蒲含林，姜 華，陳蓉蓉

中藥的化學(xué)成分決定中藥的作用和性質(zhì)，微量元素是中藥的重要有效成分，與中藥的性質(zhì)關(guān)系密切［1］。本研究以寒性中藥金銀花［2］、熱性中藥干姜［3］、平性中藥甘草［4］為實(shí)驗材料，制備其水提取物給小鼠飲用，觀察其發(fā)生的生理病理變化，測定不同組織中相關(guān)元素的含量變化。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 Perkin Elmer公司的電感耦合等離子體發(fā)射光譜(OPTIMA 2000 DV)。鹽酸和高氯酸等試劑均為國產(chǎn)分析純。中藥金銀花、干姜和甘草購自廣州石牌百康源平價藥房，實(shí)驗用NIH小鼠(21±2)g，雌性，購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心，合格證號:2009A011。

1.2 動物分組及給藥 將實(shí)驗用的動物按體質(zhì)量隨機(jī)分成4組:正常對照組、金銀花組、干姜組和甘草組，每組20只。正常對照組飲用自來水，其他實(shí)驗組分別飲用自來水浸取的金銀花、干姜和甘草的水溶液(濃度均為2 g/100 mL，80℃水浴2 h后過濾出溶液)，每2天換一次水和新浸取的各中藥的水浸取液，連續(xù)飲用2周，飼料按正常飼養(yǎng)投放。

1.3 現(xiàn)象觀察 每天下午定時觀察試驗動物的健康、進(jìn)食和生存情況，并做好記錄。

1.4 取材 于實(shí)驗前的最后一天，停止給予飼料。開始實(shí)驗時，脫頸處死小鼠，并取小鼠肝臟大葉的相同部位，用預(yù)冷的生理鹽水洗凈后，再用濾紙吸干;腎臟取出后，用預(yù)冷的生理鹽水洗凈，小心剝除外膜，從根部減去連接的血管，再用濾紙吸干;心臟取出后，用預(yù)冷的生理鹽水洗凈，再用濾紙吸干。

1.5 樣品處理 在萬分之一電子天平上精確稱量所需樣品的重量，盡可能使同一類樣品的重量接近一致，用3∶1高氯酸比鹽酸消化至澄清透明。金銀花、干姜、甘草樣品用去離子水洗凈晾干后消化測定。

1.6 數(shù)據(jù)測定及處理 元素含量的測定用外標(biāo)法，用電感耦合等離子體發(fā)射光譜測定。測定的元素有 Mn、Fe、Cu、Zn、Mg、Ca、P，用相同的方法測定中藥金銀花、干姜、甘草和飼料中相應(yīng)元素的含量。數(shù)據(jù)用±s表示，采用組間t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 試驗動物存活數(shù)量變化趨勢 對照組、金銀花組、干姜組和甘草組小鼠的存活數(shù)量見圖1。

2.2 試驗動物的存活率 對4組小鼠的成活率進(jìn)行統(tǒng)計，結(jié)果見表1。

2.3 試驗小鼠不同組織中元素含量 結(jié)果見表2。

圖1 不同條件下小鼠的存活數(shù)量

表1 試驗小鼠的成活率統(tǒng)計

2.4 試驗用藥材和飼料中元素含量 見表3。

表2 小鼠飲用不同寒熱屬性中藥水提液后，組織器官中部分元素的變化(±s，n=5)

表2 小鼠飲用不同寒熱屬性中藥水提液后，組織器官中部分元素的變化(±s，n=5)

注:與正常組比較 *P＜0.05，＊＊ P＜0.01

器官 組別Mn Fe Cu Zn Mg Ca P肝臟 正常對照 1.18±0.47 396.8±19.5 3.69±0.38 21.07±1.62 226.0±12.50 37.14±2.40 2 818±101.8金銀花 1.32±0.28 347.6±60.09* 4.15±0.38 26.29±4.20* 267.5±28.34＊＊ 37.72±2.56 3 578±180.9＊＊干姜 1.59±0.22* 331.3±25.11* 3.51±0.37 25.80±1.62* 231.7±10.88 37.97±3.31 3 018±168.9甘草 1.06±0.57 360.8±75.56 3.32±0.76 19.17±4.82 212.9±44.81 36.85±16.07 2 833±153.5腎臟 正常對照 1.49±0.17 173.5±27.21 4.35±0.16 20.71±0.66 208.0±6.33 57.53±3.36 3 213±93.55金銀花 1.39±0.11 181.6±31.79 4.53±0.43 23.25±6.42 216.6±14.43 62.11±7.42 3 287±196.4干姜 1.56±0.08 168.4±29.20 4.25±0.19 23.07±2.64 218.1±4.48 64.2±6.10 3 257±154.9甘草 1.41±0.15 185.2±10.32 4.26±0.36 18.96±3.09 202.3±10.15 40.14±3.27 3 260±186.1心臟 正常對照 0.71±0.16 89.55±4.73 7.01±0.57 29.19±8.70 255.3±12.62 114.8±22.68 2 478±318.6金銀花 0.62±0.05 92.10±5.32 7.03±0.87 35.24±3.65 246.8±10.54 56.87±11.05 2 576±213.7干姜 0.62±0.17 93.53±9.49 6.67±0.44 33.46±5.85 252.7±13.07 60.77±10.90 2 742±209.9甘草 0.62±0.06 89.45±7.59 6.65±0.36 23.10±0.79 240.6±7.95 36.95±10.06 2 690±137.2

表3 實(shí)驗材料中相應(yīng)元素的含量

3 討論

本試驗的目的是觀察小鼠較長時間連續(xù)飲用金銀花、甘草和干姜的水溶液是否會產(chǎn)生毒性反應(yīng)。預(yù)實(shí)驗中，金銀花和干姜的濃度為3 g/100 mL以上時，干姜組小鼠飲水很少，3～5 d死亡率達(dá)到70%;金銀花組飲水較干姜組稍多，但也大大少于空白對照組和甘草組，金銀花組的死亡率在5 d前后達(dá)到90%。選用2 g/100 mL的濃度給予自由飲用時，試驗小鼠的飲水量約為空白對照組和甘草組的1/2，在2周的試驗周期中能保證動物存活數(shù)量。

筆者觀察發(fā)現(xiàn)，開始分別飲用水提液后，金銀花組和干姜組小鼠毛色開始暗淡，體質(zhì)量明顯下降。飲用干姜水提液的小鼠嘴部周圍及鼻部明顯發(fā)干發(fā)白，體毛干燥泛白;飲用金銀花組的動物體毛暗黃，體形變瘦弱，活動減少。連續(xù)飲用提取液5 d左右時，金銀花組和干姜組開始有小鼠死亡，且死亡率較高;正常對照組和飲用甘草組的小鼠生長存活情況正常。元素含量測定表明，小鼠體內(nèi)肝、腎和心的部分元素含量發(fā)生了變化。飲用金銀花后，肝臟組織中銅、鋅、鎂和磷的含量都顯著增高，錳含量略增高，鐵含量顯著降低，肝臟的顏色明顯變暗，形態(tài)無明顯變化，脾臟明顯變小。飲用干姜后，肝臟組織中鋅、錳的含量顯著增高，鐵的含量顯著下降，其余元素的含量變化不大，肝臟的顏色變灰，形態(tài)無明顯變化，脾臟明顯變小。飲用甘草后，肝臟組織中錳、鐵、銅、鋅、鎂、鈣、磷的含量變化均較小，與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，肝臟、脾臟的顏色和形態(tài)均無明顯變化。飲用金銀花、干姜和甘草后，小鼠腎臟和心臟組織中錳、鐵、銅、鋅、鎂、鈣、磷的含量均有一定的變化，但與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果顯示，寒性中藥金銀花和熱性中藥干姜連續(xù)使用時，可能對機(jī)體有一定的毒性，其他寒性和熱性中藥是否有此結(jié)果尚待研究。

［1］ 黎曉敏，賈仁勇，王健，等.中藥不同藥性與無機(jī)元素關(guān)系的研究［J］.中國中藥雜志，1997，22(8):502-504.

［2］ 何晶.金銀花的藥理作用及臨床應(yīng)用［J］.天津藥學(xué)，2008，20(5):74-76.

［3］ 王夢，錢紅美，蘇簡單.干姜醇提物的毒性研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2000，2:60-62.

［4］ 鄭占虎，董澤紅，佘靖.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用(第3卷)［M］.北京:學(xué)苑出版社，1998:2568-2606.