潘佳秋,王慧慧,張 超,于學(xué)靜,姜飛飛

研究胰島素抵抗 (IR)的發(fā)生、發(fā)展可能為防治 2型糖尿病 (T2DM)及其相關(guān)代謝紊亂提供重要方法。研究表明游離脂肪酸 (FFA)在糖尿病患者 IR發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織是 IR發(fā)生的重要部位,近年研究顯示脂肪組織是非?；钴S的內(nèi)分泌器官,可能在 IR中起重要作用[1]。視黃醇結(jié)合蛋白 4(RBP4)是新近發(fā)現(xiàn)的脂肪組織分泌導(dǎo)致 IR的脂肪因子,可能參與 T2DM的發(fā)生。目前有關(guān) RBP4導(dǎo)致 IR發(fā)生的作用機(jī)制尚不明確,本研究旨在對(duì)血清 RBP4在新診斷T2DM患者發(fā)病中的作用及其與 FFA的關(guān)系進(jìn)行初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2008年 3月—2009年 11月在我院內(nèi)分泌科就診的新診斷 T2DM患者 76例,其中男 36例,女 40例;均符合 1999年 WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。新診斷是指病程＜1年的初診 T2DM患者 (本組患者平均病程為 2.5個(gè)月)?；颊呷虢M前未使用任何降糖、降脂藥物治療。另選取同期在我院體檢的 30例健康者為對(duì)照組,其中男 19例,女 11例。兩組受檢者均無明顯臨床心、肝、腎、惡性腫瘤病史及使用激素藥物史。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 兩組受檢者均禁食 10 h后于次日清晨空腹采集肘靜脈血 5 ml,離心分離血清,測(cè)定血糖、血脂、肝功能、胰島素水平等,另取一份血離心后存入 -40℃冰箱,用于血清 RBP4和 FFA測(cè)定。同時(shí)測(cè)量身高、體質(zhì)量,計(jì)算體質(zhì)指數(shù) (BMI)。

1.2.2 檢測(cè)方法 空腹血糖 (FPG)、血脂 [三酰甘油(TG)、總膽固醇 (TC)、高密度脂蛋白 (HDL)、低密度脂蛋白 (LDL)]、肝功能 [天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT)]等采用日本 OLYMPUS公司 AU-2700全自動(dòng)生化分析儀酶法進(jìn)行檢測(cè);空腹血漿胰島素 (FINS)采用德國羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè) (試劑盒購于德國羅氏公司,批內(nèi) CV＜2.0%,批間 CV＜2.5%);空腹血清 RBP4水平采用 ELISA法測(cè)定;FFA水平采用比色法測(cè)定。RBP4和FFA試劑盒為美國 R＆D公司生產(chǎn),由上海滬尚生物科技有限公司提供 (RBP4:批內(nèi) CV＜6%,批間 CV＜11%;FFA:批內(nèi) CV＜2.5%)。

胰島素抵抗指數(shù) (HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5;胰島 β細(xì)胞功能指數(shù) (HOMA-β)=FINS×20/FPG-3.5;ISI采用定量胰島素敏感性檢測(cè)指數(shù) (QUICKI),公式為 ISI=1/[Log(Io)+Log(Go)],Io為 FPG,Go為 FINS。公式中FPG單位均為 mmol/L,FINS單位均為 mU/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。計(jì)量資料以)表示,兩組間比較采用 LSD-t檢驗(yàn)。指標(biāo)間的關(guān)系判定用兩個(gè)變量相關(guān)分析及多元線性逐步回歸分析。p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料比較 兩組受檢者的年齡、AST、ALT、HDL、LDL、FINS水平比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05);T2DM組的 BMI、 TG、 TC、 FPG、 HOMA-IR、 FFA、RBP4均顯著高于對(duì)照組,ISI及 HOMA-β均顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05,見表 1)。

2.2 RBP4與各指標(biāo)的相關(guān)性及回歸分析 先以各參數(shù)與RBP4做相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn) RBP4與 BMI、TG、TC、HOMA-IR、FFA均呈正相關(guān) (r值分別為 0.219、0.454、0.429、0.379和0.612,P均 ＜0.05);與 ISI、HOMA-β呈負(fù)相關(guān) (r值分別為 -0.292和 -0.474,P均 ＜0.01)。然后以 RBP4為因變量,BMI、TG、TC、FPG、HOMA-IR、FFA、ISI為自變量進(jìn)一步做多元逐步回歸分析,發(fā)現(xiàn) HOMA-IR、FFA是影響血清RBP4水平最顯著的因素,常數(shù)項(xiàng)為零。

表 1 T2DM組與對(duì)照組臨床資料比較 (x ±s)Table 1 Comparison of clinical data between the T2DM group and the control group

3 討論

IR是多種疾病的共同發(fā)病基礎(chǔ),如 T2DM、肥胖癥、高血壓、冠心病等,它們既各自獨(dú)立,又相互聯(lián)系,這個(gè)內(nèi)在聯(lián)系就是 IR及其所致的糖、脂代謝紊亂[2]。本研究結(jié)果顯示,T2DM患者血清 RBP4、FFA水平均顯著高于健康者,同時(shí)發(fā)現(xiàn) T2DM患者 BMI、HOMA-IR顯著升高,ISI顯著下降。有研究表明肥胖組患者 RBP4水平較非肥胖組有升高趨勢(shì),所以肥胖可能是導(dǎo)致 RBP4水平升高的原因之一[3]。但本研究結(jié)果同時(shí)顯示 RBP4與 ISI呈負(fù)相關(guān),提示 RBP4可能參與 IR。相關(guān)的研究亦證實(shí)這一觀點(diǎn)[4]。Ost等[5]在對(duì)原始脂肪細(xì)胞進(jìn)行RBP4及其抗體干預(yù)時(shí)發(fā)現(xiàn),RBP4可阻止胰島素刺激的胰島素底物受體 1(IRS1)的 307位的絲氨酸磷酸化,相應(yīng)地增加IRS1酪氨酸磷酸化的半數(shù)有效濃度,阻止胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化?？芍?RBP4可能通過干預(yù)胰島素受體的 IRS1-Ras-MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路,從而參與 IR。此外,Yang等[6]研究提示 RBP4可能直接誘導(dǎo)磷酸烯醇或丙酮酸激酶基因表達(dá),增加肝糖輸出,限制肌肉的糖攝取,從而導(dǎo)致全身性的 IR。因此,我們推測(cè)減少血清 RBP4水平可改善 ISI和血糖穩(wěn)態(tài)。

有研究發(fā)現(xiàn) T2DM患者不僅存在著空腹 FFA水平升高,而且餐后 2 h血 FFA水平也明顯高于正常對(duì)照者,可能原因之一為胰島素具有很強(qiáng)的抗脂解作用,使激素敏感性脂酶(HSL)活性下降,脂解減少[7];當(dāng)胰島素生物活性不足時(shí),HSL增加,使 FFA水平升高。原因之二為胰島素能促進(jìn)血糖進(jìn)入脂肪細(xì)胞進(jìn)行代謝,增加 TG合成,有利于 FFA再脂化,降低 FFA釋放入血,糖尿病狀態(tài)下,胰島素生物活性或效應(yīng)不足,產(chǎn)生的葡萄糖利用障礙,抗脂解作用降低,FFA水平升高。亦有研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜上胰島素受體儲(chǔ)備豐富,約 5%與胰島素結(jié)合便能發(fā)揮其最大生理效應(yīng)[8]。在高 FFA環(huán)境下培養(yǎng)的大鼠胰島細(xì)胞,其胰島素受體 B亞單位及IRS-1磷酸化程度較對(duì)照組顯著降低,提示 FFA能抑制胰島素受體酪氨酸激酶活性和 IRS-1的表達(dá),從而使胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)降低?，F(xiàn)有的研究結(jié)果已提示 RBP4與 FFA均可通過相關(guān)途徑影響 IRS-1的生物效能,且本研究結(jié)果顯示 FFA、HOMA-IR為 RBP4的獨(dú)立影響因素,支持此觀點(diǎn)。因此推測(cè)血漿 RBP4水平的升高可能是機(jī)體對(duì) FFA所致 IR的拮抗機(jī)制,并且可能是通過增強(qiáng)酪氨酸磷酸化作用而發(fā)揮作用。二者在 IR的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起協(xié)同作用,但其相互作用機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。相信隨著 IR機(jī)制的逐漸闡明,必將為 T2DM患者 IR的防治開辟新的思路。

1 Kershaw EE,Flier JS.Adipose tissue as an endocrine organ[J].The Journal of Clinical Endocrinology＆Metabolism,2004,89(6):2548-2556.

2 Li R,Wei SQ.Type 2 diabetes mellitus and insulin resistance syndrome[J].Sichuan Medical Journal,2002,23(9):894.

3 Graham TE,Yang Q,Bluher M,et al.Retinol-binding protein 4 and insulin resistance in lean,obese,and diabetes subjects[J].N Engl J Med,2006,354:2552-2563.

4 潘佳秋,王慧慧,田建武,等 .新診斷 2型糖尿病患者血清內(nèi)脂素與視黃醇結(jié)合蛋白 4水平變化及其與胰島素抵抗的關(guān)系 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(6):1986.

5 Ost A,Danielsson A,Liden M,et al.Retinol-binding protein-4 attenuates insulin induced phosphorylation of IRS1 and ERK1/2in primary human adipocytes[J].FASEB J,2007,21(13):3696-3704.

6 Yang Qin,Grahaml TE,Mody N,et al.Serum retinol binding protein-4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2diabetes[J].Nature,2005,436(7049):356-362.

7 吳育紅,張愛珍,李鐸.2型糖尿病患者血漿磷脂脂肪酸譜與胰島素抵抗 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2008,11(9):1547.

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