李春燕，屠婕紅，傅應(yīng)華（1.杭州市下城區(qū)天水武林街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，杭州市310003；.嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院，嘉興市 314001）

丙酸氯倍他索系一種腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，為《中國藥典》2010年版二部收載的品種[1]，其制劑劑型主要有乳膏、軟膏、洗劑等，可用于治療皮膚炎癥和瘙癢癥，如神經(jīng)性皮炎、接觸性皮炎、脂溢性皮炎、濕疹等[2]?！吨袊幍洹?010年版二部收載的丙酸氯倍他索質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載其殘留溶劑檢測項目，文獻也未見有相關(guān)報道。丙酸氯倍他索因生產(chǎn)工藝不同引入的殘留溶劑也不同，其中甲醇、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）和二甲基亞砜等為主要殘留溶劑。已有的丙酸氯倍他索藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)制定了乙醇、DMF 2種殘留溶劑的限度檢查方法[3]，尚不能控制不同生產(chǎn)工藝所制產(chǎn)品中殘留溶劑的檢測方法。有關(guān)殘留溶劑的檢測方法主要有氣相色譜法[4，5]，為了提高本品質(zhì)量及用藥安全，筆者依據(jù)《中國藥典》2010年版二部附錄“殘留溶劑測定法”的相關(guān)要求[1]，對該原料藥中不同生產(chǎn)工藝引入殘留溶劑的檢測方法進行了研究，建立了毛細(xì)管氣相色譜法同時測定上述4種殘留溶劑的方法。該法可以控制不同生產(chǎn)工藝條件下的殘留溶劑，方法簡單、靈敏、準(zhǔn)確。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

6890N氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測器（FID）、7683B自動進樣器（帶10μL微量注射針）、色譜數(shù)據(jù)工作站（美國Agilent公司）；BP211D電子天平（北京賽多利斯有限公司，精度：±0.01 mg）。

1.2 試藥

丙酸氯倍他索原料藥5批（某原料藥廠提供，批號：20100316、20100319、201003122、20100323、20100325，按干燥品計，含量分別為100.3%、99.8%、99.2%、101.3%、98.77%）；無水乙醇（以下簡稱為乙醇）為分析純，甲醇、DMF和二甲基亞砜均為色譜純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

HP-INNOWAX石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 μm，0.25 μm）；柱溫：程序升溫，初始溫度60℃，保持5 min，并以30℃·min－1速率升溫至160℃，保持5 min；載氣：高純氮氣，流速：1.0 mL·min－1；FID溫度：250 ℃；進樣口溫度：160 ℃；進樣方式：分流進樣，分流比：5.0∶1；燃?xì)猓簹錃猓?0 mL·min－1；助燃?xì)猓嚎諝猓?50 mL·min－1；尾吹氣：氮氣，25 mL·min－1；進樣量：1 μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液。分別精密稱取甲醇15.01 mg、乙醇24.96 mg、DMF 4.37 mg、二甲基亞砜25.11 mg，置于加有適量1，6-二氧六環(huán)（溶劑）的10 mL容量瓶中，用1，6-二氧六環(huán)稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液；再精密量取上述貯備液1 mL，置于10 mL容量瓶中，用1，6-二氧六環(huán)稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 樣品溶液。取本品約0.5 g，精密稱定，置于10 mL容量瓶中，加1，6-二氧六環(huán)使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性考察。分別精密量取1，6-二氧六環(huán)和“2.2”項下對照品溶液和樣品溶液各1μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜。結(jié)果，1，6-二氧六環(huán)中的雜質(zhì)峰不干擾殘留溶劑的分析，色譜見圖1。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC chromatograms

2.3.2 線性關(guān)系考察。分別取甲醇、乙醇、DMF、二甲基亞砜各10 mg，精密稱定，置于10 mL容量瓶中，加1，6-二氧六環(huán)至刻度，搖勻；精密量取上述溶液適量，用1，6-二氧六環(huán)逐級稀釋制成1.0、0.5、0.25、0.1、0.02 g·L－1的溶液，按上述色譜條件測定，以所得峰面積（Y）與相應(yīng)對照品濃度（X）作線性回歸處理，得甲醇、乙醇、DMF、二甲基亞砜的回歸方程：Y＝770.4X－0.680，r＝1.000；Y＝1 219.6X+3.435，r＝1.000；Y＝903.7X+1.000，r＝1.000；Y＝976.7X+3.181，r＝1.000。表明各有機溶劑檢測濃度線性范圍均為0.02～1.0 g·L－1。

2.3.3 進樣精密度。精密量取對照品溶液1μL，注入氣相色譜儀，重復(fù)進樣6次，測定峰面積，計算平均峰面積：甲醇為120.8（RSD＝2.88%），乙醇為300.9（RSD＝1.61%），DMF為41.2（RSD＝1.16%），二甲基亞砜為403.1（RSD＝1.57%），表明精密度良好。

2.3.4 溶液穩(wěn)定性試驗。取對照品溶液，分別于0、2、4、6、8 h取樣測定峰面積，計算得4種有機溶劑峰面積的RSD均低于2.0%，表明溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5 最低定量限試驗。精密量取“2.3.2”項下的0.02 g·L－1溶液適量，用1，6-二氧六環(huán)逐級稀釋，依法測定，按S/N＝10計算，結(jié)果，最低定量濃度甲醇、乙醇、DMF、二甲基亞砜分別為0.60、0.98、0.38、0.79 μg·mL－1。

2.3.6 加樣回收率試驗。取經(jīng)105℃干燥至恒重的樣品（批號為080115）約0.5 g，置于10 mL容量瓶中，精密稱定，共6份，分別精密加入上述對照品貯備液1 mL，再加1，6-二氧六環(huán)使溶解并稀釋至刻度，搖勻；再取對照品溶液，依法測定，計算回收率。得甲醇為99.3%（RSD＝0.70%）、乙醇為102.5%（RSD＝1.02%）、DMF為 97.6%（RSD＝1.09%）、二甲基亞砜為100.1%（RSD＝1.23%）（n＝6）。

2.3.7 樣品中殘留溶劑量測定。取批號為20100316、20100319、201003122、20100323、20100325的5批樣品各0.5 g，精密稱定，按“2.2.2”項下方法制備樣品溶液，取“2.2.1”項下對照品溶液作對照，依法測定。結(jié)果，批號20100319樣品中檢出甲醇量為0.06%，批號201003122、20100323樣品中檢出乙醇量分別為0.11%和0.18%，其余各批樣品均未檢出上述4種殘留有機溶劑。

3 討論

3.1 溶劑的選擇

丙酸氯倍他索不溶于水，在乙酸乙酯與1，6-二氧六環(huán)中溶解，筆者試用乙酸乙酯作溶劑，結(jié)果因乙酸乙酯保留時間短，對甲醇、乙醇測定影響較大而棄用；改用1，6-二氧六環(huán)作溶劑，保留時間適宜，對上述4種溶劑測定均無影響，故選擇1，6-二氧六環(huán)作溶劑。

3.2 色譜條件的選擇

考慮到甲醇、乙醇、DMF、二甲基亞砜均為極性溶劑，且沸點差別較大，經(jīng)試驗在HP-INNOWAX毛細(xì)管色譜柱上各組分分離效果良好。由于DMF、二甲基亞砜和1，6-二氧六環(huán)沸點較高，若采用等柱溫法，出峰時間長，拖尾嚴(yán)重。為了改善分離、縮短分析周期，采用了程序升溫法，讓低沸點的甲醇、乙醇先出峰，再快速升高柱溫使DMF、二甲基亞砜和1，6-二氧六環(huán)加速出峰，大大提高了DMF、二甲基亞砜的柱效，且峰形對稱。但試驗發(fā)現(xiàn)氣化室溫度高時，易產(chǎn)生丙酸峰，其保留時間與DMF的保留時間相近，會影響后者的分離。通過多次試驗，考察不同氣化溫度下的雜質(zhì)峰影響，當(dāng)溫度降至160℃時未見雜質(zhì)峰產(chǎn)生。在給定的色譜條件下，甲醇、乙醇、DMF、二甲基亞砜之間均達(dá)到基線分離，一次進樣在13 min內(nèi)完成測定，達(dá)到了快速分析的目的。

3.3 溶劑限度的擬定

根據(jù)《中國藥典》2010年版二部[1]規(guī)定，甲醇、DMF為第2類溶劑，其限度分別為0.3%、0.088%；乙醇、二甲基亞砜為第3類溶劑，限度均為0.5%。

[1] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：101、附錄61-65.

[2] 陳新謙，金有豫，湯 光主編.新編藥物學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：630.

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)——丙酸氯倍他索YBH00962008[S].2008.

[4] 葉海青，傅應(yīng)華.毛細(xì)管氣相色譜法測定丙酸倍氯米松中3種有機溶劑殘留量[J].中國藥房，2010，21（13）：1 235.

[5] 魏京京，張啟明，朱維華.毛細(xì)管氣相色譜測定27種常用有機溶劑[J].藥物分析雜志，2006，26（8）：1 171.