25 μL，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，以各自對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，得回歸方程分別為Y=3 281 090X+355 628(r=0.999 8)和 Y=2 340 163X－319 180(r=0.999 1)。結(jié)果表明，紫杉醇進(jìn)樣量在 2.994 ～14.97 μg范圍內(nèi)、DEHP進(jìn)樣量在0.2329～5.8225μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):分別取紫杉醇對(duì)照品溶液和DEHP對(duì)照品溶液各10 μL，連續(xù)進(jìn)樣4次，記錄峰面積，結(jié)果紫杉醇對(duì)照品溶液峰面積的 RSD為1.24%，DEHP對(duì)照品溶液峰面積的 RSD為0.21%，表明方法精密度良好。

DEHP加樣回收試驗(yàn):取2袋100 mL的5%葡萄糖注射液，分別從中抽出60 mL，再往里加入10 mL Cremophor EL溶劑，其中1袋精密加入DEHP對(duì)照品貯備液1 mL，分別于室溫下保存，并于4 h后分別進(jìn)樣測(cè)定峰面積，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果平均加樣回收率為96.86%。

紫杉醇注射液中DEHP溶出量考察:取3袋100 mL的5%葡萄糖注射液，分別從中抽出60 mL，再往里加入10 mL Cremophor EL溶劑，藥物配好后分別在6℃、室溫、30℃環(huán)境下保存，并于0，1，2，3，4 h時(shí)分別取樣，測(cè)定藥物在不同溫度和不同時(shí)間的濃度，考察PVC軟輸液袋DEHP的溶出情況。色譜圖見圖1。

圖1 DEHP溶出量考察的高效液相色譜圖

2.4 PVC軟輸液袋對(duì)紫杉醇穩(wěn)定性的影響及其中DEHP溶出量考察

取3袋100 mL的5%葡萄糖注射液，依法配制紫杉醇輸液，分別在 6 ℃、室溫、30 ℃環(huán)境下保存，并于 0，1，2，3，4 h 時(shí)分別取樣，測(cè)定紫杉醇和DEHP在不同溫度和不同時(shí)間的濃度，以考察PVC軟輸液袋對(duì)紫杉醇穩(wěn)定性的影響及其中DEHP的溶出量。色譜圖見圖2。

紫杉醇輸液配制到PVC軟輸液袋后在不同溫度和不同時(shí)間的濃度見表1。可見，紫杉醇濃度隨時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。

圖2 紫杉醇的高效液相色譜圖

表1 紫杉醇輸液的質(zhì)量濃度變化(g/L)

Cremophor EL溶劑和紫杉醇注射液配制到PVC軟袋后在不同溫度和不同時(shí)間的溶出結(jié)果見表2。可見，兩份輸液在不同時(shí)間和不同溫度下均有DEHP溶出，溶出量隨溫度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)而增大，且兩份的溶出量相當(dāng)，說明PVC軟輸液袋中的增塑劑DEHP確實(shí)會(huì)被紫杉醇注射液中的溶劑溶出。

表2 Cremophor EL溶劑和紫杉醇注射液中溶出的DEHP的質(zhì)量濃度(g/L)

3 討論

試驗(yàn)中設(shè)定的3個(gè)溫度分別代表冬天或冰箱冷藏(6℃)、春秋天(室溫)及夏天(30℃)的情況，而試驗(yàn)時(shí)間則為臨床輸注紫杉醇的時(shí)間(一般為1～4 h)。研究表明，在6℃和室溫下，紫杉醇注射液的濃度隨時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，說明PVC軟輸液袋對(duì)其有一定的吸附作用，且時(shí)間越長(zhǎng)，吸附得越多。但高溫下其濃度變化不符合此規(guī)律，有研究認(rèn)為影響吸附作用的物理、化學(xué)因素是藥物的解離度和脂溶性，且藥物的結(jié)構(gòu)與吸附作用密切相關(guān)[5]，吸附機(jī)制與結(jié)構(gòu)的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。通過考察紫杉醇輸注時(shí)間和溫度對(duì)DEHP溶出量的影響，發(fā)現(xiàn)輸注時(shí)間越長(zhǎng)、溫度越高，DEHP溶出量越大，說明紫杉醇注射液中含有的聚氧乙基蓖麻油對(duì)DEHP的溶出在短時(shí)間內(nèi)不會(huì)達(dá)到飽和。從此意義上說，若輸注時(shí)間延長(zhǎng)、溫度升高，則進(jìn)入患者體內(nèi)的DEHP量增大，對(duì)患者的危害加大。

紫杉醇注射劑含有聚氧乙基蓖麻油，能將PVC塑料輸液袋中的增塑劑DEHP溶出，故應(yīng)盡量避免使用，若不能避免，應(yīng)考慮適當(dāng)增加劑量。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，建議臨床輸注紫杉醇注射液時(shí)最好使用非PVC塑料輸液袋，如使用PVC塑料輸液袋配制紫杉醇，則配制后應(yīng)立即使用，如不能及時(shí)使用，最好在冰箱中冷藏。

[1]梅 林，孫洪范，宋存先.紫衫醇制劑研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006，41(8):1 366 － 1 370.

[2]張恩娟，劉同華，江 敏，等.輸液用塑料制品對(duì)藥物的吸附[J].中國(guó)藥房，2003，10(11):694－695.

[3]徐小薇，杜小莉，李大魁，等.3種不同材質(zhì)輸液容器對(duì)15種藥物的吸著性實(shí)驗(yàn)[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2004，39(3):205.

[4]宋曉峰，魏光輝.醫(yī)用塑料增塑劑DEHP安全性研究及對(duì)策[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，2005，32(6):358 －361.

[5]張恩娟，陳 琳，黃林清.PVC與TPE輸液器對(duì)三種藥物的吸附研究[J].中國(guó)藥房，2007，18(7):508.