陸寧海,吳利民,侯培琳,段淮軍,汪立群
(河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003)
化學(xué)農(nóng)藥在使用中產(chǎn)生的一系列公害問題如環(huán)境污染、殺傷天敵、破壞生態(tài)平衡等已引起人們的普遍關(guān)注,因此,開發(fā)高效、低毒、低殘留的新型無公害農(nóng)藥,逐漸成為植物病害防治的重要研究內(nèi)容之一.植物是生物活性化合物的天然寶庫,其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物超過40萬種,其中大多數(shù)化學(xué)物質(zhì)如萜烯類、生物堿、類黃酮、甾體、酚類、獨(dú)特的氨基酸和多糖等均具有殺蟲或抗菌活性[1-2].20世紀(jì)80年代后,我國植物源殺菌劑研究開發(fā)進(jìn)展迅速,并取得了一系列的成果[3-6].從植物體內(nèi)的次生物質(zhì)中尋找能抑制有害生物的有效成分,直接提取應(yīng)用或明確有效成分結(jié)構(gòu)后進(jìn)行仿生合成,已成為無公害農(nóng)藥的開發(fā)熱點(diǎn)之一[7].
南天竹(Nandina domestica),又名南天竺,屬小檗科南天竹屬常綠灌木.其莖、根、葉、花、果實(shí)等部位含有生物堿、黃酮等多類活性物質(zhì)[8].關(guān)于南天竹的藥用價(jià)值已有大量報(bào)道,如葉煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌均有抑制作用,可治療感冒、百日咳、目赤腫痛、瘰疬、尿血;果實(shí)斂肺止咳,清肝明目,治久咳、氣喘、瘧疾;根祛風(fēng)、清熱,除濕、化痰,治風(fēng)熱頭痛,肺熱咳嗽、濕熱黃疸、風(fēng)濕痹痛[9].但南天竹對(duì)植物病原菌的抑制作用尚無相關(guān)報(bào)道.本試驗(yàn)研究了南天竹提取物對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用,現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下.
將南天竹的根、果皮、葉、枝和果實(shí)洗凈,自然陰干,分別用粉碎機(jī)粉碎,各稱20 g,分別加入100 mL丙酮溶劑,置于250 mL三角瓶中冷浸提取3次,時(shí)間各為48 h,合并濾液,濃縮為1 g/mL,移裝于25 mL三角燒瓶,密封,于4~8℃冰箱冷藏備用[10].
供試菌種為小麥紋枯病菌Glomerella cigulate、番茄褐斑病菌Coniothyrium diplodiella、番茄早疫病菌Alternaria solani、黃瓜褐斑病菌Magnapothe grisea,由河南科技學(xué)院植物保護(hù)系植物病理教研室提供.
采用生長速率法[11-12]進(jìn)行抑菌生物活性測(cè)定.在無菌條件下,分別取各器官提取液5 mL置于50 mL 38℃的PDA滅菌培養(yǎng)基中,以加入等量溶劑為對(duì)照,搖勻,倒入直徑6 cm的滅菌培養(yǎng)皿中制成平板.冷卻凝固后接入生長一致、直徑為4 mm菌餅,每皿接一個(gè)菌餅,每處理重復(fù)3次,放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 d,測(cè)菌落直徑,計(jì)算抑菌率.
南天竹根提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用見表1.
表1 南天竹根提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用
由表1可見,南天竹根提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長有較強(qiáng)的抑制作用,且抑制率均高于35%,但對(duì)不同病原菌菌絲生長的抑制作用強(qiáng)弱不同,其中對(duì)小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制作用最強(qiáng),抑制率高達(dá)57.5%,對(duì)番茄褐斑病菌和黃瓜褐斑病菌菌絲生長的抑制作用次之,對(duì)番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用相對(duì)較弱,抑制率為35.7%.
南天竹葉提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用見表2.
表2 南天竹葉提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用
由表2可見,南天竹葉提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長有較強(qiáng)的抑制作用,且抑制率均高于50%,但對(duì)不同病原菌菌絲生長的抑制作用強(qiáng)弱不同,其中對(duì)小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制作用最強(qiáng),抑制率高達(dá)71.3%,對(duì)番茄褐斑病菌和黃瓜褐斑病菌菌絲生長的抑制作用次之,對(duì)番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用相對(duì)較弱,抑制率為50.9%.
南天竹莖提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用見表3.
表3 南天竹莖提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用
由表3可見,南天竹莖提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長有一定的抑制作用,但對(duì)不同病原菌菌絲生長的抑制作用強(qiáng)弱不同,其中對(duì)小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制作用較強(qiáng),抑制率為49.9%,對(duì)番茄褐斑病菌和黃瓜褐斑病菌菌絲生長的抑制作用次之,對(duì)番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用相對(duì)較弱,抑制率為27.0%.
南天竹根提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用見表4.
表4 南天竹果實(shí)提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用
由表4可見,南天竹果實(shí)提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長有一定的抑制作用,但對(duì)不同病原菌菌絲生長的抑制作用強(qiáng)弱不同,其中對(duì)小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制作用較強(qiáng),抑制率為41.8%,對(duì)番茄褐斑病菌和黃瓜褐斑病菌菌絲生長的抑制作用次之,對(duì)番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用相對(duì)較弱,抑制率為20.4%.
試驗(yàn)結(jié)果表明南天竹不同器官提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長均有一定的抑制作用,但對(duì)不同病原菌菌絲生長的抑制作用強(qiáng)弱不同.其中,對(duì)小麥紋枯病菌和番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用較強(qiáng),對(duì)黃瓜褐斑病菌菌絲和番茄褐斑病菌菌絲生長的抑制作用次之,對(duì)番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用相對(duì)較弱.
南天竹不同器官提取物對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用不同,其中,果實(shí)的提取液的抑菌活性最低,對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制率均低于42%,南天竹莖提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長的抑制率均低于50%,南天竹葉提取液對(duì)4種植物病原菌菌絲生長有較強(qiáng)的抑制作用,抑制率均高于50%.
在室內(nèi)對(duì)南天竹粗提液進(jìn)行生物活性測(cè)定,某些含量較少但有抑菌活性的物質(zhì)有可能難以表現(xiàn)活性,應(yīng)該采用活性追蹤的方法對(duì)粗提液進(jìn)行進(jìn)一步的分離、純化,以尋找或確定其主要的抑菌活性成分[13-14].因此,有必要對(duì)南天竹提取液進(jìn)行活體抑菌測(cè)驗(yàn),并對(duì)南天竹提取液的殺菌譜、作用方式、作用機(jī)理進(jìn)行深入研究.
[1]段曉明,尹衛(wèi).植物源農(nóng)藥的研究進(jìn)展[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2006,24(5):56-59,79.
[2]俞曉平,呂仲賢,陳建明,等.我國植物源農(nóng)藥的研究進(jìn)展[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2005,17(1):42-48.
[3]楊征敏,吳文君,王明安,等.苦皮藤假種皮的殺菌活性成分研究[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào),2001(2):93-96.
[4]孟昭禮,吳獻(xiàn)忠,高慶霄,等.銀杏提取液對(duì)四種植物病原菌的抑菌作用[J].植物病理學(xué)報(bào),1995,25(4):357-360.
[5]馮俊濤,祝木金,于儒平,等.西北地區(qū)植物源殺菌劑初步篩選[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào),2002,30(6):129-133.
[6]吳利民,陸寧海,徐艷聆.花椒提取液對(duì)4種植物病原菌的抑制作用[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2008(6):667-668.
[7]史衛(wèi)國.天然產(chǎn)物農(nóng)藥的研究與開發(fā)[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,1997(3):33-35.
[8]文國琴,何道文,何震.南天竹不同葉色與若干生理生化指標(biāo)關(guān)系的研究[J].亞熱帶植物科學(xué),2005,34(4):38-40.
[9]陳冀勝.中國有毒植物[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1987:132.
[10]陸寧海,吳晴,劉果果,等.10種植物提取物抑菌活性的初步研究[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2011,39(4):42-45.
[11]陳紅兵,王金勝,張作剛,等.萬壽菊根的提取物對(duì)西瓜枯萎病反應(yīng)的抗性研究[J].植物病理學(xué)報(bào),2003,33(5):355-360.
[12]石明旺,劉彥文,李亞培,等.四種植物粗提物對(duì)小麥紋枯病菌抑菌作用[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào),2009,37(3):4-6.
[13]吳利民,陸寧海.八角茴香抑菌活性的初步研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2008(12):80-82.
[14]陸寧海,吳利民,付其林.枸杞抑菌活性的初步研究[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(4):68-70.