王延樹(shù)，李建麗，鄒麗紅，梁武，尤永君，劉浩

（瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司，河北保定 071000）

畜禽母源抗體對(duì)保護(hù)后代，繁衍種群，起著極為重要的作用。初生動(dòng)物，由于其本身的防御機(jī)能尚未成熟，主要靠母源抗體來(lái)保護(hù)其健康成長(zhǎng)。禽類則通過(guò)卵黃將lgG傳遞給雛禽。當(dāng)卵還在卵巢時(shí)，母禽血清中的免疫球蛋白就已輸送到卵黃中。因此，卵黃中l(wèi)gG的含量和母禽血清中的含量基本相同。但隨著時(shí)間的推移，幼雛的抗體在消耗，不同疾病的抗體消減時(shí)間不同。H9亞型禽流感（H9）和新城疫（ND）是目前影響我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展的主要疫病，通過(guò)本試驗(yàn)以了解子代通過(guò)母源抗體獲得被動(dòng)免疫力的情況以及母源抗體的消長(zhǎng)情況，掌握母源抗體對(duì)滅活疫苗免疫效果的影響，為在實(shí)際生產(chǎn)中制定科學(xué)的免疫程序提供可靠依據(jù)。

一、材料與方法

1.材料。

⑴實(shí)驗(yàn)用雞:1日齡健康海蘭褐蛋雞購(gòu)自徐水大午公司；羅斯308肉仔雞購(gòu)自承德三榮公司。

⑵新流二聯(lián)疫苗：優(yōu)瑞康（雞新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗）由瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)100202。

⑶抗原和血清：禽流感H9 HI抗原、禽流感H9 Hl血清和禽流感陰性血清，均購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。新城疫HI抗原、新城疫Hl血清和新城疫陰性血清均購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

⑷1% 雞紅細(xì)胞液：采取成年公雞的肝素抗凝血，用生理鹽水反復(fù)洗滌4次，配制成1% 雞紅細(xì)胞液。

2.方法。

⑴母源抗體的測(cè)定： 選取20只羅斯 308肉仔雞分別于 1、3、5、7、9、14、17、21、25和 28日齡用 Hl試驗(yàn)測(cè)定其H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平；選取20只海蘭褐蛋雞分別于1、3、5、7、9、14和 21日齡用Hl試驗(yàn)測(cè)定其H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平。

⑵母源抗體對(duì)滅活疫苗免疫的效果影響：根據(jù)測(cè)定海蘭褐蛋雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平及臨床免疫習(xí)慣，選取80只海蘭褐蛋雛雞平均分為A、B兩組，A組于7日齡經(jīng)頸背部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗，B組于21日齡經(jīng)頸背部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗，于免疫后每周隨機(jī)選取20只測(cè)定H9亞型禽流感HI抗體水平。隨機(jī)抽取40只肉仔雞于7日齡經(jīng)頸部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗，于免疫后每周隨機(jī)選取20只測(cè)定H9亞型禽流感和新城疫HI抗體水平。

二、結(jié)果

1.雛雞不同時(shí)期母源抗體的變化情況。分別于1、3、5、7、9、14和21日齡用Hl試驗(yàn)測(cè)定海蘭褐蛋雛雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平，結(jié)果見(jiàn)表1和圖1，由表1可知，蛋雛雞新城疫HI抗體在14日齡時(shí)處于保護(hù)臨界值（4 Log2）以下，H9亞型禽流感HI抗體水平在21日齡時(shí)處于保護(hù)臨界 值（4 Log2）以下。在21日齡時(shí)蛋雛雞新城疫HI抗體水平均值為1.5 Log2，部分雛雞母源抗體已消失，若選用此段時(shí)間計(jì)算半衰期顯然不準(zhǔn)確，應(yīng)選用1～14日齡，新城疫HI抗體半衰期為2.92 d。蛋雛雞1～21日齡H9亞型禽流感的HI抗體半衰期為3.56 d。

表1 海蘭褐商品代ND和H9母源抗體衰減規(guī)律

分 別 于1、3、5、7、9、14、17、21、25和28日齡用Hl試驗(yàn)測(cè)定羅斯308肉仔雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平，結(jié)果見(jiàn)表2和圖2，由表2可知，肉仔雞新城疫抗體在14日齡時(shí)處于保護(hù)臨界值（4 Log2）以下，H9抗體水平在21日齡時(shí)處于保護(hù)臨界值（4 Log2）以下。在21日齡時(shí)肉仔雞新城疫HI抗體水平均值為1.05 Log2，部分雛雞母源抗體已消失，若選用此段時(shí)間計(jì)算半衰期顯然不準(zhǔn)確，應(yīng)選用1～17日齡，新城疫HI抗體半衰期為3.23 d。肉仔雞1～25日齡H9亞型禽流感HI抗體半衰期為3.25 d。

2.不同抗體水平雛雞免疫效果。蛋雛雞不同日齡免疫優(yōu)瑞康后H9亞型禽流感HI抗體變化水平見(jiàn)表3。由表3可知，在雞只母源抗體較低的情況下，免疫疫苗后抗體水平提升較快。

肉仔雞7日齡免疫優(yōu)瑞康后H9亞型禽流感和新城疫抗體水平見(jiàn)表4。肉仔雞于7日齡免疫一次雞新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗，H9亞型禽流感HI抗體水平可以達(dá)到保護(hù)值以上，但新城疫抗體水平于免疫后一周低于保護(hù)值，并且抗體水平隨著時(shí)間的推移提升并不理想，需要加強(qiáng)免疫。

三、討論

由于母源抗體對(duì)免疫效果的影響，近年來(lái)國(guó)內(nèi)有很多文章報(bào)道了母源抗體的消減規(guī)律。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了蛋雛雞和羅斯308肉仔雞的母源抗體消減變化規(guī)律，不管是蛋雛雞還是肉仔雞母源抗體水平隨時(shí)間推移在遞減，兩個(gè)品種的雛雞新城疫HI抗體在14日齡時(shí)下降到臨界保護(hù)值（4 Log2）以下，H9亞型禽流感HI抗體在21日齡時(shí)下降到到臨界保護(hù)值（4 Log2）以下。無(wú)論是蛋雛雞還是肉仔雞，1日齡的H9亞型禽流感抗體水平都要高于新城疫HI抗體水平，這與劉國(guó)華發(fā)表文章相同。蛋雛雞新城疫HI抗體在1～14日齡半衰期為2.92 d。蛋雛雞H9亞型禽流感的HI抗體在1～21日齡半衰期為3.56 d。商品代肉仔雞H9亞型禽流感HI抗體1～25日齡半衰期為3.25 d，新城疫HI抗體1～17日齡半衰期為3.23 d。H9亞型禽流感的HI抗體消減速度要稍慢于新城疫的HI抗體消減速度。

表2 白羽肉仔雞ND和H9母源抗體衰減規(guī)律

表3 蛋雛雞免疫后抗體水平

表4 肉仔雞免疫后抗體水平

通過(guò)本次免疫試驗(yàn)證實(shí)母源抗體對(duì)滅活疫苗抗體的產(chǎn)生存在較大的干擾性，母源抗體較高時(shí)免疫效果較差，只有當(dāng)ND母源抗體降到較低水平（小于3 Log2，一般要到15～20日齡后）時(shí)，對(duì)滅活疫苗免疫影響才非常小，方可產(chǎn)生較為可靠的免疫力。但由于雛雞免疫力發(fā)育不完善，此時(shí)免疫需要大約三周時(shí)間才能產(chǎn)生保護(hù)力，較晚日齡免疫不適應(yīng)臨床推廣。具體首免時(shí)間的確定，還應(yīng)根據(jù)母源抗體的滴度計(jì)算。對(duì)于肉仔雞7日齡應(yīng)用雞新城疫-H9亞型禽流感滅活疫苗，能夠達(dá)到對(duì)H9亞型禽流感產(chǎn)生保護(hù)的HI抗體水平，但對(duì)于新城疫還需加強(qiáng)免疫。