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國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目《利用克隆表達方法篩選傳染性法氏囊病毒受體》通過驗收

2011-03-31 12:14:58
關(guān)鍵詞:逆轉(zhuǎn)錄表達方法法氏囊

由尹杰超為項目主持人的青年科學(xué)基金項目《利用克隆表達方法篩選傳染性法氏囊病毒受體》通過驗收。傳染性法氏囊病由傳染性法氏囊病毒引起,是危害禽類的一種急性高度接觸性傳染病,并且近年來一直呈現(xiàn)局部高發(fā)的態(tài)勢,對養(yǎng)禽業(yè)危害嚴(yán)重?,F(xiàn)有防治該病的手段是疫苗接種與綜合防治,但仍不能完全控制該病。從病毒的致病機制著手,將有助于制訂更具針對性的預(yù)防和治療措施。經(jīng)過多年研究,人們對于該病的致病機制有了初步認(rèn)識,但病毒受體一直沒有發(fā)現(xiàn),這就大大制約了其分子生物學(xué)的研究進展。本研究采用克隆表達技術(shù),利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體構(gòu)建易感雞法氏囊B淋巴細(xì)胞cDNA文庫,通過轉(zhuǎn)染裝配細(xì)胞獲得含有外源cDNA的逆轉(zhuǎn)錄病毒,再將逆轉(zhuǎn)錄病毒感染小鼠BaF3細(xì)胞。受體cDNA就會在其自身信號肽的引導(dǎo)下表達于BaF3細(xì)胞的表面。該細(xì)胞可與IBDV發(fā)生特異的結(jié)合。而后通過一整套快速、敏感、高通量的篩選方法,找到與病毒結(jié)合的BaF3細(xì)胞,從中克隆受體基因。通過研究病毒與受體的相互作用,進一步證實受體的特異性及初步闡明病毒的致病機理。

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