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膠體金免疫層析法檢測(cè)cTnI對(duì)AMI的診斷價(jià)值

2011-06-09 03:39:36周榮斌劉宇
河北醫(yī)藥 2011年19期
關(guān)鍵詞:血樣膠體金層析

周榮斌 劉宇

急性心肌梗死(AMI)是嚴(yán)重危及人類生命的心血管常見急危重癥,通過檢測(cè)特異性心肌損傷標(biāo)志物,作為AMI的早期診斷現(xiàn)已廣泛應(yīng)用。我科采用膠體金法測(cè)定心肌標(biāo)志物血清肌鈣蛋白I(cTnI)診斷試劑盒,對(duì)140例AMI患者進(jìn)行檢測(cè),報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年7月至2010年3月我科患者140例。其中40例根據(jù)2007年ACC/AHA發(fā)布的急性ST段抬高型心肌梗死指南和不穩(wěn)定型心絞痛與非ST段抬高型心肌梗死指南,證實(shí)為AMI;且抽血時(shí)間選擇在發(fā)病4 h后(因發(fā)病時(shí)間小于4 h心肌標(biāo)志物未在時(shí)間窗內(nèi)而導(dǎo)致假陰性不在本研究范圍內(nèi))。100例為金標(biāo)準(zhǔn)證實(shí)無此病的正常人,包括確定無該病的健康人(50例)及確定無AMI但有與其相混淆疾病的病例(如心絞痛、急性非特異性心包炎、急性肺動(dòng)脈栓塞等)50例。

1.2 研究方法 本試驗(yàn)采用雙盲、自身對(duì)照方法。140例患者抽取靜脈血,以北京科衛(wèi)臨床診斷試劑有限公司研制生產(chǎn)的cTnI診斷試劑盒(膠體金法,批號(hào):200808001)作為試驗(yàn)組,以杭州艾康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的cTnI診斷試劑盒 (膠體金法,批號(hào):200809022)作為對(duì)照組,分別對(duì)血液樣本進(jìn)行比較測(cè)試。對(duì)所有待檢測(cè)血液標(biāo)本,嚴(yán)格按待考核試劑盒和對(duì)比試劑盒的使用說明書進(jìn)行操作。在操作時(shí)必須在說明書規(guī)定的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行比較,即在同一檢測(cè)室、同一儀器設(shè)備、同一檢測(cè)人員按說明書進(jìn)行。對(duì)比試劑和待考核試劑分別按各自說明書進(jìn)行平行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)輸入到Excel表中,分別統(tǒng)計(jì)其2種試劑盒的陰陽性樣本數(shù),列成2×2列聯(lián)表,計(jì)算2種試劑盒的敏感性、特異性、誤診率、漏診率。應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組cTnI水平比較 2組cTnI陽性情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。見表1。

表1 2 組 cTnI對(duì)比 n=140,例

2.2 2組特異性比較 對(duì)100例正常人血樣進(jìn)行對(duì)比檢測(cè),2組特異性比較。見表2。

表2 正常人群血樣中不同試劑的檢出情況 n=100

2.3 2組測(cè)試結(jié)果比較 試驗(yàn)組以對(duì)照組ACON同類試劑盒作比對(duì),其特異性為98.0%,相對(duì)敏感度為97.4%,誤診率為2.0%,漏診率為2.6%。見表3。

表3 2組cTnI診斷試劑盒的比較測(cè)試結(jié)果 n=140,例

3 討論

肌鈣蛋白是組成橫紋肌細(xì)肌絲的結(jié)構(gòu)蛋白,其亞單位I、T和C組成復(fù)合物,在肌肉收縮和舒張過程中起著重要調(diào)節(jié)作用。其中,cTnI已被證實(shí)為心肌損傷最特異、最敏感的血清標(biāo)志物之一。正常人血液中含量一般低于0.3 μg/L,當(dāng)心肌細(xì)胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受到破壞時(shí),游離的cTnI可迅速透過細(xì)胞膜進(jìn)入血流。因此,在發(fā)病初期,快速、靈敏且準(zhǔn)確地測(cè)定人血中的cTnI及其變化趨勢(shì)對(duì)于急性心肌梗死的診斷、急性冠狀動(dòng)脈綜合征的危險(xiǎn)分層、監(jiān)測(cè)各種因素導(dǎo)致的心肌損傷等有著重要的臨床意義[1]。

目前國(guó)內(nèi)外已有檢測(cè)cTnI的試劑盒上市,主要采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)、化學(xué)發(fā)光法、金標(biāo)層析法、生物芯片等,少數(shù)公司產(chǎn)品已獲美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)注冊(cè)或歐洲統(tǒng)一(CE)認(rèn)證。雖然檢測(cè)的試劑、方法很多,但是臨床應(yīng)用研究中發(fā)現(xiàn),各種方法測(cè)定結(jié)果之間差異很大[2]。例如心肌肌鈣蛋白是目前發(fā)現(xiàn)的診斷心肌損傷最特異、最敏感的標(biāo)志物之一[3],1995年美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于臨床AMI的診斷。不同檢測(cè)方法間測(cè)定值最大可差36倍[4],原因包括各種檢測(cè)方法采用的抗體各不相同,cTnI分子內(nèi)的不同片段和不同抗原決定簇受氧化-還原反應(yīng)、磷酸化反應(yīng)或蛋白水解酶作用等而降解的影響各不相同。各生產(chǎn)廠商的cTnI校準(zhǔn)品各不相同,甚至使用同一份標(biāo)定cTnI值的人血清進(jìn)行校準(zhǔn)也未能完全消除不同測(cè)定系統(tǒng)之間測(cè)定值的差異。為加快檢測(cè)速度,許多檢測(cè)系統(tǒng)設(shè)計(jì)采用血漿或全血標(biāo)本??鼓齽┑倪x用是否得當(dāng)將直接影響檢測(cè)結(jié)果。

金標(biāo)層析法以其標(biāo)本用量少、簡(jiǎn)便快速、無污染等優(yōu)點(diǎn),在醫(yī)療衛(wèi)生部門的臨床及現(xiàn)場(chǎng)診斷中被廣泛應(yīng)用。膠體金法測(cè)定的cTnI/CK-MB/肌紅蛋白三合一診斷試劑盒,采用膠體金免疫層析原理,當(dāng)血樣被滴入點(diǎn)樣孔后,紅血球在分離系統(tǒng)中被移除。樣品中含有的cTnI在與特異抗體-染料復(fù)合物以及生物素化抗體復(fù)合物結(jié)合,形成染料-特異抗體-cTnI-生物素化抗體復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物移動(dòng)通過含固著鏈霉親合素的區(qū)域,二者結(jié)合后在檢測(cè)區(qū)顯色快速一步檢測(cè)血清/血漿/全血中cTnI。沒有結(jié)合的染料復(fù)合體移出檢測(cè)區(qū)域最終被陽性對(duì)照區(qū)捕獲。本研究結(jié)果顯示應(yīng)用膠體金免疫層析法測(cè)定的心肌標(biāo)志物,與對(duì)照同類產(chǎn)品比較,2組產(chǎn)品質(zhì)量差異有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,試驗(yàn)cTnI特異性為98.0%,相對(duì)敏感度為97.4%,誤診率為2.0%,漏診率為2.6%,能較好的檢測(cè)患者血樣中的cTnI,且操作快捷、簡(jiǎn)便,適用于臨床特別是急診科用于AMI的輔助診斷。

1 Alpert JS,Thygesen K,Antman E,et al.Myocardial infarction redefined-a consensus document of The Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee for the redefinition of myocardial infarction.J Am Coll Cardiol,2000,36:959-969.

2 Apple FS.Clinical and analytical standardization issues confronting cardiac troponin I.Clin Chem,1999,45:18-20.

3 Apple FS,Murakami MM.The diagnostic utility of cardiac biomarkers in detecting myocardial infarction.Clin Comerstone,2005,7:25-30.

4 Datta P,F(xiàn)oster K,Dasgupta A.Comparison of immunoreactivity of five human cardiac troponin I assay toward free and complexed forms of the antigen:implications for assay discordance.Clin Chem,1999,45:2266-2269.

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