程振濤，陳軍義，岳 筠，周碧君，文 明，王開功，隆 華，李敬丹

2.貴州省動(dòng)物疫病研究室，貴陽(yáng) 550025；

3.貴州省農(nóng)業(yè)委員會(huì)，貴陽(yáng) 550025

豬乙型腦炎（Japanese encephalitis JE）俗稱日本乙腦，是由乙型腦炎病毒（Japanese encephalitis virus JEV）引起的一種以妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎，公豬睪丸腫大，少數(shù)有神經(jīng)癥狀為主要特征的蚊媒人獸共患傳染?。?－2］。乙型腦炎是一種自然疫源性疫病，大約60余種動(dòng)物及人類均可感染JEV，成年動(dòng)物和人往往呈隱性感染的帶毒狀態(tài)。病畜及隱性感染的人畜在病毒血癥階段都可成為傳染源，其中豬是主要的傳染源，同時(shí)也是人類感染傳播循環(huán)重要的環(huán)節(jié)，而鳥和蝙蝠也可能是重要的傳染源［3－7］。豬乙型腦炎的流行和暴發(fā)不僅會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，而且會(huì)嚴(yán)重危害人類健康，對(duì)公共衛(wèi)生安全構(gòu)成巨大威脅。為掌握貴州省豬群目前JEV隱性感染情況及疫苗免疫效果，在2010年4－11月間采集了貴州省6個(gè)地州市6個(gè)種豬場(chǎng)、6個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和12個(gè)養(yǎng)殖小區(qū)的血清樣本720份，檢測(cè)豬乙型腦炎抗體狀況，分析檢測(cè)結(jié)果，以期為貴州省豬群及易感人群的乙型腦炎防控提供理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣本 非免疫豬群血清樣本采自貴州省貴陽(yáng)市、遵義市、凱里市、畢節(jié)市、六盤水市和黔東南州等貴州省6個(gè)地（州、市）的6個(gè)種豬場(chǎng)、6個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和12個(gè)養(yǎng)殖小區(qū)，共計(jì)592份。免疫豬群血清樣本來自4個(gè)地區(qū)，隱性感染抗體檢測(cè)陰性的豬群于采樣前1個(gè)月按照疫苗說明書肌肉注射疫苗，共采集血清樣本104份。

1.2 試劑 豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：100508），購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司。

1.3 疫 苗 種 類 豬 乙 型 腦 炎 活 疫 苗 （SA14－14－2株），購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司。

1.4 豬乙型腦炎血清抗體檢測(cè) 參照檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630值。試驗(yàn)成立的條件為：陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630值≥1.0，陰性對(duì)照孔平均OD630值必須＜0.3。判定標(biāo)準(zhǔn)為：樣品OD630值＞0.42，判為陽(yáng)性；樣品 OD630值在0.38－0.42之間，判為可疑；樣品 OD630值＜0.38，判為陰性。

2 結(jié) 果

2.1 未免疫感染豬群的JEV抗體檢測(cè)結(jié)果 采集貴州省貴陽(yáng)、遵義、凱里、畢節(jié)、六盤水、黔南等市、州未免疫豬乙型腦炎病毒疫苗豬群血清共592份，應(yīng)用豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)上述豬血清進(jìn)行JEV隱性感染抗體水平檢測(cè)，結(jié)果見表1。

表1 豬群JEV抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.1 Detection of JEV antibody from swinery in different cities

由表1數(shù)據(jù)可見，6個(gè)地區(qū)的JEV抗體陽(yáng)性率分別為41.8%、54.5%、73.7%、70.8%、70.4%和48.5%，抗體陽(yáng)性率平均達(dá)到59.97%（355/592）。結(jié)果可見，貴州省6個(gè)地區(qū)豬群乙型腦炎病毒隱性感染情況普遍較嚴(yán)重，但存在一定的差異。

2.2 不同飼養(yǎng)方式未免疫豬群隱性感染水平 將上述血清樣本豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)結(jié)果按照種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和養(yǎng)殖小區(qū)3種不同飼養(yǎng)方式進(jìn)行JEV隱性感染抗體水平統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表2。

表2 不同飼養(yǎng)方式豬群JEV抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.2 Detection of JEV antibody from swinery bred with different styles

由表2結(jié)果可見，種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和養(yǎng)殖小區(qū)的JEV 隱性感染抗體分別為36.8%（46/125）、56.3%（142/252）和77.7%（167/215）。結(jié)果顯示，規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和養(yǎng)殖小區(qū)的JEV隱性感染率明顯高于種豬場(chǎng)，且以養(yǎng)殖小區(qū)的隱性感染率最高。

2.3 不同月份未免疫豬群JEV隱性感染水平 將上述血清樣本豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)結(jié)果按照不同月份采集進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表3。

表3 不同月份豬乙型腦炎隱性感染豬群JEV抗體水平檢測(cè)結(jié)果Tab.3 Detection of JEV antibody from swinery in different months

由表3數(shù)據(jù)可見，4－10月份豬群JEV隱性感染抗體陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)，其中10月份達(dá)到高峰，11月份出現(xiàn)下降。不同月份豬群JEV隱性感染抗體陽(yáng)性率差異明顯，7－10月份為2010為一年中隱性感染高峰期。

2.4 JEV疫苗免疫豬群的抗體水平 采集自貴州省4市免疫乙型腦炎病毒疫苗豬群的血清104份，應(yīng)用豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)其進(jìn)行JEV免疫抗體水平監(jiān)測(cè)，結(jié)果見表4。

表4 四市免疫豬群JEV抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.4 Detection of JEV antibody from swinery in four cities

據(jù)表4試驗(yàn)結(jié)果分析，隱性感染抗體陰性豬群在免疫JEV疫苗1個(gè)月后，4個(gè)地區(qū)的豬群乙型腦炎平均抗體陽(yáng)性率達(dá)到81.7%（85/104），其中貴陽(yáng)市、畢節(jié)地區(qū)和六盤水市免疫豬群乙型腦炎抗體陽(yáng)性率均達(dá)到94%以上，僅黔東南州的抗體水平較低，僅為41.4%（12/29）。試驗(yàn)結(jié)果說明，疫苗免疫豬群的整體免疫效果較好，JEV疫苗免疫能刺激豬群產(chǎn)生較高的免疫保護(hù)抗體。

3 討 論

乙型腦炎病是一種重要的人獸共患病，而豬是人類感染該病傳播途徑里重要的環(huán)節(jié)，也是主要的傳染源，因而了解不同豬群的JEV隱性帶毒和疫苗免疫效果情況，不僅關(guān)系到養(yǎng)豬場(chǎng)的安全生產(chǎn)，同時(shí)對(duì)人群乙型腦炎的控制也具有一定的指導(dǎo)意義［8－10］。本研究采集了貴陽(yáng)市、遵義市等6市的6個(gè)種豬場(chǎng)、6個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和12個(gè)養(yǎng)殖小區(qū)的未免疫豬群592份血清樣本，通過豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試驗(yàn)監(jiān)測(cè)了不同地區(qū)的JEV隱性感染情況，結(jié)果顯示隱性感染抗體陽(yáng)性率平均為59.97%（355/592），這與2009年陸朝國(guó)等［11］調(diào)查結(jié)果相似，與沈冰［12］等調(diào)查上海市的感染規(guī)律相似，但高峰值低于上海市。對(duì)所采集血清來源、采集時(shí)間、養(yǎng)殖方式進(jìn)行數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，JEV隱性感染率在養(yǎng)殖方式上呈現(xiàn)養(yǎng)殖小區(qū)＞規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)＞種豬場(chǎng)；在時(shí)間上呈現(xiàn)4－10月份為逐漸增長(zhǎng)的趨勢(shì)，11月份出現(xiàn)下降；在來源上呈現(xiàn)不同城市JEV隱性感染率不盡相同，但差異不明顯，上述數(shù)據(jù)表明，貴州省豬群存在著較為嚴(yán)重的JEV隱性感染情況。本研究還對(duì)104份血清樣本進(jìn)行了疫苗免疫效果評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示疫苗免疫抗體陽(yáng)性率平均為81.7%（85/104），疫苗免疫能刺激豬群機(jī)體產(chǎn)生較高水平的保護(hù)抗體，因此對(duì)本病的防控應(yīng)堅(jiān)持疫苗預(yù)防為主。

多年研究已經(jīng)證實(shí)，自然界中JEV在蚊－豬－蚊中循環(huán)繁殖，其中三帶喙庫(kù)蚊是豬乙型腦炎病毒的主要傳播媒介，豬是主要的擴(kuò)散宿主。而根據(jù)貴州省志·地理志報(bào)道［13］，貴州省的蚊蟲種類多，數(shù)量大，其中以三帶喙庫(kù)蚊為優(yōu)勢(shì)蚊種。本研究對(duì)未免疫JEV疫苗的豬群隱性感染抗體檢測(cè)結(jié)果也呈現(xiàn)出與蚊繁殖季節(jié)、繁殖區(qū)域之間的相關(guān)性。貴州省濕潤(rùn)、溫和等特殊的氣候條件，極易蚊群的繁殖，尤其在5－10月間更是貴州省蚊群高繁殖期，這與本研究7－10月份豬群呈現(xiàn)最高的JEV隱性感染率存在直接關(guān)系。而各城市之間氣候存在較大差異，不同飼養(yǎng)方式的豬場(chǎng)環(huán)境、滅蚊措施（優(yōu)異程度呈現(xiàn)種豬場(chǎng)＞規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)＞養(yǎng)殖小區(qū)）也存在較大差異，這直接決定了JEV隱性感染率在城市之間、飼養(yǎng)方式之間產(chǎn)生的差異。綜合分析不難看出貴州省養(yǎng)豬場(chǎng)JEV隱性感染與其傳播媒介三帶喙庫(kù)蚊存在著明顯的相關(guān)性。而蚊亦是人乙型腦炎的重要傳播媒介，如此高的豬群隱性感染率也直接威脅著各地居民的人身健康。

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