陳玉璞

河南省焦作市食品藥品檢驗(yàn)所，河南焦作 454000

鹽酸氯丙嗪片為吩噻嗪類(lèi)抗精神病藥物，主要用于治療興奮躁動(dòng)、幻覺(jué)妄想、思維障礙及行為紊亂等陽(yáng)性癥狀[1]。 鹽酸氯丙嗪片已經(jīng)用于臨床多年。鹽酸氯丙嗪含量測(cè)定方法為中國(guó)藥典2010年版二部的紫外分光光度法，該方法在檢測(cè)過(guò)程中會(huì)受到輔料的影響，雜質(zhì)對(duì)測(cè)定也有不同程度的干擾[2]。筆者采用高效液相色譜法測(cè)定其中的含量，方法簡(jiǎn)便，結(jié)果更接近真實(shí)含量，重現(xiàn)性好，可作為鹽酸氯丙嗪片質(zhì)量控制指標(biāo)。

1 儀器與試藥

UVIKONXL型紫外分光光度計(jì)（法國(guó)），CPA225D型雙量程電子天平，Agilent Technologies 1200型高效液相色譜儀（LC-10ADVP泵；SPD-10AVP紫外檢測(cè)器；CS-Light Potrun Analysis數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）；鹽酸氯丙嗪原料（常州康普藥業(yè)有限公司，含量99.6%）；鹽酸氯丙嗪片（上海信誼九福藥業(yè)有限公司，H31021537）；水為純凈水，乙腈為液相色譜專(zhuān)用，三氟醋酸為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱 CHROM-Matrix C8柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺調(diào)節(jié)pH值至5.3） （50︰50）；流速：1.00 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm；靈敏度：0.01AVFS；柱溫：30℃ ；進(jìn)樣量：20μL。

2.2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

利用上述2.1色譜條件，取空白溶劑即流動(dòng)相20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取用鹽酸氯丙嗪原料制成的對(duì)照品溶液（見(jiàn)2.3.1）及供試品溶液（見(jiàn)2.3.2），分別進(jìn)樣20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，從色譜圖上看出，在該色譜條件下，鹽酸氯丙嗪的保留時(shí)間約為4.1 min，理論塔板數(shù)為9000以上。見(jiàn)圖1。

圖1 HPLC圖譜

2.3 溶液的制備

2.3.1 對(duì)照品溶液 避光操作。取鹽酸氯丙嗪原料適量，精密稱(chēng)取10.28 mg，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻。精取5 mL，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液，濃度為82.24μg/mL。精密量取儲(chǔ)備液10 mL，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液，濃度為32.90μg/mL。

2.3.2 供試品溶液 避光操作。取樣品10片，除去包衣后，精密稱(chēng)取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪10 mg），置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，作為供試品儲(chǔ)備液。取續(xù)濾液5.0 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.4 線性關(guān)系的考察

精密量取2.3.1項(xiàng)下的對(duì)照品儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相準(zhǔn)確稀釋成鹽酸氯丙嗪的濃度為 3.29、9.87、16.45、23.03、32.90、49.35μg/mL。分別準(zhǔn)確進(jìn)樣20μL，按2.1色譜條件測(cè)定其峰面積，以對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得鹽酸氯丙嗪的回歸方程：Y=172353X+10114，r=0.9996。結(jié)果表明，鹽酸氯丙嗪在濃度3.29～49.35μg/mL，范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表1 鹽酸氯丙嗪片中鹽酸氯丙嗪加樣回收率（n=6）

2.5 精密度試驗(yàn)

按2.3.1項(xiàng)下的操作，配制對(duì)照品溶液。按照2.1的色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪的峰面積的RSD=0.71%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取2.3.2項(xiàng)下方法制備的供試品溶液，在室溫下放置后，按照 2.1 的色譜條件，分別在 0、4、8、12、16、20、24 h，取該溶液20μL注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪峰面積的RSD=0.33%。表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)100702的樣品，按照2.3.2項(xiàng)下的操作，平行制備6份供試品溶液，照2.1的色譜條件，分別進(jìn)行6次進(jìn)樣，每次20μL，測(cè)定峰面積，結(jié)果鹽酸氯丙嗪含量的RSD=0.81%。表明重現(xiàn)性較好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

取批號(hào)100702的樣品6份，分別取約0.05 g，精密稱(chēng)定，分置100 mL量瓶中，分別加入對(duì)照品溶液10.0 mL，用流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，按色譜條件2.1測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.9 樣品中鹽酸氯丙嗪的含量測(cè)定

取3批樣品各10片，除去包衣后，精密稱(chēng)定，按擬訂的方法制備供試溶液與對(duì)照品溶液。分別準(zhǔn)確進(jìn)樣20μL，按上述色譜條件，以峰面積計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品中鹽酸氯丙嗪的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

取2.3.1項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，用UVIKONXL型紫外分光光度計(jì)，以流動(dòng)相為空白，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，在254 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選用254 nm作為鹽酸氯丙嗪的試驗(yàn)檢測(cè)波長(zhǎng)[3]。

試驗(yàn)流動(dòng)相的不同比例，最終選擇流動(dòng)相為乙腈-0.5%三氟醋酸（用四甲基乙二胺調(diào)節(jié)pH值至5.3）（50︰50），此時(shí)出峰時(shí)間適宜，峰形滿(mǎn)意程度高。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（二部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005:29-31.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（二部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:784-785.

[3] 趙素珍,宋衛(wèi)云.高效液相色譜法測(cè)定清熱止瀉合劑中葛根素的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,4（30）:87-88.