溫為庚 ， 林黑著 ， 吳開(kāi)暢 ， 楊其彬 ， 黃建華 ， 江世貴

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所，廣東 廣州 510300)

蝦青素(astaxanthin),又名蝦黃質(zhì)、蝦黃素，在醫(yī)藥、化妝品、保健品中有廣泛的用途。有著色、促生長(zhǎng)和增強(qiáng)免疫力的生物功能[1-2]，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中也開(kāi)展了廣泛的研究[3-4]。

斑節(jié)對(duì)蝦Penaeusmonodon是暖水性蝦類(lèi)，適溫范圍15～35 ℃，個(gè)體大，離水存活時(shí)間長(zhǎng)，肉味鮮美，深受消費(fèi)者的青睞，是市場(chǎng)的暢銷(xiāo)品種。早在20世紀(jì)80年代末，就在中國(guó)廣東、廣西、海南等地開(kāi)展養(yǎng)殖。目前，斑節(jié)對(duì)蝦養(yǎng)殖遇到生長(zhǎng)緩慢、個(gè)體大小參差不齊、疾病頻發(fā)，等等問(wèn)題。為了斑節(jié)對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)健康、持續(xù)發(fā)展，水產(chǎn)科技工作者開(kāi)展了深入的研究[5]。蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦的生長(zhǎng)和免疫力的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本文在這方面展開(kāi)探討，為斑節(jié)對(duì)蝦健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料來(lái)源

蝦青素是鄭州荔諾生物科技有限公司生產(chǎn)，含量5%以上。基礎(chǔ)飼料是湛江恒興集團(tuán)生產(chǎn)的斑節(jié)對(duì)蝦預(yù)混粉料。分別添加蝦青素(0，10，20，40，80，160 mg·kg-1)，攪拌均勻, 用擠條機(jī)制成直徑1.0 mm的顆粒, 涼干，- 20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)蝦是自行培育的斑節(jié)對(duì)蝦苗，在室外4×3 m2水泥池標(biāo)粗。標(biāo)粗海水經(jīng)沙濾，pH 8.2，鹽度32，溫度28～30 ℃.培育密度1萬(wàn)尾/ m2，水深1 m，投喂人工配合飼料、魚(yú)肉，培育到約3 cm體長(zhǎng)，備用。

1.2 飼養(yǎng)條件及方法

飼養(yǎng)用水同1.1，容器是0.5 m3的玻璃鋼桶，底面積0.64 m2，置于室外實(shí)驗(yàn)棚中，蓋遮光率為60%的遮陽(yáng)網(wǎng)，鼓風(fēng)機(jī)連續(xù)充氣增氧。挑選大小均勻的對(duì)蝦，每個(gè)梯度設(shè)3個(gè)平行，每個(gè)平行30尾。吸去對(duì)蝦體表水份，電子天平(精確度0.01 g)稱(chēng)重(濕質(zhì)量)?？瘴? d，每天過(guò)量投喂自制飼料3次：8:00、15:00、20:00。投料后2 h吸底，流水養(yǎng)殖，流速1 000 mL·min-1，飼養(yǎng)30 d。

1.3 血清制備及免疫指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)結(jié)束時(shí)，用1 mL無(wú)菌注射器從對(duì)蝦圍心腔內(nèi)抽取血樣置于離心管中,4℃冰箱保存,待血液凝固后,5 000 r·min-1離心10 min,移出上清液即得血清。PO相對(duì)活力測(cè)定用王雷等[6]的方法。ALP、POD、SOD的測(cè)定用試劑法，南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.4 數(shù)據(jù)分析處理

數(shù)據(jù)記錄用，SPSS13.0軟件處理，進(jìn)行單因素方差分析，Duncan多重比較，差異顯著性水平P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 蝦青素對(duì)生長(zhǎng)的影響

添加不同劑量蝦青素，實(shí)驗(yàn)組對(duì)蝦增質(zhì)量率比對(duì)照組增加顯著(P<0.05)，而160 mg·kg-1組比其它組增加量略小。在存活率方面，除20,40 mg·kg-1組外差異顯著。特定生長(zhǎng)率也有顯著差異(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦生長(zhǎng)的影響1)

1)同列數(shù)據(jù)中上標(biāo)不同字母者之間差異顯著(P<0.05)

Means with in the same list with the different superscript letter are significantly different(P<0.05)

2.2 蝦青素對(duì)免疫指標(biāo)的影響

飼料中添加蝦青素40 mg·kg-1以上時(shí)對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦PO活力影響顯著(P<0.05)，80 mg·kg-1以下時(shí)酶活力隨蝦青素的增加而增加。160 mg·kg-1時(shí)，PO活力略有下降。對(duì)ALP、POD、SOD活力沒(méi)有顯著影響，見(jiàn)表2。

表2 蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦免疫指標(biāo)的影響1)

1)同列數(shù)據(jù)中上標(biāo)不同字母者之間差異顯著(P<0.05)

Means with in the same list with the different superscript letter are significantly different(P<0.05)

3 討 論

3.1 關(guān)于蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦生長(zhǎng)的影響

金征宇等[3]在羅氏沼蝦Macrobrachiumrosenbergii研究中發(fā)現(xiàn)：蝦青素能顯著提高羅氏沼蝦的增質(zhì)量率和存活率。裴素蕊等[4]在凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei飼料中添加蝦青素。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：蝦青素可顯著提高凡納濱對(duì)蝦的特定生長(zhǎng)率，對(duì)存活率無(wú)顯著影響。在本實(shí)驗(yàn)中，添加蝦青素能顯著提高斑節(jié)對(duì)蝦的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率， 但160 mg·kg-1組比其余組增加量稍為減小。而存活率沒(méi)有明顯規(guī)律性。

Petri 等[7]在小白鼠飼料中添加蝦青素，飼養(yǎng)一段時(shí)間后，小白鼠組織中蝦青素含量不再升高。蝦青素具有生物活性，參與多種代謝過(guò)程，含量應(yīng)保持動(dòng)態(tài)平衡。就是說(shuō)，蝦青素添加過(guò)量后，對(duì)蝦會(huì)增加代謝把多余的排出體外。這會(huì)額外消耗對(duì)蝦體能，導(dǎo)致對(duì)蝦在高添加量時(shí)生長(zhǎng)略有下降。蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦存活率的影響有待在大規(guī)模生產(chǎn)中進(jìn)行深入研究。

3.2 關(guān)于蝦青素對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦免疫的影響

謝劍華等[8]在日本沼蝦Macrobrachiumnipponensis研究中發(fā)現(xiàn)：蝦青素可顯著提高日本沼蝦的免疫力。在本實(shí)驗(yàn)中，蝦青素能顯著提高斑節(jié)對(duì)蝦PO活力。PO活力隨蝦青素添加量緩慢上升，160 mg·kg-1時(shí)略有下降。對(duì)ALP、POD和SOD活力影響不顯著。

PO以酶原的形式存在于大顆粒細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞中,可被β-葡聚糖、脂多糖和肽聚糖等激活。蝦青素的作用可能是激活了酚氧化酶原系統(tǒng)。額外的代謝會(huì)消耗對(duì)蝦體能，這可能是一種脅迫，進(jìn)而導(dǎo)致對(duì)蝦PO活力在高劑量時(shí)反而略有下降。楊志彪[9]等的研究認(rèn)為：水中添加少量Cu2+,中華絨螯蟹EriocheirsinensisALP先升后降。ALP是一種含Zn2+酶，可由Cu2+激活，但過(guò)量時(shí)會(huì)造成機(jī)體損傷，因此ALP活力先升后降。蝦青素可能不能激活A(yù)LP，因而ALP活力無(wú)變化，POD 和SOD是重要的抗氧化酶,具有催化超氧化物陰離子自由基的歧化反應(yīng),清除自由基，阻止自由基引起連鎖反應(yīng),對(duì)機(jī)體起保護(hù)作用。蝦青素是一種抗氧化劑，本實(shí)驗(yàn)中，POD 和SOD活力沒(méi)有變化，可能是蝦青素發(fā)揮了抗氧化作用。

參考文獻(xiàn)：

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[3]金征宇,過(guò)世東,呂玉華.飼料中添加富含蝦青素的法夫酵母對(duì)羅氏沼蝦的體色及生長(zhǎng)狀況的影響 [J].飼料工業(yè)，1999,20(10)：29-31.

[4]裴素蕊,管越強(qiáng),馬云婷.飼料中添加蝦青素對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、存活和抗氧化能力的影響 [J].水產(chǎn)科學(xué)，2009,28(3)126-129.

[5]劉棟輝,陽(yáng)會(huì)軍,劉永堅(jiān).β_葡聚糖和維生素C對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗病力的效果 [J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2002,41(4)：59-62.

[6]王 雷,李光友,毛遠(yuǎn)興.口服免疫藥物后中國(guó)對(duì)蝦某些血淋巴因子的測(cè)定及方法研究 [J].海洋與湖沼,1995,26(1):34-41.

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[8]謝劍華,管越強(qiáng),王靜波.蝦青素對(duì)日本沼蝦血細(xì)胞密度及吞噬活力的影響 [J].河北漁業(yè)，2008,169(1)：8-11.

[9]楊志彪,趙云龍,周忠良,等.水體銅對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)代謝酶活力的影響 [J].海洋與湖沼，2006,37(02):118-124.