金曉明 魏 云

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南 長沙 410208;

2.湖南醫(yī)藥工業(yè)研究所,湖南 長沙 410014)

桑皮素為湖南普生制藥有限公司開發(fā)的中藥新藥,用于糖尿病的治療,現(xiàn)對(duì)其主要藥效學(xué)進(jìn)行研究,探討其對(duì)正常動(dòng)物及II型糖尿病模型動(dòng)物的影響。

1 試驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物

昆明種小鼠,由魯抗醫(yī)藥集團(tuán)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)：魯動(dòng)質(zhì)字200008001;Wistar大鼠,山東大學(xué)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)：魯動(dòng)質(zhì)字20001003。NOD小鼠,雌性,7月齡,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供,許可證編號(hào)：SCXK(京)2002-0001。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施合格證號(hào)：魯動(dòng)環(huán)字200001012號(hào)。

1.2 藥品和試劑

桑皮素,由湖南普生制藥有限公司提供;拜唐蘋,由拜耳醫(yī)藥保健有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)：102241;格列齊特片,批號(hào)：021204,山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制藥廠生產(chǎn);血糖試劑盒,中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)：240181;氯化鈉注射液,濟(jì)南三九益民制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)：2002021007-01-01;鏈脲霉素(streptoxicin),Sigma公司,日本制藥株式公社分裝。

1.3 儀器

離心沉淀機(jī),LXJ-Ⅱ型,上海第二分析儀器廠產(chǎn);lab-star全自動(dòng)生化分析儀,南京桃源醫(yī)療器械開發(fā)公司產(chǎn)。

1.4 藥物配制

所用藥物均用氯化鈉注射液配成所需濃度。

1.5 飼料

基礎(chǔ)飼料,由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;高熱量飼料由基礎(chǔ)鼠料加蔗糖、煉豬油和雞蛋充分混勻后,用攪肉機(jī)成形、烤熟后用。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 桑皮素對(duì)正常小鼠血糖的影響

選取體重19～22g的健康昆明種小鼠60只,雌雄各半,按體重隨機(jī)分成6組：對(duì)照組,格列齊特組(80mg/kg),拜唐蘋組(25mg/kg),桑皮素 50.0、25.0、12.5m g/kg組,每組10只。格列齊特組動(dòng)物在測(cè)血糖前2d開始給藥,每日1次,共3次。其他組分別灌胃給予N.S、拜唐蘋和桑皮素連續(xù)14d。各組動(dòng)物給藥容積均為0.2m l/10g。末次藥后1h由小鼠眼球取血,測(cè)空腹血糖值,試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 桑皮素對(duì)正常小鼠血糖(mmo1/L)的影響(±s)

注：**：與生理鹽水對(duì)照組比較,P＜0.01。

組別 劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù) 空腹血糖值對(duì)照組 / 10 6.48±1.02 50.0 10 6.14±0.73 25.0 10 6.56±0.98 12.5 10 6.59±0.73拜唐蘋 25.0 10 6.42±0.84格列齊特 80.0 10 4.73±0.72**桑皮素

由表1可見桑皮素12.5、25.0、50.0mg/kg連續(xù)灌胃給藥14d,小鼠血糖有一定的降低趨勢(shì),但與對(duì)照組比較無顯著性差異。陽性對(duì)照藥拜唐蘋對(duì)正常小鼠血糖也無明顯影響。格列齊特80.0mg/kg給藥后,可見小鼠血糖明顯下降,與對(duì)照組比較有極顯著性差異。

2.2 桑皮素對(duì)NOD小鼠的治療作用

取NOD雌性小鼠50只,按體重隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為模型對(duì)照組、桑皮素高、中、低劑量組及陽性藥組(拜唐蘋)。分別灌胃給予N.S,拜唐蘋 25mg/kg,桑皮素50.0 、25.0、12.5mg/kg,給藥容積為0.2m l/10g,連續(xù)14d后由眼球取血,測(cè)小鼠的空腹血糖值,結(jié)果見表2。

表2 桑皮素對(duì)NOD小鼠血糖(mm ol/L)和胰島素的影響±s)

表2 桑皮素對(duì)NOD小鼠血糖(mm ol/L)和胰島素的影響±s)

注：*：與生理鹽水對(duì)照組比較,P＜0.05;**：與生理鹽水對(duì)照組比較,P＜0.01;胰島素測(cè)試動(dòng)物數(shù)中劑量為7,拜唐蘋組為9。

組別劑量(mg/kg) 動(dòng)物數(shù) 空腹血糖值 胰島素(mμ/L)對(duì)照組 9 18.88±4.65 4.48±2.13桑皮素50.0 10 11.46±3.04**9.14±3.09**25.0 8 11.43±2.75**10.04±3.21**12.5 9 14.11±3.59* 5.54±2.94拜唐蘋 25.0 10 13.47±3.24**6.39±1.85*

由表2可見,桑皮素連續(xù)灌胃給藥14d,對(duì)NOD小鼠血糖有明顯的降低作用,25.0、50.0mg/kg組與對(duì)照組比較有極顯著性差異,12.5mg/kg組與對(duì)照組比較有顯著性差異。同時(shí),對(duì)NOD小鼠的低胰島素狀態(tài)有一定的改善作用,25.0、50.0mg/kg組胰島素水平明顯升高,與對(duì)照組比較有極顯著性差異。

2.3 桑皮素對(duì)II型糖尿病大鼠的治療作用

取健康 W istar大鼠,雌雄各半,體重 250～300g,取10只作為正常對(duì)照組;其余動(dòng)物禁食12h(不禁水),腹腔內(nèi)注射鏈脲霉素30mg/kg(0.1m ol/L檸檬酸pH 4.2配制成1%溶液,注射時(shí)冰浴),連續(xù)3d,末次注射14d后將大鼠禁食12h(不禁水),剪尾采血測(cè)定血糖,取血糖值高于11.1mmo l/L的大鼠,飼以高熱量飼料,正常組動(dòng)物給予基礎(chǔ)飼料。給予鏈脲霉素和高熱量飼料后,糖尿病造模組動(dòng)物血糖、胰島素和糖化血紅蛋白均顯著增高,形成了II型糖尿病模型。

8周后造模動(dòng)物剪尾取血,按血糖值平均分為以下5組：模型對(duì)照組,桑皮素高、中、低劑量組及陽性藥組(拜唐蘋),每組10只。分組后,全部給予正常飼料并給藥,連續(xù)4周。正常組及模型組灌胃給予N.S,桑皮素高、中、低劑量分別灌胃給予 30.0、15.0、7.5m g/kg,拜唐蘋組劑量為15.0mg/kg,各組給藥容量均為10m l/kg,每日1次。

給予桑皮素前,各劑量組血糖值和模型組比較無顯著性差異。連續(xù)給藥4周,桑皮素各劑量組血糖濃度明顯降低,15.0、30.0mg/kg組與模型組比較有極顯著性差異,7.5mg/kg組與對(duì)照組比較有顯著性差異。拜唐蘋15.0mg/kg ig給藥有降低血糖濃度的作用,與對(duì)照組比較有極顯著性差異。桑皮素給藥后對(duì)高胰島素血癥有抑制作用,30.0mg/kg胰島素濃度與對(duì)照組比較有顯著性差異。桑皮素對(duì)糖化血紅蛋白的升高也有明顯的拮抗作用,15.0、30.0 m g/kg組與對(duì)照組比較有顯著性差異。拜唐蘋15.0 m g/kg ig給藥有一定的降低胰島素水平的趨勢(shì),但與對(duì)照組比較無顯著性差異,對(duì)糖化血紅蛋白的升高有明顯的抑制作用,與對(duì)照組比較有極顯著性差異。結(jié)果見表3。

表3 桑皮素對(duì)糖尿病大鼠血糖、胰島素及糖化血紅蛋白的影響(±s)

表3 桑皮素對(duì)糖尿病大鼠血糖、胰島素及糖化血紅蛋白的影響(±s)

注：△△：與生理鹽水對(duì)照組比較,P＜0.01;**：與模型組比較 P＜0.01;30.0mg/kg組胰島素?cái)?shù)據(jù)為9。

組別 劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)血糖(mmol/L)藥前值 藥后值胰島素(mμ/L) 糖化血紅蛋白(%)對(duì)照組 / 10 6.26±0.84 6.30±1.10 26.81±13.43 3.12±0.91模型組 / 9 16.84±4.41△△ 19.32±4.04△△ 74.43±13.13△△ 8.44±0.53△△桑皮素30.0 10 16.51±3.92△△ 10.58±2.36**△△ 59.04±15.71*△△ 6.55±0.53**△△15.0 10 16.47±3.44△△ 12.03±1.98**△△ 66.44±10.88△△ 6.46±0.45**△△7.5 9 16.83±4.74△△ 15.42±2.30*△△ 72.24±9.59△△ 7.90±0.45△△拜唐蘋 15.0 10 16.35±5.84△△ 12.26±2.75**△△ 62.53±16.25△△ 6.48±0.71**△△

3 試驗(yàn)小結(jié)

本試驗(yàn)觀察了桑皮素對(duì)正常小鼠血糖、NOD小鼠血糖和胰島素,II型糖尿病模型大鼠血糖、胰島素、糖化血紅蛋白和糖耐量的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明：(1)桑皮素 50.0、25.0、12.5mg/kg連續(xù)灌胃給藥14d,對(duì)正常小鼠血糖無明顯影響。(2)桑皮素12.5、25.0、50.0mg/kg連續(xù)灌胃給藥 14d,對(duì) NOD小鼠血糖有明顯的降低作用,同時(shí)可顯著升高動(dòng)物胰島素水平。(3)桑皮素30.0、15.0、7.5m g/kg連續(xù)灌胃給藥14d,對(duì)鏈脲霉素加高熱飼料導(dǎo)致的II糖尿病大鼠有明顯的治療作用,15.0、30mg/kg組動(dòng)物血糖濃度、胰島素和糖化血紅蛋白均降低,與模型組比有顯著性或極顯著性差異。同時(shí),桑皮素 30.0、15.0、7.5mg/kg可明顯改善糖尿病動(dòng)物的糖耐量。

[1]蔡文就,熊曼琪,朱章志,等.實(shí)驗(yàn)性 NIDDM大鼠模型及其胰島素抵抗的初步研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),1997,14(2)：87-91.

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